肝细胞凋亡在脓毒症急性肝损伤中的作用及丹参的干预影响【摘要】目的:采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)复制脓毒症模型造成急性肝损伤，探讨检测肝细胞凋亡在脓毒症肝损伤发病机制中的作用及丹参的干预影响。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组(Control)、假手术组(Sham)、模型组(CLP)及丹参干预组(Salvia)，每组30只，每组又分6h、12h、24h和48h四个时间点。动态观察血清丙氨酸转氨酶(ALT)及肝肝细胞凋亡的变化。结果:从血清ALT含量变化和肝脏细胞形态学检测确认CLP脓毒症模型造成了肝损伤。CLP组于6h肝细胞TUNEL阳性率增加，24h达到高峰，而Salvia组高峰滞后于CLP组，在48h达到高峰，并在24h低于CLP组(p<0.01)。结论:脓毒症肝细胞凋亡与肝细胞坏死共存，但凋亡的发生早于坏死，随着脓毒症的进展，过度的肝细胞凋亡衰减，而肝细胞坏死进行性增加。丹参对脓毒症肝细胞损伤保护作用可能与抑制肝细胞过度凋亡有关。【关键词】脓毒症急性肝损伤细胞凋亡丹参TheroleofhepatocellularapoptosisinsepticliverinjuryandtreatedeffectsofsalviamiltiorrhizainratsQinChangchunWuXinmin.Qinghaiprovincialpeople’shospital,Xining,ChinaABSTRACTObjectivesToinvestigatetheroleofhepatocellularapoptosisandthetreatedeffectsofsalviamiltiorrhizainsepticliverinjuryonthemodelofsepsisinratinducedbycecalligationandpuncture(CLP).MethodsThemaleratswereassignedrandomlytocontrolgroup(Control),shamoperatedgroup(Sham),cecalligationandpuncturegroup(CLP)andsalviamiltiorrhizatreatedgroup(Salvia),andtherewere30ratsineachgroup.Eachgrouppided5timepoint,andsixratswereallocatedrandomlyforeachtimepoint.Thechangesofserumalaninetransaminase(ALT)andhepatocellularapoptosiswereobservedconsecutively.ResultsSepticliverinjurywasaffirmedbythechangesofserumALTlevelsandhepaticmorphocytology.ComparingwithShamgroup,TheTUNEL-positivecellrateinCLPgroupincreasedat6hourandreacheditspeakat24hour.TheadvanceinTUNEL-positivecellrateinSalviagrouplaggedbehindCLPgroupandreachedpeakat48hour,andtherateinSalviagroupwassignificantlowerthanthatinCLPgroupat24hour(p<0.01).ConclusionsExcessivelyhepatocellularapoptosiscoexistwithnecrosisandtheformeroccursearlierthanthelatter.Whileexcessivehepatocyteapoptosisdecreases,necrosisincreaseswithdevelopmentofsepsis.ThetreatedeffectsofSalviamiltiorrhizaforhepatocellularinjuryinsepsismaybethroughpreventingexcessivehepatocyteapoptosis.Keywords:SepsisAcuteliverinjuryApoptosisSalviamiltiorrhiza【中图分类号】R459.7【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-12-005-03脓毒症(sepsis)是由细菌、真菌、病毒、及寄生虫感染引起的全身炎性反应综合症[1]。脓毒症急性肝损伤可发生在脓毒症的任何阶段，肝功能不全是脓毒症发展为多脏器功能衰竭的标志之一[2,3]。但目前对脓毒症肝脏损伤的机制的研究多为体外研究或采用内毒素注射休克型模型[4-6]。为此，本课题采用盲肠结扎穿孔(cecalligationandpuncture,CLP)复制大鼠脓毒症造成肝脏急性损伤，采用TUNEL技术检测肝细胞凋亡，动态监测发病期间动物肝细胞TUNEL阳性率的变化，探讨细胞凋亡在脓毒症肝损伤的作用机制以及丹参的干预影响。1材料与方法1.1实验动物、试剂及实验仪器雄性Wistar大鼠，体重180~240g，6~8周龄，兰州医学院提供。丹参注射液，正大青春宝药业有限公司出品，批号：0307022；TUNEL试剂盒，购自华美生物工程公司，批号：40304。7170S型全自动生化仪，日本HITACHI公司；1.2动物分组及处理因素大鼠采用随机数字表法随机分为对照组(controlgroup,Control)、假手术组(shamoperatedgroup,Sham)、模型组(cecalligationandpuncturegroup,CLP)和丹参干预组(salviamiltiorrhizatreatedgroup,Salvia)四组，每组30只，每组又分3h、6h、12h、24h和48h五个时间点，各时间点6只。Control组仅给3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，Sham组麻醉进腹后仅翻...