表达水稻矮缩病毒外壳蛋白p8基因的转基因水稻具有对该病毒中的抗性.

表达水稻矮缩病毒外壳蛋白P8基因的转基因水稻具有对该病毒中度的抗性摘要:对表达水稻矮缩病毒外壳蛋白P8基因的转基因水稻进行了遗传研究,结果表明S8基因在转基因株系T0-2的T1及T2代中稳定遗传并表达。病毒抗性试验结果表明,T1及T2代转基因水稻对病毒表现出中度的抗性,这说明病毒抗性性状可以稳定遗传。这是关于水稻矮缩病毒的病原引起抗性的首次报道。关键词:水稻;水稻矮缩病毒;外壳蛋白基因;病毒抗性提取之前我们已经获得的转基因水稻植株水稻(OryzasativaL.)含S8因编码的水稻矮缩病毒(RDV)的外鞘蛋白通过粒子轰击。在这项研究中,证实了在S8基因已稳定遗传和表达的自交T1和初级T2后代获转基因水稻植株行T0-2。抗病毒实验表明,T1和T2转基因植株表现出抗RDV感染,说明传动平稳的电阻的特性。这项研究是关于病原体衍生的第一次报告抗水稻矮缩病毒,phytoreovirus的一员。介绍水稻矮缩病毒(RDV),这是病原体引起水稻矮缩病,确实埃韦勒损坏水稻生产在东南亚的区域。它是一个构件家庭属phytoreovirus的呼肠孤病毒和由两个叶蝉发送pecies,黑尾叶蝉和Recilladorssalis(Boccardo和米尔恩,1984)。RDV基因组由12个双链RNA片段(S1到S12)的。S1,S2,S3,S7和S8的编码结构蛋白,而S4,S6,S9,S10,S11和S12编码非结构蛋白(Xu等,1998;Zhang等,1997)。近日,Pns6被鉴定为一种病毒移动蛋白和Pns10作为RNA沉默抑制RDV的(Li等人,2004年,曹等人,2005)。P2蛋白被确定为互动,体内与在赤霉素的酶(GA)的生物合成途径以及这一相互作用导致GA减退积累和对矮化表型表现出byRDV感染的水稻植物(Zhu等,2005)。第八大段(S8)编码外层外壳蛋白(铃木和菅原,1991)。外壳蛋白介导的抗性(CPMR),一种策略是指病毒电阻通过在转基因植物病毒外壳蛋白的表达介导的,是一个于病原体的抵抗力(;威尔逊,1993Lomonnossoff,1995)的例子。由于CP的转基因烟草具有显著抵抗的第一次报告烟草花叶病毒的感染(鲍威尔-Abel等,1986),CPMR已被广泛地应用于一个广阔植物品种和一些病毒成员表现出不同程度的成功的。大部分CPMR的例子都涉及病毒的单链RNA的基因组和双子叶植物物种(格鲁梅特,1995)。在水稻中,最重要的一个的情况下谷类植物为主要食物,为人类特别是对人的发展中国家,病毒外壳蛋白基因的抗病毒转基因植物制作了防治水稻条纹叶枯病,tenuivirus的成员(Hayakwa等,1992)。RDV外层外壳蛋白的转化被提及的报告Matsumura等。没有进一步的分析(松村和田林,1995)。最近Sivamani等。(1999)报道CP-介导的保护对水稻东格鲁球状病毒(RTSV)在转基因水稻植株。之前我们已经报道水稻与S8的基因编码的大米的外壳蛋白转化矮缩病毒通过粒子轰击(Zheng等,1997)。在这里,我们提出在S8中的转基因和抗RDV在T1的特性数据和T2代。材料和方法植物材料。转基因水稻植株行T0-2表达RDVS8的基因通过粒子轰击(Zheng等,1997),并获得自交得到的种子。T1和T2代的苗在随后的研究中使用。PCR分析和Southern杂交。总DNA进行从叶中提取转化的和未转化的水稻植物的根据默里组织和汤普森(1980)。对于分离分析,聚合酶链反应是以阐明S8序列中的T1和T2子代的存在原代转基因水稻品系T0-2。用于PCR的引物和条件人所描述的郑等人一样。(1997)。对于南方的分析,基因组DNA用XhoI消化并用探针含有1.4kb的片段S8编码区所描述的郑等人。(1997)。在T1和T1的后代RDV外层外壳蛋白的Westernblot分析。总蛋白质被同时从转基因植物和非转化的植物中提取和使用兔多克隆引发抗血清进行Western印迹RDV,所描述的郑等人。(1997)。病毒耐药检测。已被允许访问72小时叶蝉到RDV感染的植物被用于接种。10〜12天龄的稻苗接种单株3带毒成虫,并保持在腾笼换24小时的访问期间。叶蝉,然后取出,将植物转移到防虫笼和维护温室。外观症状是经过12-28天拿下。结果在S8基因T1和T1后代的分离分在我们以前的研究中,转基因水稻植株T0-2表达RDV外层被毛蛋白质获得与自交T1后代显示出1:1的分离比在S8转基因(Zheng等,1997)。那么它的T1工厂,T1-1,一名被选为产生T2后代,并进行了进一步的分析。从T1-1T2幼苗总D...

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