喉癌组织蛋白质组学比较探究［摘要］目的通过对人类的喉癌组表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究，运用网上数据库对不同蛋白点的肽指纹图进行分析和鉴定。方法选取本院耳鼻喉科2011年广5月喉癌患者的病理临床资料进行回顾性分析与研究。结果随机将新鲜喉癌标本分为高分化癌组和低分化癌组，并提取两组的组织总蛋白进行双向凝胶电泳分析，将分析结果与正常黏膜组织对照，将得到的高分化与低分化癌组织之间的表达式进行比较分析。结论高分化癌组织与低分化癌组织的表达显示，喉癌细胞的分化程度与蛋白质组学的关系极为密切。［关键词］喉癌；蛋白质组学；双向凝胶电泳［中图分类号］R739.65［文献标识码］B［文章编号］1673-9701(2012)06-0031-03ComparativeproteomicanalysisofdifferentiationcanceroflarynxLVJingyaoLIZhihaiCAIZhiyiDepartmentofOtolaryngology,TaizhouHospitalinZhejiangProvince,Taizhou318000,China［Abstract］ObjectiveTostudyondifferencesofhumanlaryngealcarcinomagroupexpressioninhigh,lowcancergroup,usingonlinedatabasesofdifferentproteinspotsofthepeptidefingerprintanalysisandidentification.MethodsAnalysisandstudyonENTpathologyretrospectivelyclinicaldatafrom2011Januaryto2011MayinourhospitaLResuItsThefreshspecimensoflaryngealcarcinomaclassifiedaswell-differentiatedcancergroupandthelowdifferentiationcancergroup・Theextractionoftwogroupsoftissueprotein,fortwo-dimensionalgelelectrophoresis,comparedtothenormalmucosatissue・ConelusionHighdifferentiationcarcinomaandpoorlydifferentiatedcancertissuesexpressionshows,laryngealcancercelldifferentiationandproteomicshaveverycloserelationship・[Keywords]Laryngealcancer；Proteomics；Two-dimensionalgelelectrophoresis目前喉癌的发病率约占全身恶性肿瘤的5%,是头颈部肿瘤中较为常见的恶性肿瘤，喉癌的总体生存率低，就算积极投入治疗，现阶段的医疗水平对其生存率并无明显改善。近年来，随着经济的发展，人类的生存环境日趋恶化，喉癌的发病率也呈现逐年递增的趋势。蛋白质组学是从整体上研究其在不同时间和空间中所发挥的功能及蛋白质间的相互作用的一门新兴的学科，其特征就是建立双向电泳差异图谱，采用透视全体基因在特定细胞或组织的动态表达的分析方法，从而达到解释蛋白质功能与细胞生命活动的规律[1-3]o另外，还有部分的实验室将研究的结果建立了数据库，以利于蛋白质组学技术在肿瘤研究的中临床应用。本文选取本院耳鼻喉科2011年「5月喉癌患者的病理临床资料6例进行回顾性分析与研究，通过运用网上数据库对人类的喉癌组织表达差异中的高、低分化癌组之间的相互差异性的研究，从而达到对不同蛋白点的肽指纹图的分析和鉴定，并总结分析，现报道如下。1资料与方法1.1临床资料选取本院耳鼻喉科2011年「5月喉癌患者的临床资料6例进行回顾性分析与研究。6例喉癌患者中，男4例，女2例，年龄30〜60岁，病理结果显示其病理组织来源于鳞状上皮组织其中高分化鳞癌2例，低分化鳞癌4例。6例患者均作为蛋白质组研究的组织标本，同时选取对侧未被肿瘤侵犯的正常喉室或室带黏膜作为对照组的正常黏膜，6例配对的癌旁正常喉黏膜组织均距离肿块边缘达5cm以上。1.2研究方法1.2.1实验的试剂与仪器的备用组织物备用：将所有选取的喉癌组织及正常黏膜均用冰盐水清洗干净，滤纸吸去多余的液体1min后将其置于-7（TC冰箱保存备用，此项过程的处理需于组织离体后30min内完成。试剂备用：选用超纯尿素（urea）、甘氨酸（glycine）、硫月尿（sulfocarbamide）四甲基乙二胺（TEMED）、十二烷基磺酸钠（SDS）和低分子量蛋白标记Tris碱、pH3〜10固相化线性17cm干胶条（IPGstrip）购自Bio-Rid公司oCHAPS（两性离子去垢剂）、二硫苏糖醇（DTT）、10固相化线性13cm干胶条及考马斯亮蓝R-250,以上均购自上海生工公司。仪器备用：选用低温高速离心机（Beckman公司）、Imagescanner扫描仪（AmershamPhannacia公司）、真空冷冻干燥仪（SavantspeedV&C&UVS400）、EttanDALT垂...