原核表达PRRSV结构蛋白构建活载体疫苗的研究进展

原核表达PRRSV结构蛋白构建活载体疫苗的研究进展、韦志强(四川省成都市温江区农村发展局,四川成都611130)中图分类号:S852.4文献标识码:A文章编号:1001-8964(2012)01-0035-02摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的持续性感染和潜在的免疫抑制现象已成为困扰当前世界养猪业健康发展的主要问题之一。目前国内外学者成功地克隆了PRRSV三种主要结构蛋白——GP5、ORF6、ORF7的基因序列,并采用原核表达载体成功地进行了表达,构建了活载体基因工程苗,经体外试验检测该重组蛋白具有良好的生物活性。关键词:原核表达;活栽体疫苗;猪繁殖与呼吸综合征病毒♦.ResearchonthelivevectorvaccineconstructedbyprokaryoticexpressionstructuralproteinofPRRSVWEIZhi-qiang(WenjiangRuralDevelopmentBureau,SichuanChengdu611130,China)Abstrast:Thephenomenonofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus(PRRSV)persistentinfectionandpotentialimmuneinhibitionhavebecomeoneofthemainproblemsofpersecuteingdevelopmentoftheworld'spigindustry.Currently,domesticandforeignscholarshavesuccessfullyamplifiedgenefragmentofGP5、ORF6、ORF7andbeenclonedintotheprokaryoticexpressionvector,theexternalexperimentalresultshowsthatrecombinantproteinhasspecificallyreacttoantiserumagainstPRRSV.KeyWords:Prokaryoticexpression;Livevectorvaccine;Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus1免疫预防现状目前在生产上应用的主要是商品化弱毒苗,几种商品化弱毒苗在减少PRRS疾病损失方面发挥了一定的作用,但PRRS疫苗的使用仍然存在着不少问题:收稿日期:2011-10-30作者简介:韦志强(1964-),男,四川温江人,兽医师,专科,主要从事动物防疫检疫及盲牧兽医技术推广工作。E-mail:1554808075@qq.com(1)疫苗毒能在猪体内持续性存在,能从免疫猪传给非免疫猪,从免疫猪群传到非免疫猪群,公猪免疫后可通过精液传播,母猪免疫后可经胎盘造成胎儿的先天性感染;(2)血清型不同时,保护作用不完全,且持续时间较短,对于新出现的超强毒株则完全无保护作用;(3)疫苗免疫后并不能明显减少强毒株在猪群内的传播;(4)疫苗毒能返强而致病,免疫后抗体水平低下时,有诱发ADE作用的可能,反而使病情加剧。因此,对于PRRS弱毒疫苗应采取谨慎使用的态度,研制I高效安全的疫苗乃当务之急。'2PRRSV结构蛋白及活载体疫苗开发随着新型疫苗的不断涌现,PRRS活载体疫苗也逐渐成为国内外研究的热点。活载体疫苗主要针对PRRSV的三种主要结构蛋白:GP5/E蛋白(囊膜糖蛋白)、0RF6编码膜基质蛋白(M蛋白)及0FR7编码核衣壳蛋白(N蛋白)。2.1GP5/E蛋白PRRSVE基因长603bp左右,编码GP5糖基化包膜蛋白(又称E蛋白),在所有结构蛋白中是变异程度最高的一种蛋白,但GP5是重要的抗I原保护性---本文来源于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---端诫一言工swxw工as编辑曾宪春编辑曾宪春蛋白,能诱导高滴度的中和性抗体,具有最j强的中和能力,在保护性免疫应答中发挥重要作用。iRodrigue等研究缺失跨膜区的GP5基因在大肠杆菌,中获得良好的表达,且表达产物可与PRRS阳性血清I发生阳性反应。Gonin等将PRRSV-GP5克隆到融合I有GST蛋白基因的pGEx-4T-1载体中,结果其表达产物可用于病毒血清学检测。谷红等将中国分离的BJ-4株缺失N端疏水序列的PRRSV-dGP5克隆到原核高效表达载体pGEX-4T-2中,在E.coli、BL21细胞中成功表达了重组蛋白GST-dGP5,表达!产物以包涵体形式存在,表达量为20.8%,利用融合肽进行亲和层析得到高纯度的重组蛋白。陈建君!等将中国GD株GP5克隆到原核表达载体pBAD/g|IIIC中,将该片段定向插入到转化大肠埃希氏菌I中,重组质粒用阿拉伯糖诱导表达,用Western!blotting鉴定表达蛋白,结果证明GP5基因得到表j达。目前国内外学者虽然已对E蛋白的本质及其原j核表达、免疫反应特征、在保护性免疫中的作用等}方面进行了大量的研究工作,并取得了较大的进I展,但仍有很多方面尚不十分明确。!2.2ORF6编码的非糖基化蛋白(M蛋白)ORF6基|因长525bp左右,编码M蛋白,具...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“举报”。

常见问题具体如下:

1、问:已经付过费的文档可以多次下载吗?

      答:可以。登陆您已经付过费的账号,付过费的文档可以免费进行多次下载。

2、问:已经付过费的文档不知下载到什么地方去了?

     答:电脑端-浏览器下载列表里可以找到;手机端-文件管理或下载里可以找到。

            如以上两种方式都没有找到,请提供您的交易单号或截图及接收文档的邮箱等有效信息,发送到客服邮箱,客服经核实后,会将您已经付过费的文档即时发到您邮箱。

注:微信交易号是以“420000”开头的28位数字;

       支付宝交易号是以“2024XXXX”交易日期开头的28位数字。

客服邮箱:

biganzikefu@outlook.com

所有的文档都被视为“模板”,用于写作参考,下载前须认真查看,确认无误后再购买;

文档大部份都是可以预览的,笔杆子文库无法对文档的真实性、完整性、准确性以及专业性等问题提供审核和保证,请慎重购买;

文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为依据;

如果您还有什么不清楚的或需要我们协助,可以联系客服邮箱:

biganzikefu@outlook.com

常见问题具体如下:

1、问:已经付过费的文档可以多次下载吗?

      答:可以。登陆您已经付过费的账号,付过费的文档可以免费进行多次下载。

2、问:已经付过费的文档不知下载到什么地方去了?

     答:电脑端-浏览器下载列表里可以找到;手机端-文件管理或下载里可以找到。

            如以上两种方式都没有找到,请提供您的交易单号或截图及接收文档的邮箱等有效信息,发送到客服邮箱,客服经核实后,会将您已经付过费的文档即时发到您邮箱。

注:微信交易号是以“420000”开头的28位数字;

       支付宝交易号是以“2024XXXX”交易日期开头的28位数字。

确认删除?