男性个体AmeIogenin|=|基因座Y片段缺失1例【关键词】Amelogenin基因；性别鉴定；法医学【中文图书号】19919.2；DF795.2【文献标识码】B【文章编号】1007—9297(XX)03-0235-03在法医学实践中.扩增AmeIogenin基因是进行生物样本的性别鉴定的主要方法，并为大多数的商品化法医鉴定试剂盒如AmpF1STRIdentifierTM(ABI)vPowerPIex(Promega)等所采用。但个体的AmeIogenin基因如果发生突变，致X或Y特异片段扩增失败，则可能导致错误的性别判定。现将作者工作中所见1例男性个体AmeIogenin基因座Y片段缺失及其分析报道如下。材料与方法唐某，男性，24岁，被人用刀砍伤头部及双上肢等部位。Chelex-100法提取唐某血样、凶器菜刀上血痕.采用AmpFLSTRIdentifierTM荧光标记复合扩增试剂盒，进行I6个基因座复合扩增，用ABI3100自动遗传分析仪对扩增产物进行检测。唐某血样的基因分型与菜刀刀柄及刀刃上上检出人血的基因分型一致，但AmeIogenin基因座均只检出X片断，各基因座结果见表1和图1o用AmpFISTRYfilerTM(ABI)荧光标记复合扩增试剂盒，进行DYS456等16个Y染色体基因座复合扩增.除DYS458未检出，其余基因座唐某的基因分型与菜刀上检出人血的基因分型一致，结果见表2和图2。唐某体检结果:身高168CITI,身体结实粗壮，嗓音粗，喉结突出.胡须明显，乳房正常，睾丸及外生殖器外形正常。二、样本当事人血样；已知正常男性、女性血样各30例。表1AmpFLSTRIdentifierTM荧光标记复合扩增试剂盒分型结果诗咕r墅墨鹭観舅簸蟹堡L------喜一毒----------；｝丄器——嚣一0崔L-00----畚啮----------------------j图1AmpFLSTRIdentifierTM荧光标记复合扩增试剂盒分型三、引物设计根据NCBI数据库提供的Y染色体上amelo.genin序列（accession：AC_000067.1GI：89161219）,［作者简介］曾于宝（1972〜），男，汉族，云南XX人，医学学士，主检法医师，主要从事法医物证检验及研究工作［通讯作者］聂胜洁（1975一），女，汉族，云南昆明人,在读博士，讲师，主要从事人类遗传学、法医物证教学'检验鉴定及研究工01冀一篱0妻奠0・000作；reI:+86—0871—5338831；E—maiI:nsjgtC~ahoo.13ore・q：n［基金项目］云南省科技厅自然科学青年基金（编号：XXC0020Q）・236・表2AmpFISTRYfilerTM荧光标记复合扩增试剂盒分型结果W；IU----------U一％强豫韬」郦强鲫强■魏臻輾酝褥％豫齬镑臻壤磁强秘％狮撬强挑豫瓣强赫％稳辣瓣瓣摊％%秘钮*1%目％18・*%*瓣！％%勰"焦％%。*磁鎔II强％%O-J--{JI>000o_o・l《之0|EII一・譬—-鬻！髦琶才薯门。嘎…〜—...・嗪—〜......—〜、------------------------…IIt---------------••••••••••••••••••••••••••••••■■■图2AmpFISTRYfiIerTM荧光标记复合扩增试剂盒分型图谱行设计引物，特异扩增Y染色体上amelogenin片段。扩增3453—3695片段(产物长度263bp)的引物序列为：P1(forward):5TGAGAAATCCC1TrAGATACTTACAGP2reverse):5TAAAGTTGGAGACCTGGAAGC3o扩增6068—6300片段(产物长度251bp)的引物序列为：P1(forward):5GGTCCAACAACTCAGGGTCT3,P2(reverse):1-1°CCCITrATTGC唧GCC3,。四\检测法律与医学杂志XX年第14卷(第3期)对当事人，已知正常男性，女性样本进行PCR扩增。反应体系20ixl：121x1ddH20v31x1DNA模板、1ixl正反向引物混合物(20pmoI/ix1)v21xldNTPf200~M)、21x1lOx反应缓冲液。PCR扩增:97oC5min预变性，94%1min,58%1min,72^1min,28个循环，72°C7min,4°C保存。扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳。银染显色。结果Y染色体上的两个amelogenin片段在正常男性及涉案人均检测到特异性条带，正常女性均未检测到特异性条带(图3,图4)。图3正常男性、女性，涉案人amelogenin3453一3695片段扩增产物电泳图谱注：仁3D591K13为正常男性；2、4、6、10、12、14为正常女性；7、15为当事人；8、16为marker图4正常男性、女性，涉案人ameIogenin6068—6300片段扩增产物电泳图谱注：仁3口59门、13为正常男性：2、4、6、10、12、14为正常女性；7、15为当事人：8、*16为marker讨论牙釉质蛋白基因(AmeIogenin)为X、Y染色体同源基因，扩增AmeIogenin基因，可同时检验X和Y染色体，...