纤维素酶提取法与传统提取法在苦参提取中的应用李明松1刘文2田海林1(1安顺职业技术学院贵州安顺561000)(2贵阳中医学院贵州贵阳550002)【摘要】目的用苦参提取苦参碱，对其纤维素酶提取法和传统提取法进行对比实验。方法纤维素酶提取法(简称酶提取法)，即每克生药加入50U(0.25g)纤维素酶，充分搅拌，其他工艺同原工艺；传统提取法。结果酶提取法提高了苦参碱的收率，与传统提取法相比有显著性差异，P<0.05o结论纤维素酶的加入，提高了苦参碱的收率。【关键词】纤维素酶酶解技术传统提取法苦参碱含量测定【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)34-0106-02TheApplicationoftheCellulase-MethodandTradition-MethodforSophoraFlavescensExtractionLiMing-song1LiuWen2TianHai-linl(l.AnshunVocationalandTechnicalCollege,Guizhou,561000,China;)(2GuiyangCollegeofTraditionalChineseMedicine,Guizhoib550002,China)[Abstract]Objective：Toextractmatrineinsophoraeflavexcensandtodocomparativeexperimentoftheextractionwithcellulase-methodandtradition-method・Methods:Cellulaseextraction(Itiscalledenzymeextractionforshort),Itmeansadding50U(0.25g)cellulosetoeachgramofcrudedrugandmixwell.Anotherprocessarethesameasoriginalone;Traditionalextraction.Results:Thematrine’syieldisimprovedbytheenzymeextraction.Ithassignificantdiffereneetocomparewiththetraditionalextraction,P<0.05.Conclusion:Thematrine’syieldcanbeimprovedbycellulase-adding.【Keywords]cellulosethetechnologyofenzymatichydrolysistraditionalextractionmatrinecontentdetermination传统的提取方法有煎煮、浸渍、渗漉、回流等，这些方法存在着一些不足之处，女m煎煮法提取温度高、浸渍法周期长、渗漉法和冋流法成本高等。近年来，在中药提取方面出现了许多新技术，中药酶解技术就是其中的一种。中药酶解技术⑴就是根据植物药材细胞壁是由纤维素构成，利用酶反应所具有的高效专一性⑵，选择相应的酶，将细胞壁水解或降解，破坏细胞壁的组织结构，使其有效成分暴露出来，并溶解于溶剂中，从而达到提取细胞内有效成分的新方法，由于植物提取过程中的屏障一一细胞壁被破坏，因而酶解有利于提高有效成分的提取率。根据这一原理，我们选用苦参提取苦参碱⑶作为研究对象，并对酶提取法和传统提取法进行对比实验，来验证纤维素酶对苦参提取苦参碱的影响。一、实验仪器与药品纤维素酶粗品（活力单位10000µ/g）批号：F20050512,国药集团化学试剂有限公司；对照品苦参碱（批号：110805-200306）供含量测定用，中国药品生物鉴定所；药材苦参为豆科槐属（Leguminosae）ft物SophoraflavescensAit的干燥根,贵阳市花果园药材批发市场提供，经中药鉴定教研室鉴定；高效液相色谱仪（LC5A）,日本岛津；所用试剂均为分析纯。二、实验方法与结果（-）色谱条件[4]色谱柱：氨基柱，流动相：乙氧■无水乙醇・3%磷酸溶液（80：10：10）；流速：lml/min,柱温30°C,检测波长：220nm,在此条件下，药材中苦参碱与其他成分能很好地分离。（二）标准品溶液的制备精密称取苦参碱标准品，置10ml容量瓶中,加甲醇溶解至刻度，摇匀，得到浓度分别为0.002、0.014、0.026、0.050、0.062、0.074、0.086mg\ml的苦参碱标准溶液。（三）从苦参中提取苦参碱的原工艺（供试品的制备方法）称取苦参药材约50g,精密称定，加水400ml,HCL调PH4.5,置于50°C的水浴中浸泡15min,煎煮两次，每次30min,滤过，合并滤液，浓缩至约200ml,离心（3000r/min）lOmin,取滤液转移至250ml容量瓶中，加水定容到刻度,摇匀，用10ml移液管精密吸出10ml,然后分别用20、20、15、15ml氯仿萃取四次，挥干氯仿，加入甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇定容到刻度，即得。（四）线性范围的考察精密吸取浓度为4.024µg•ml-l的苦参碱对照品溶液0.5µl>3.5µl>6.5µk9.5µL12.5µk15.5µk18.5µl>21.5µl,按色谱条件进样，测定峰面积。以苦参碱对照品（x,mg•ml...
