浊度法测定硫酸小诺霉素的效价[摘要]目的:建立浊度法测定硫酸小诺霉素效价的方法。方法:采用浊度法测定硫酸小诺霉素的效价,并将浊度法与管碟法测定结果相比较。结果:浊度法与管碟法测定结果一致,浊度法测定结果可信限率较低。结论:本法简便、快捷,可用于硫酸小诺霉素的效价测定。[关键词]浊度法;硫酸小诺霉素;效价;管碟法[]R927.2[文献标识码]A[]1673-7210(2010)06(a)-057-02DeterminationofMicronomicinSulfatebyturbidimetricmethodYANChaoli(NanyangInstituteforDrugContral,Nanyang473000,China)[Abstract]Objective:ToestablishaturbidimetricmethodtodetermineMicronomicinSulfate.Methods:TheturbidimetricmethodwasusedtodetermineMicronomicinSulfate,comparedwithdiffusionmethod.Results:ThecontentsofMicronomicinSulfatewasthesamebetweent---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---urbidimetricmethodanddiffusionmethod.Theconfidencelimitoftheturbidimetricmethodwaslowercomparedwiththediffusionmethod.Conclusion:Theturbidimetricmethodissimple,rapid,andcanbeusedfordeterminingthecontentofMicronomicinSulfate.[Keywords]Turbidimetricmethod;MicronomicinSulfate;Potency;Diffusionmethod硫酸小诺霉素为广谱氨基糖苷类抗生素,耳毒性和肾毒性较低,对6-N-乙酰酯酶抗药性菌有效,有强大和快速的抗菌能力,在治疗由革兰阴性菌如铜绿假细胞菌、大肠埃希菌等引起的感染时,与内酰胺类抗生素有协同作用。目前该药物及其制剂采用管碟法作为含量测定的方法,但管碟法为传统方法,虽能直观反映其体外抗菌能力,但是管碟法进行过程中影响因素颇多,而且消耗人力大,花费时间长;浊度法既能弥补这些缺点,又具有测定结果精密度高。本研究建立浊度法测定硫酸小诺霉素效价的方法,即可直观反映药物的抗菌活性,又可在检测当天获得结果,灵敏、快速,可作为硫酸小诺霉素效价的测定方法[1]。1仪器与试药1.1仪器抑菌圈测量分析仪ZY----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---300IV型、微生物比浊法测定仪WBS-100型(北京先驱威锋技术开发公司);BP-211D分析天平(SARTORIUS公司);UV-2401型紫外分光光度计(日本岛津)。1.2试药大肠埃希菌[CMCC(B)44103];硫酸小诺霉素标准品(批号:130342-200703,效价:574U/mg);培养基Ⅲ(批号:060403,中国药品生物制品检定所);硫酸小诺霉素原料药(山西省侯马市平阳制药厂);氯化钠,磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,均为分析纯。2方法与结果2.1实验条件2.1.1大肠埃希菌悬液的制备取大肠埃希菌[CMCC(B)44103]的营养琼脂斜面培养物,接种于营养琼脂斜面上,在35～37℃培养20～22h,然后用灭菌水将菌苔洗下,并加灭菌水稀释,使其在580nm波长处的吸收度为1.0。2.1.2试验菌悬液加入量的选择取大肠埃希菌悬液,加入到培养基中,制成含菌浓度分别为1%、2%、3%、4%、5%的培养基,培养2.5h,在580nm处测定吸收度,结果含3%菌液浓度在3%时,吸收度为0.52,符合要求,故选3%的菌液浓度。2.1.3抗生素溶液配制精密称取标准品和原料药适量,加灭菌水溶解,配制成1000U/mg的溶液,精密量取此溶液适量,用灭菌磷酸盐---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---缓冲液(pH=7.0)稀释至最终浓度为10U/mg和20U/mg(剂间比为1∶2)。2.1.4抗生素溶液的分装取已灭菌的石英比色管16支,分别为ds14支、ds24支、dT14支、dT24支,分别标记,精密量取标准溶液ds1、ds2及dT1、dT2各1.0ml,按编号加入相应比色管中。2.1.5含菌培养基的分装在培养基中加入一定量试验菌(3%),用已灭菌的刻度吸管分装至比色管中,每管分装9.0ml,立即振摇,混合均匀。2.1.6培养、测量与计算使用WBS-100微生物比浊仪,恒温培养,定时振荡,在线测量,计算结果[2]。2.2线性范围考察称取标准品适量,加灭菌水制成1000U/mg的溶液,分别精密吸取此液适量,用灭菌磷酸盐缓冲液(pH=7.0)稀释成8、10、12、16、20、24、30、35、40U/mg的溶液。分别精密量取上述各溶液1.0ml,置灭菌比色皿中,每个浓度3管,分别加入含菌培养基9.0ml,立即摇匀,在浊度测定仪中培养3.5h,...