第27卷第4期2021年7月食品与生物技术学报JournalofFoodScienceandBiotechnologyVol.27Jul.No.42021:167321689(2021)0420075204DEAE纤维素分别猪血清蛋白罗磊1,樊金铃1,丁霄霖2(1.河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;2.江南大学食品学院,江苏无锡214122)摘要:对DEAE纤维素52(简称DE52)分别猪血清蛋白进展了争辩。结果说明:pH714时,以0～013mol/L的NaCl磷酸盐缓冲液梯度洗脱,DE52可以将血清蛋白分为7个局部。在梯度洗脱的根底上,分别以NaCl浓度0、0105、0108、011、0112、0115、012mol/L的磷酸盐缓冲液进展阶段洗脱,将血清蛋白分为8个局部。关键词:猪血清蛋白;DEAE纤维素52;分别纯化:Q503;Q59211文献标识码:AStudyofPorcineSerumProteinFractionatedbyDiethylaminoethylCelluloseLUOLei1,FAN激n2ling1,DINGXiao2lin2(1.CollegeofFoodandBiotechnology,HenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang471003,China;2.SchoolofFoodScienceandTechnology,激angnanUniversity,Wuxi214122,China)Abstract:ThismanuscriptstudiedtheporcineserumproteinfractionatedbyDiethylaminoethylCellulose52.Theresultshowedsevenfractionswereobtainedelutedwith0～013mol/LNaClPBSwhenpHis714.EightPartsofporcineserumproteinwereobtainedbyPhaseElutionandtheconcentrationofNaClinPBSare0,0105,0108,011,0112,0115,012mol/L.Keywords:PorcineSerumprotein;DiethylaminoethylCellulose52;separate猪血由红细胞和血浆组成,其中血浆蛋白约占血液总量的416%。在除去纤维蛋白原的血清中,蛋白质组成格外简单,其中白蛋白含量最高,其次为免疫球蛋白。除了免疫球蛋白,猪血清中的运---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---铁蛋白、溶菌酶均具有生物活性。依据国家统计局的数据,2004年我国猪血产量到达140万吨,而这些猪血并没有得到有效的利用,因此从猪血中提取各种活性蛋白具有“变废为宝”的作用。目前,对于猪血中各种活性蛋白的应用,正日益引起人们的重[1]。猪血清中G型免疫球蛋白(简称IgG)的等电点为714,当洗脱液pH值为714时IgG不带电,而此时血清中其它蛋白质带负电荷,为阴离子。依据各种猪血清蛋白与DEAE纤维素52(简称DE52)结合程度强弱的不同,通过转变离子强度,可以将不同的蛋白质分别洗脱下来,到达分别纯化的目的[2,3]。为了充分开发猪血资源,特别是对血清中各类具有生物活性蛋白质的利用,作者以DEAE纤维素52对猪血清蛋白进展了分别纯化争辩[4]。收稿日期:2007207227.作者简介:罗磊(19762),男,河南南阳人,工学博士,副教授,硕士生导师,主要从事生物保健食品、药食同源食品的应用与开发,以及自然活性物质的争辩.Email:Luolei_cn@yahoo1994-2021ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.://cnki---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---视76食品与生物技术学报第27卷1材料与方法1.1仪器与材料DEAE纤维素52,美国Whatman公司产品;HD23型紫外检测仪,上海沪西仪器厂制造;DB23型层析谱数据分析系统,南京新校园生物技术争辩所制造;HL21型恒流泵,BSZ2100型自动分步收集器,上海沪西仪器厂制造;TB2021000型梯度搅拌器,上海新波无线电厂制造;MK3型酶标仪,上海雷勃仪器厂制造;DYCZ224D型电泳槽,北京市六一仪器厂制造。猪血采自无锡市肉联厂,4℃8000r/min离心10min,除去血球和纤维蛋白原,得到血清。猪IgG,白蛋白标样自Sigma公司购得。1.2试验方法1.2.1DE52色谱柱的制备1)称取肯定量的DE52,参加20倍体积015mol/L的HCl中,放置50min并轻轻搅拌。将DE52移入布氏漏斗抽滤并用蒸馏水洗涤至pH大于4。2)将抽滤后的DE52移入20倍体积015mol/L的NaOH中,放置50min并轻轻搅拌。将DE52移入布氏漏斗抽滤并用蒸馏水洗涤至pH小于8。3)将DE52移入20倍体积缓冲液中,真空脱气后装柱,用1000mLpH714的0101mol/L的磷酸盐缓冲液平衡。1.2.2猪血蛋白样品的色谱分别1)猪血清蛋白的梯度洗脱:取015mL离心后的血清上样,以250mLpH714的0101mol/L的磷酸盐缓冲液和250mLpH714、NaCl浓度为013mol/L的0101mol/L磷酸盐NaCl缓冲液梯...