HPLC法测定黄芩苷分散片的含量及有关物质DeterminationofBaicalinanditsRelatedsubstancesinDispersibletabletsbyHPLC杨清YANGQing湖南省药品审评认证与不良反应监测中心（中国410013）CenterforDrugEvaluationandAuthentication,ADRmonitoringofhunan(China410013)中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：1818－0086（2008）03摘要：目的采用高效液相色谱法测定黄芩苷分散片含量及有关物质。方法C18（Polaris4.6×150mm，5μ）色谱柱，以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长280nm；流速1.0ml／min；柱温30℃；进样量10μl。结果分散片中辅料对主药测定无干扰，黄芩苷与有关物质完全分离。在12.68～114.12μg/ml范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9999，n=5)。平均回收率为99.3%（RSD=0.33%,n=6）。结论本方法简便，迅速，准确，专属性强。关键词：黄芩苷；分散片；高效液相色谱法；含量测定；有关物质Abstract：ObjectiveToestablishanHPLC-UVmethodfordeterminationofBaicalinanditsrelatedsubstancesindispersibletablets.MethodsC18（Polaris4.6×150mm，5μ）columnwasused.Themobilephasewasconsistedofmethanol-water-phosphoricacid(47530.2).Theflowratewas1.0ml∶∶／minwithThedetectionwavelengthwasat280nm.Thecolumntemperaturewas30℃.Theinjectionvolumewas10μl.ResultsThelinearrangeforthecontentofBaicalinwas0.1268～1.1412μg,thecorretationcoeffientwas1.0(n=5);Theaveragerecoverywas99.3%，anditsRSDwas0.66%(n=6).ConclusionThemethodissimple，sensitive，accurateandspecific.Keywords:Baicalin；DispersibleTablets；HPLC；Determination；RelatedSubstances黄芩苷分散片系黄芩苷与适宜辅料制成的分散片，用于急、慢性肝炎、迁延性肝炎的辅助治疗。原剂型为普通片剂，崩解慢，药物溶出速度慢，不能满足患者希望药物迅速起效的需求。而分散片是近年来研究应用较多的一种速释固体剂型，其兼有片剂和液体制剂的优点，并克服两者的不足。原剂型收载于《国家药品监督管理局国家药品标准》化学药品地标升国标第十二册，原质量标准规定了黄芩苷的含量测定及两个化学反应鉴别。在原标准的基础上，采用高效液相色谱法测定黄芩苷分散片的含量及其有关物质，方法专属性强，灵敏度高，重复性好。1仪器与试药HP1100高效液相色谱仪（Agilent），TL9900数据处理软件。甲醇为色谱纯试剂，水为重蒸馏水；黄芩苷对照品（由中国药品生物制品检定所提供，批号为715-200211）；黄芩苷分散片（研制单位自制）。2实验方法2.1色谱条件色谱柱：C18（Polaris4.6×150mm，5μ）；流动相：甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）；流速1.0ml/min；检测波长280nm；柱温30℃；进样量10μl。2.2系统适用性实验取处方量辅料适量和黄芩苷分散片，按“2.9”项下操作，记录色谱图。另取经60℃减压干燥6小时的黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。取黄芩苷适量，分别进行酸、碱、高温（热）、光照破坏处理后，各进样10μl，色谱图见图1。实验结果表明，在“2.1”项的色谱条件下，辅料对测定无干扰，黄芩苷经酸、碱、高温、光照破坏后，均有明显的分解产物峰，但分解产物均与主峰有良好的分离度，不影响测定。色谱柱理论塔板数按黄芩苷计算不得少于3000。图1黄芩苷HPLC图A-空白辅料溶液；B-对照品溶液；C-片剂溶液；D-碱破坏；E-酸破坏；F-高热破坏；G-光照破坏；1-黄芩苷2.3线性实验取黄芩苷对照品12.68mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为贮备液（126.8μg/ml）。精密量取贮备液1、3、5、7、9ml，分别置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，各取10μl进样，记录色谱图，以浓度（C，μg）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，得回归方程：A=41841876C+219813，r=1.0，可见在黄芩苷0.1268～1.1412μg范围内线性良好。2.4精密度实验配制浓度约为60μg/ml的黄芩苷对照品溶液，进样10μl，连续进样5次，记录峰面积，RSD为0.23%。2.5重现性实验取040316批样品，按“2.9”项下操作平行测定5次，计算...