bFGF表达在转染bcl-2基因治疗大鼠局灶性脑缺血中作用探究［摘要］目的探讨转染bcl-2基因治疗大鼠局灶性脑缺血的作用机制是否与bFGF蛋白的表达增加有关。方法采用线栓法制作大鼠MCAO模型，取150只Wistar大鼠，随机分成三组，分别为脑室内注射生理盐水组（生理盐水组）、脑室内注射空质粒组（空质粒组）和脑室内注射质粒pLXSN介导的bcl-2基因组（Bcl-2组）。每组50只。分别在缺血再灌注后3、6、24、48、72h观察bFGF蛋白表达的变化。结果大鼠MCAO后bFGF蛋白在生理盐水组与空质粒组之间，缺血后各个时间点的表达均无显著性差异（P>0.05）,结果显示其表达高峰在缺血后24h,而bcl-2组早期即大量表达且持续较长时间，并在同一时间段表达明显强于其他组（P<0.05）o结论pLXSN-bcl-2基因脑保护机制可能是通过促进bFGF的表达而实现的。［关键词］bFGF；bcl-2基因；脑缺血；基因治疗［］R743［文献标识码］A［］1673-9701（2009）13-34-02StudyoftheEffectoftheExpressionofbFGFinTranfectedbcl~2GeneTherapyofCerebralIschemiainRatXIAOLijunlHEZhiyi21.TheThirdPeople，sHospitalofLiaoyang,Liaoning111000；2.TheFirstAffiliatedHospitalofChinaMedicalUniversity,Shenyang110001[Abstract]ObjectiveTostudytheprotectiveeffctofbcl-2againstneuroalinjuryandthepossiblerolesofalterationintheexpressionofbFGFfollowingcerebralischemiainrat.Methodsl50wistarratswererandomlyassingnedin3groups(bcl~2treatedgroup,salinegroupandpLXSNgroup),therewere50ratsineachgroup・AndwestudiedthebFGFexpressionin3,6,24，48,72hoursafterMCAOtemporaryischemiaoftheMCAOfor2hourswasinduced・ResuItsTheexpressionofbFGFinthesalinegroupandpLXSNgroupweren?tdifferentineachtime(P>0.05)，bFGFexpressedearlyinthebcl-2groupandlastedforalongtime,whileitsexpressionwasmorethanothergroupsatthesametime・ConclusionBcl-2caneffectivlyattenuateischemicbraininjuryandincreasetheexpressionofbFGFintheischemicbrain,indicatingthattheneuroprotectiveofestrogenisassociatedwithup-regulationofbFGFincerebralischemia・[KeyWords]bFGF；bcl-2gene；Cerebralischemia；Genetreatment近年来，脑血管病已成为目前人类疾病的三大死亡原因之一，而脑梗死是脑血管病中最常见的疾病之一，故对脑梗死的研究一直是神经科的重要课题。目前认为，缺血性脑血管病实际上是一个多因素参与的复杂病理过程。缺血后神经元的死亡有两种形式，即凋亡和坏死，凋亡发生在许多细胞中，这一过程是细胞的主动性死亡，凋亡性细胞死亡是一个基因控制的过程，有RNA和蛋白质的合成［1］。在调节凋亡的基因中，bcl-2（B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）是首先被发现有抑制凋亡作用的基因。目前许多学者将这种具有抗凋亡作用的基因用基因转染技术进行实验研究［2-5］,也得出相同的结论，近年来，碱性成纤维生长因子（bFGF）与bcl-2之间的关系日益受到人们的重视［5］,这也有利于进一步研究bcl-2抗凋亡的作用机制。现将我们的研究成果报道如下。1材料与方法1.1实验动物与分组体重280〜300g的Wistar大鼠150只（由中国医科大学动物部提供），随机分为脑室内注射生理盐水组（生理盐水组）、脑室内注射空质粒组（空质粒组）和脑室内注射质粒pLXSN介导的bcl-2基因组（bcl-2组）三组，每组又随机分为缺血再灌注3、6、24、48、72h组。每小组动物10只。1.2大脑中动脉闭塞（MCAO）模型的制作采用改良的Longa栓线法。全部大鼠统一采用栓塞右侧大脑中动脉并于梗死后2h再灌注。1.3质粒pLXSN介导Bcl-2基因的制备方法参照何志义等［6］在《质粒pLXSN介导人bcl-2cDNA抑制局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡》中描述的制备方法。1.4分组实验各组动物均于缺血再灌注后存活3、6、24、48、72h处死。1.5bFGF免疫组化分析免疫组化分析采用SABC法。试剂来自武汉博士得公司。1.6统计学方法数据以均数土标准差（x±s）表示，应用SPSS11.5软件处理，采用t检验，P目前，转bcl-2基因治疗缺血性脑梗死在实验室研究阶段取得了一定进展，但其作用机制却不甚明确，有...