使用双三元梯度液相色谱(DGLC)———让工作变得更液相色谱技术在经过长时间有关速度的讨论后,开始逐渐回归到关注液相的实用,说到底,一个技术的好坏优劣还是要看它解决实际问题的能力1美国戴安公司一向以离子色谱著称于世,近十年开始在液相色谱技术方面也不断推出新的技术,UltiMate3000双三元梯度液相色谱(DGLC)就是在近年来推出的最实用的液相色谱技术1戴安双三元梯度系统是在一个仪器箱内放置两台三元梯度泵,通过共用自动进样器、柱温箱、软件和电脑达到两套分析系统的功能,可以有以下的几种组合方式:双三元泵并联,双三元泵串联,在线固相萃取,不同应用间切换,二维或多维色谱分析1双三元梯度泵并联使用:一套双梯度系统可以完成两套单梯度系统的工作,共享自动进样器,效率提高100%1双三元梯度泵串联使用:两个流路共用自动进样器和检测器:一个泵用于分析,另一个泵用于色谱柱再生,色谱柱在两个流路间切换,从运行周期中减去冲洗及平衡色谱柱的时间,可缩短20%—50%的运行时间1全自动在线固相萃取:一个泵用于在线固相萃取,另一个泵用于色谱分析,吸附在SPE柱的待分析物通过切换阀切换到分析流路中,可以将原来用4—5h进行固相萃取前处理的样品缩短到20min左右在线完成,净化或浓缩样品并直接分析.不同应用间自动切换:针对同时使用不同淋洗液(正相和反相淋洗液)的用户,可以通过两个泵和两个十通切换阀切换实现1可使用不同的溶剂组合,不同的色谱柱,通过变色龙(Chromeleon)软件在两个应用之间自动切换,不需要手工更换溶剂及色谱柱,适合在两种不同应用间反复切换1二维或多维色谱分析:二维或多维液相可以用来分析复杂的样品以及高的峰容量,二维色谱可以是两种不同分析机理的色谱法结合,比如一维是离子交换(IEX),第二维为反相液相(RP2LC)或者是亲和色谱与RP2LC结合,仪器包括了所有二维所需的管路套盒和连接指导,变色龙软件可实时监控全部流程,样品在第一根色谱柱上分离,与色谱柱选择性相同的组分结合到柱上,通常得到一个单峰,然后这个组分被转移到第二根色谱柱上分离分析1以上组合中最具有实用价值的方式是“全自动在线固相萃取”1利用这种组合方式,您可以实现复杂样品的直接进样,色谱分析,可以将原来需要用天来计算样品前处理及色谱分析时间缩短到短短的几十分钟甚至十几分钟,对于水、油、血液、体液等等各种复杂的样品基质,需要做的仅仅是:11启动仪器,21得到结果1实例测定实例为食用油中多环芳烃的在线固相萃取及液相色谱分析,可以简单有效地完成食用油样品中美国EPA610方法所列出的12种多环芳烃类化合物的在线固相萃取2HPLC的分析1仪器条件:UltiMateDPG3600A泵(带脱气机),UltiMateTCC23200柱温箱(带两个六通阀),WPS3000TSL自动进样器,RF2000荧光剂监测器,使用变色龙软件控制仪器运行1色谱条件:固相萃取柱:ChromSpherPi,(310mm×80mm,Varian),分析柱:SupelcoPAH(416mm×250mm),进样体积80μl(使用100μl进样环),柱温30℃,自动进样器温度40℃,流动相A:水,B:乙腈,C:异丙醇1食用油样品在线固相萃取和HPLC分离实验流程见图1到图31戴安(DIONEX)园地使用双三元梯度液相色谱(DGLC)———让工作变得更简单1期155图1泵A吸取异丙醇将样品运送至固相萃取柱,在线富集,同时泵B平衡分析柱图2泵A吸取乙腈水溶液将异丙醇和油从萃取柱上冲干净,同时仍使用泵B平衡分析柱图3将富集了被分析物的固相萃取柱切换到分析流路,从而实现样品的在线富集和分析图4为美国EPA610方法所列出的12种多环芳烃类化合物的连续7次进样的标准色谱图1保留时间的RSD在01026%—01072%之间,色谱峰面积的RSD在411%—617%之间1图5为3种食用油样品的在线固相萃取2HPLC色谱图1图412种多环芳烃类化合物标准色谱图图53种食用油样品的在线固相萃取2HPLC色谱图色谱峰:11phenanthrene;2.anthracene;3.fluoranthene;4.pyrene;5.benzo[a]anthracene;6.chrysene;7.benzo[b]fluoranthene;8.benzo[k]fluoranthene;9.benzo[a]pyrene;10.dibenzo[a,h]anthracene;111benzo[g,h,i]perylene;121indeno[1,2,32cd]pyrene;131enzo[b]crysene(内标物)©1994-2014ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net