Abstract:Aimofthisstudy:Inthisstudy,HNMR-basedmetabonomicsapproachhasbeenused厚朴与枳实配伍的代谢组学研究#陈刚，徐文峰，王海峰，裴月湖**（沈阳药科大学中药学院，沈阳110016）510152025303540摘要：目的：本实验利用1HNMR为基础的代谢组学研究厚朴以及厚朴配伍枳实的肝肾毒性。方法：18只大鼠随机分成三组：空白组、厚朴组和厚朴枳实组。以1HNMR为基础的代谢组学分析空白组、厚朴组和厚朴枳实组尿液和血清样品代谢轮廓。结果厚朴组和空白组样品代谢轮廓具有明显差别，厚朴枳实组的代谢轮廓同空白组样品相似，肝、肾组织病理学检查同时证实了数据分析。关键词：代谢组学；厚朴；毒性中图分类号：R246.6MetabolomicstudiesofOfficinalisMagnoliaeCortexandFructusAurantiiImmaturuscombinationChenGang,XuWenfeng,WangHaifeng,PeiYuehu(SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,ShenYang110016)1toinvestigatethetoxicityofHoupuandHoupucombinedwithFructusAurantiiImmaturus(Zhishi).Materialsandmethods:MaleWistarratsweredividedintothreegroups:control,groupofHoupugroupofHoupucombinedwithZhishi.Basedon1HNMRspectraofurineandserumfromrats,PLS-DAwereperformedtoidentifydifferentmetabolicprofiles.Liverandkidneyhistopathologyexaminationswasalsoperformed.Results:PLS-DAscoresplotsdemonstratedthatthemetabolicprofiletreatedwithHoupuwasdifferentfromthatofcontrolrats.ThemetabolicprofileofgrouptreatedwithHoupucombinedwithZhishiwassimilarwiththatofcontrolrats.Statisticsresultswereconfirmedbythehistopathologicalexamination.Keywords:metabonomics;MagnoliaofficinalisRehd.etWils.;toxicity0引言马兜铃酸（Aristolochicacid,AA）是马兜铃科植物的活性成分，含马兜铃酸的中草药和中成药具有独特的药用价值，自1993年比利时学者Vanherweghem等报道因长期服用含广防己的减肥药导致严重肾功能损害以来，包括广防己在内的许多含有马兜铃酸成分的中草药被认为是导致肾脏损害的主要原因[1]。药物安全性研究的传统方法局限在某些生化指标的检测和病理切片的观察，缺乏整体性和系统性。近年来，国内外开始利用代谢组学[2]技术进行早期的药物毒性研究。主要利用核磁共振(nuclearmagneticresonance,NMR)技术测定生物体体液（如尿液、血浆、组织提取液等）中的内源性代谢产物含量，考察生物体系受到刺激或扰动后其代谢产物的变化，研究生物体系代谢途径，经过多元统计分析[3]确定内源性小分子代谢物成分的变化模式，对代谢产物谱进行动态追踪，从而反映出中毒或代谢损害而引起的细胞功能异常及其随时间的变化过程。由此揭示的这种变化和传统毒理学终点相一致[4]。目前，运用代谢组学方法研究马兜铃酸肾毒性已有报道，本实验采用基于NMR的代谢组学方法，分析口服厚朴以及厚朴枳实后大鼠尿液中内源性代谢产物的变化，并结合相应组织病基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20112134120006）作者简介：陈刚，（1980-），男，讲师，主要从事中药药效成分及天然药物的研究。通信联系人：裴月湖，（1954-），男，教授，主要从事海洋天然产物及中药药效物质基础研究。peiyueh@vip.163.com-1-理学检查，观察厚朴、厚朴枳实肝、肾损伤作用的功能改变特点和病理学特点，并从代谢组学角度探讨厚朴肝、肾毒性作用机制。1实验部分451.1材料与试剂叠氮化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、乙醚等均为沈阳禹王试剂公司。肝素钠由沈阳药科大学试剂库提供。TSP（2，2，3，3-三甲基甲硅烷基丙酸）、重水购于美国Norell公司。厚朴、枳实购自河北安国昌达中药饮片有限公司。501.2实验动物Wistar大鼠，SPF级，全部为雄性，由沈阳药科大学实验动物中心提供，体重200±50g，动物许可证号：(SCXK京2009-0004)。动物常规喂养，自由饮水；饲养室光照12h，黑暗12h，室温17-25℃，相对湿度控制在45-60%。1.3试验方法将雄性Wistar大鼠按体重随机分为三组（空白组、厚朴组和厚朴枳实组），每组6只。5560放于大鼠代谢笼中侍养。采用代谢笼法，从...