石榴皮中软花酸提取工艺探究［摘要］目的：考察石榴皮中较花酸的提取工艺。方法：选用4因素3水平正交表L9(34),以薄层扫描法测定软花酸含量，考察4个因素(溶剂类型，提取时间，提取次数，溶剂用量)、3个水平对软花酸提取率的影响。结果：软花酸的最佳提取工艺为用1mol/L的盐酸水溶液、8倍量、回流提取60min.提取2次；结论：溶剂类型对软花酸的提取率影响最大，本研究确定的软花酸提取工艺合理、可行。［关键词］石榴皮；软花酸；提取工艺；正交试验［］R927：文献标识码］A［］1673-7210(2008)08(c)-050-02StudyonextracttechnologyofellagicacidinthepeelsofPunicagranatumLIHai-xial,WANGCai-fangl,ZHANGHong-ling1,FANGXiao-yan2,DONGBao一guo3(1.CollegeofPharmacy,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450051,China；2・HenanCollegeofTraditionalChineseMedicine,Zhengzhou450003,China；3.TechnologyLimitedCompanyofZhengzhouFlagship,Zhengzhou450008,China)[Abstract]Objective：ToinvestigatetheextracttechnologyofellagicacidinthepeelsofPunicagranatum.Methods：Thethinlayerscanningmethodwasusedtodeterminethecontentofellagicacid・Theorthogonaldesignwiththreelevelsoffourfactors(thesolvent,theextractingtime,theextractingandtheamountofsolvent)wasadopted,usingellagicacidasindextoevaluatetheresuIts.ResuIts：Thebestextractingconditionforellagicacidwastoadd8amountsofthewatersolutionof1mol/Lhydrochloricacid,andtorefluxfor60minandextracttwice・Conclusion：Thesolventhasthemaximalinfluencetothedissolutionsofellagicacid.Theextracttechnologyofellagicacidwasfeasibleandreasonable・[Keywords]PeelsofPunicagranatuni.；Ellagicacid；Extracttechnology；Orthogonaltest石榴皮为石榴科植物石榴(Punicagranatum.L)的干燥果皮，在传统中药及临床上较为常用。《中华人民共和国药典》2005年版一部用没食子酸法对石榴皮中的总软质进行了含量测定，而软花酸(ellagicacid,EA)为石榴皮中的有效成分之一，具有抗癌、抗菌、抗病毒、抗氧化等作用[1]。石榴皮中富含生软花酸，并且在酸性条件下水解可产生更多的软花酸，本文利用正交试验优选石榴皮中软花酸的提取工艺，为今后科学利用和开发石榴皮奠定基础。1仪器与试剂1.1仪器JT2002型电子天平(上海精天公司)，CAMAG-II型薄层扫描仪，RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)，SHZ-D循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂)。1.2试剂与材料石榴皮药材(购自河南郑州，由河南中医学院刘若庸教授鉴定)，软花酸对照品为自制(经1HNMR、13CNMR光谱鉴定)，丙酮、乙醇、盐酸等其他所用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1正交实验设计软质极性较强，故在正交实验中选用极性较大的溶剂(A)：70%丙酮、lmol/LHCl水溶液、95%乙醇，并考察提取时间(B),提取次数(C),溶剂用量(D)对软花酸提取率的影响，见表lo2.2软花酸含量测定2.2.1软花酸线性关系考察取软花酸对照品溶于10%二甲基亚枫(DMS0)乙醇中，制成3.20mg/ml的溶液，分别取1、2、4、6、8卩1点于同一薄层板上，展开，取出，晾干，以软花酸含量为横坐标(X),积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，结果表明软花酸在3.20^25.60Pg之间，吸光度值与其浓度呈良好线性关系，回归方程：Y=0.08869X+0.00972,—0.9999o2.2.2供试品溶液的制备平行取9份过40目筛的石榴皮粉末约0.5g,精密称定，按照正交设计表中内容，加入不同溶剂，回流提取不同时间，滤过，残渣用提取溶剂20ml洗涤，合并滤液和洗涤液，减压浓缩至干，残渣用10%DMS0乙醇溶液溶解，定容于100ml量瓶中，经0.45Pm滤膜滤过，取续滤液，即得。2.2.3薄层层析条件及扫描条件照薄层色谱法(《中国药典2005年版一部附录VIB》试验)。吸取供试品溶液4ul,对照品溶液适量，分别点于同一以竣甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水(9:2:2)为展开剂，二次展开，每次10cm,晾干，紫外光灯下显色，采用单波长线性扫描，狭缝0.3mmX4mm,选择软花酸最大吸收波长255nm为入［2］。2.2.4精密度考察取同一供试品溶液，按“2.2.3”项下...