自身血清、γ-干扰素对风湿性心脏病患者瓣膜成纤维细胞胶原合成的影响

自身血清、γ-干扰素对风湿性心脏病患者瓣膜成纤维细胞胶原合成的影响摘要:目的了解风湿性心脏病患者血清及γ-干扰素对瓣膜成纤维细胞胶原合成的影响,探讨转化生长因子β(TGF-β)在瓣膜纤维化中可能起的作用和γ-干扰素用于预防及治疗瓣膜纤维化的可能性。方法取5例风湿性心脏病患者的二尖瓣和主动脉瓣成纤维细胞进行体外培养并传代,将培养的每一例患者的二尖瓣、主动脉瓣细胞分为7组,每组均为5例。用[2,3-3H]脯氨酸掺入法测定各组细胞的胶原合成。结果患者自身血清使培养的瓣膜成纤维细胞胶原合成明显增加,这一作用能被TGF-β中和抗体抑制,γ-干扰素能显著抑制瓣膜成纤维细胞的胶原合成。结论风湿性心脏病患者血清中活性TGF-β升高可能在瓣膜纤维化中起重要作用,γ-干扰素有可能用于临床预防或减轻瓣膜纤维化。关键词:γ-干扰素风湿性心脏病转化生长因子β中分类号:R541.2文献标识码:A文章编号:1007-4848(2000)03-0175-03EffectsofAutologousSerumandγ-InterferononCollagenSynthesisbyValvularFibroblastinPatientwithRheumaticHeartDiseaseYANGJun-min,SONGLing,ZHANGBao-ren,etal.(DepartmentofCardiacandThoracicSurgery,SouthwestHospital,TheThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,P.R.China)Abstract:ObjectiveTounderstandtheeffectsofserumofpatientswithrheumaticheartdiseaseandγ-interferononcollagensynthesisbyvalvularfibroblastculturedinvitro,soastoinvestigatethepossibleroleoftransforminggrowthfactorβingenesisofvalvularfibrosisandthepossibilityofγ-interferonusedtopreventvalvularfibrosisinpatientwithrheumaticheartdisease.MethodsMitralandaorticvalvefibroblastsfrom5patientswithrheumaticheartdiseasewereculturedinvitro,theculturedcellsfromeachpatientweredividedinto7groups,5casesineachgroup.Collagensynthesisbyculturedcellswasmeasuredby2,3-3H-prolineincorperationmethod.ResultsCollagensynthesiswasincreasedsignificantlyinpatients'serum,thiseffectwasinhibitedbytransforminggrowthfactorβneutralizeantibody.γ-Interferoninhibitedcollagensynthesisbyculturedvalvefibroblastsignificantly.ConclusionElevationofactivetransforminggrowthfactorβinserumofpatientwithrheumaticheartdiseasemayplayanimportantroleinvalvefibrosis.Theabilitytoinhibitcollagensynthesisbyvalvefibroblastimpliespotentialclinicalusefulnessforγ-interferoninthetreatmentofpatientwithrheumaticheartdisease.Keywords:γ-InterferonRheumaticheartdiseaseTransforminggrowthfactorβ风湿性心脏病瓣膜纤维化是一个逐渐发展的病理过程,其机制仍不清楚。能否应用某些药物减轻或预防心瓣膜纤维化,目前国内外尚缺乏这方面的研究。为此,我们就风湿性心脏病患者自身血清、γ-干扰素对瓣膜成纤维细胞胶原合成的影响进行了研究。1材料与方法1.1瓣膜和试剂因风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴关闭不全、主动脉瓣狭窄伴关闭不全行二尖瓣和主动脉瓣双瓣膜置换术5例,男3例,女2例;年龄28~35岁。取主动脉瓣和二尖瓣置于4℃DMEM(Dulbecco'sModifiedEagl'sMedium,Gibco公司)中,30分钟内使用。术前取5例患者血清-20℃冷冻保存备用,5例患者均处于非风湿活动期。转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGF-β)中和抗体#477-bleed8及正常火鸡血清由美国NIHNanRoche教授惠赠,3~5μl抗体可以中和4ngTGF-β。人γ-干扰素由芬兰国家公共卫生研究院CariCantell教授惠赠。1.2实验分组每例患者的心瓣膜组织经细胞培养传代后分为7组,每组为5例。组1:作为对照,以无血清DMEM培养,为培养瓣膜成纤维细胞的基础胶原合成;组2:以无血清DMEM+500Uγ-干扰素培养;组3:以含20%正常AB型人血清DMEM培养;组4:以含20%患者自身血清DMEM培养;组5:以含20%患者自身血清DMEM+5μlTGF-β中和抗体培养;组6:以含20%患者自身血清DMEM+5μl正常火鸡血清培养;组7:以含20%患者自身血清DMEM+500Uγ-干扰素培养。1.3细胞培养及胶原合成...

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