金正日花叶片组培的初步研究摘要：金正日花以观花为主，娇嫩艳丽、姿态优美，枝叶翠绿，株型丰满，被誉为“世界上最美丽的花”。通过对外植体的建立、愈伤组织诱导培养、丛生芽的继代增殖培养、试管苗生根培养、驯化移栽、小苗的后期管理等几个有效的措施便得到大批量优质的植株。关键词：金正日花；叶片组培中图分类号：S6文献标识码：A文章编号：1674-0432(2013)-20-14-1金止口花为多年生球根秋海棠的一种，是口本园艺学家KamoMototeru经多年杂交选育而成。该花因培育者十分祟敬朝鲜领导人金正日而得名。金正日花以观花为主，娇嫩艳丽、姿态优美，枝叶翠绿，株型丰满，花大如茶花，该花株高约40厘米，茎秆直立粗壮，叶片肥厚、心形，地下块茎为不规则扁球形，花朵高度重瓣，花径可达10厘米以上，花期长达120天。由于金止口花的种子非常细小，并需人工授粉才能获得，且其茎叶多汁，抒插容易腐烂，常规繁殖难度很大，而采用生物技术手段恰好能够克服这些缺点，生产出优质组培苗。1外植体的建立“金正日”花的组织培养以植株上的嫩叶作为外植体效果最好。在去外植体前10天左右，把植株放置温室内，防止往叶片上喷水。接种前选取刚长出的直径约2厘米的健壮无病的嫩叶。先用细毛刷轻轻刷去表面尘土，并于流水下冲洗干净，再放入三角瓶内加少量多菌灵，放入摇床震荡清洗15分钟后，用自来水冲洗30分钟备用。在无菌实验室超净工作台下,用无菌水冲洗一次，接着用0.1%升汞溶液消毒4〜8分钟，再用无菌水冲洗4次。然后将叶片分割成1平方厘米左右的小块，接种于培养基中，每瓶培养基接种一块叶片。2愈伤组织诱导培养外植体培养5~7天后，将无菌的外植体转接到以下4种培养基：MS+(6BA0.5mg/L+NAA'0・1mg/L)+糖30g/L+琼脂9g/LMS+(6BA0.5mg/L+2,4-Dlmg/L)+糖30g/L+琼脂9g/LMS+(6BA1mg/L+NAA'0.5mg/L)+糖30g/L+琼脂9g/LMS+(6BA1mg/L+2,4-Dlmg/L)+糖30g/L+琼脂9g/L光照保持在1200LXC勒克斯)每天光照8~12小时，温度控制在20°C〜25°Co经过21〜28天培养后，外置体首先形成愈伤组织。其屮MS+(6BA1mg/L+NAA，0.5mg/L)+糖30g/L+琼脂9g/L的培养基，有利于提高愈伤组织的分化率。3丛生芽的继代增殖培养外植体形成愈伤组织，随后分化出丛生芽和小叶。将丛生芽分割后，分成数丛转移到MS+6BA0.4mg/L+NAA'0.1mg/L+糖30g/L+琼脂9g/L、MS+6BA0.6mg/L+NAA'0.1mg/L+糖30g/L+琼脂9g/I八MS+6BA0.8mg/L+NAA'0.1mg/L+糖30g/L+琼脂9g/L、MS+6BA1.0mg/L+NAA'0.1mg/L+糖30g/L+琼脂9g/L的培养基上进行继代培养,继代培养的光照、温度同诱导阶段相同，如果光照过强，不利于从芽的伸长。以MS+6BA0.8mg/L+NAA，0.1mg/L+糖30g/L+琼脂9g/L的培养基，增殖最多,繁殖系数达7.6倍以上。4试管苗的生根培养继代培养30天左右，能诱导生根苗占60%左右，这时候可将从生芽接A：1/2MS+IAA0.3mg/L+糖20g/L+琼脂9g/L、l/2MS+IAA0・5mg/L+糖20g/L+琼脂9g/L>1/2MS+IAA0.7mg/L+糖20g/L+琼脂9g/L、1/2MS+IAA0.9mg/L+糖20g/L+琼脂9g/L的生根培养基中，其中，1/2MS+IAA0.5mg/L+糖20g/L+琼脂9g/L的培养基牛根最好，牛根率达90%以上。采取诱导牛•根和继代培养同时进行的方法。在生根过程中，光照需要加强，强度为1500LX（勒克斯）左右,每天10〜12小时。5试管苗的生根驯化移栽生根移栽问题一直是植物繁殖中的难点，我们的试管苗高度达2~3厘米，并且长出3〜4条1厘米左右的新根时，将生根试管苗放在室外光线明亮的地方，闭瓶炼苗2~3天，再逐渐开始瓶炼苗2~3天。让植株经受试管外环境的锻炼后取出试管苗，洗净基部粘附的培养基，移植于配置好的营养土中，遮阴保湿，空气温度保持在60%〜70%,当植株萌发新根后让其逐渐见光，并降低温度，直至暴露在外界。6小苗的后期管理小苗移栽后，要保持一定的温度和湿度，这点是小苗能不能成活的关键。“金正花生长适宜的温度为18°C〜25°C,超过30°C茎叶萎缩，35°C以上，植株枯死，若低于15°C就处于休眠状态。空气湿度控制在40%〜60%,湿度太低容易引起卷叶，不宜成活。湿度太高，容易腐烂。“金正日”花地上部分富含汁液，对水分要求不高，浇水时用喷壶喷泗，枝能保持湿润,营养土中又不积水。浇水时间，春季、夏季一般以早晚为好，冬季以中午为佳。参考文献[1]魏翠华，陈沁，黄駅•金正H花叶片组培的初步研究[J].福建农业科技，2004(04)・[2]宋仪农•秋根秋海棠“金正日花”组织培养再生体系的研究[D].山东农业大学：农业推广？园艺植物组织培养，2007.