astme214901在动态接触条件下测定稳态抗菌剂的抗菌行为

ASTME2149-01在动态接触条件下测定稳态抗菌剂的抗菌行为1范围(1)该测试法用于评价非溶出型抗菌试样在动态接触细菌的条件下对细菌生长的抑制行为。该法克服了采用经典抗菌测试法时所存在的困难,如AATCC100中要确保样品与培养液表面紧密接触、AATCC147中不合理静态条件的应用以及灵敏性、重现性问题等。该法可用于测定多种污染物。(2)通过从测试样到同步运行控制的结果对比来测定表面的抗菌活性;(3)通过抑菌区出现的前后来测定溶出抗菌剂的存在。2参考文献(1)ASTM标准E1054评价了抗菌剂在消毒剂、食品加工用消毒杀菌剂、产品的防腐或保存中的抑菌行为;(2)其他文献AATCC147-1998,织物抗菌活性的评价:平行条纹法;AATCC100-1999,织物抗菌性的整理。3原理稳态抗菌剂(如表面粘结材料)在常规使用条件下并不容易扩散到周围环境中,如AATCC147测试法直接依赖于抗菌剂从处理样品中的迅速溶出性,而其中这些处理样品并不适合用于评价稳态抗菌剂的抗菌活性。该法通过在测试过程中不断搅拌放在细菌悬浮液中的测试样以保证细菌与处理纤维、织物或其他基底的良好接触。该测试法适用于评价在充分条件控制下的受压或修饰的样品。注:上述的受压可包括洗烫、穿、摩擦、辐射、蒸汽灭菌、紫外曝光、溶剂处理、热传感或类似的物理或化学处理。4强调及使用基底束缚的抗菌剂的抗菌活性取决于细菌和活性化学剂间的直接接触。该测试法通过振荡在一定浓度细菌悬浮液中的表面束缚材料样品(样品与细菌接触时间为1h或由调查者指定时间)。悬浮液连续稀释2次,可以测定悬浮液中活的有机物的数目,细菌的减少率可基于起始的数目或未经处理的空白样上的细菌数目进行计算。注:该测试法用于在指定接触时间下具有50%-100%还原活性的表面。5仪器(1)灭菌器(2)培养皿(3)分光光度计(4)振荡瓶-可采用WristAction振荡瓶,但带有其他搅拌方式的振荡瓶对于常规的测试也可使用。振荡瓶必须保证充分的搅拌,不宜用旋转型振荡瓶。(5)水盆(6)漩涡混合器(7)玻璃器具:接触瓶-250ml厄伦美厄瓶,带塞,能经受住压热器的作用稀释管;吸液管(8)琼脂:孔径为8mm6试剂6.1缓冲溶液-对于需要改变体系PH值的测试样,可用PH=6.8的索楞逊磷酸盐作为缓冲液。采用其他适宜的缓冲液必须保证测试前在指定使用的浓度下不会引起细菌数目的增加或减少。0.25MKH2PO4储存缓冲液:至少每6个月制备一次新溶液如下:称取34±0.1g的KH2PO4固体于100ml烧杯中,加入500ml蒸馏水,用稀释的NaOH溶液溶液调节PH=7.2±0.1,稀释至1000ml,转移到容量瓶中,4℃保存;对于工作用缓冲液(0.3mMKH2PO4):至少每2个月制备一次新溶液如下:用无菌吸液管转移1ml±0.1ml储存缓冲液于含有800ml蒸馏水的容量瓶中,加盖,灭菌。6.2媒介:营养肉汤或其他有机体可选用的适宜媒介;蛋白胨葡萄糖膏琼脂或其他有机体可选用的适宜媒介;6.3润湿表面活性剂-测试前在指定的浓度下不会引起细菌数目的增加或减少。注:0.01%的MIQ2-5211最终稀释液或其他等价物。7测试有机体Klebsiella肺炎菌或其他由调查者决定的有机体:测试有机体的培养液应根据良好的微生物实践、纯净度检查以及基于常规基础之上来保持。测试的一致性及准确性要求测试用培养液要纯净、无污染。在制板、转移等过程中采用良好的无菌技术来避免污染。通过严格执行每一个月转移一次储存液来避免基因突变或逆转。通过定期制备条纹平板和观察具有单一种群特征的细菌群来检查培养液的纯净度。注:Klebsiella肺炎菌肉汤培养液中出现光泽表明出现逆转,此时培养液不能再用。8参数(1)必须指定所用的有氧呼吸的有机体以及接触的时间;(2)表面的制备或调湿也必须按照规定,为了在预期时间内能够显示最大的抗菌活性,测试样的预处理必须记录下来并和相同的处理控制相比较;(3)必须指定测试样的重量、大小以及结构材料;(4)所制备的样品要能使搅拌达到最大值,其可记录的比表面积可反映出测试的浓度;(5)润湿性表面活性剂必须用于高非亲水性样品。9细菌接种体的制备(1)每一系列样品所用的Klebsiella肺炎菌培养液均在无菌营养肉汤中生长18h。若指定用其他的有机体,则也应采...

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