异叶青兰挥发油及四种提取物对两种呼吸道病毒的体外抑制作用#文娟1，杨平荣2，李萍2，金赟1，丁家栋1，方媛1，张春江1**（1.兰州大学生命科学学院，兰州730000；2.甘肃省医疗器械检验所，兰州730000）摘要：目的：探讨藏药异叶青兰四种提取物抗腺病毒（ADV）、流感甲型病毒A/汉防/359/95(H3N2)两种呼吸道病毒的作用。方法：采用细胞病变法（CPE）测定挥发油对细胞的半数毒性浓度（TC50），及其对病毒的半数效应浓度（EC50），以治疗系数（TI）为指标评价药效。结果：五种样品对ADV的治疗指数为2.16～7.77，其中异叶青兰挥发油抗ADV活性最高。五种样品对A/汉防/359/95(H3N2)的治疗指数为3.00～12.97，异叶青兰石油醚提取物抗A/汉防/359/95活性最高。结论:异叶青兰挥发油及四种提取物都具有一定抗ADV活性。关键词：藏药；异叶青兰；腺病毒；流感甲型病毒A/汉防/359/95(H3N2)；抗病毒活性中图分类号：Q93-31TheAnti-respirovirusesEffortofEsstentialOilandExtractsfromTibetanHerbalMedicineDracocephalumHeterophyllumBenthWENJuan1,YANGPingrong2,LIPing2,JINYun1,DINGJiadong1,FANGYuan1,ZHANGChunjiang1(1.SchoolofLifeSciences,LanzhouUniversity,Lanzhou730000;2.GansuInstitueofMedicalDeviceTesting,Lanzhou730000)Abstract:OBJECTIVEToevaluatetheantiviraleffectandmechanismsofesstentialoiandfourextractssfromTibetanherbalmedicineDracocephalumheterophyllumBenth.METHODSThecytotoxicityandtheantiviraleffectiveratewasinvestigatedusingcytopathiceffect(CPE).Thetreatmentindex(TI)wasusedtoestimatetheindexofantiviralactivity.RESULTSThetherapeuticindexoffivesamplestoADVis2.16to7.77.Theesstentialoilhasthehighestvalue.ThetherapeuticindexoffivesamplestoA/Hanfang/359/95is3.00~12.97,Thepetroleumetherextracthasthehighestvalue.CONCLUSIONTheesstentialoiandfourextractssfromDracocephalumheterophyllumBenthmaysomeprotectionagainstADVandA/Hanfang/359/95invitro.Keywords:Tibetanmedicine;DracocephalumheterophyllumBenth;adenovirus;A/hanfang/359/95(H3N2);Antiviralactivity0引言异叶青兰（DracocephalumheterophyllumBenth）为唇形科青兰属多年生草本植物，又名白花枝子花，药用名有白甜蜜蜜、白花夏枯草、吉孜青保等。异叶青兰分布于青海、甘肃、新疆、西藏及四川等地，生于山地草原及半荒漠的多石干燥地区，药源丰富。其化学成分主要包括挥发油类、黄酮及黄酮苷类、植物甾醇及三萜类、有机酸及其酯类等[1]。目前，异叶青兰主要用于治疗口腔溃疡、热性病头痛、眼翳、黄疸性发热、肝热、支气管炎、高血压，提示其可能具有抗呼吸道病毒活性[2]。基金项目：教育部高等学校博士点基金（20100211120002）；兰州市科技计划项目（2010-1-216）；甘肃省科技支撑计划（1204PKCA131）作者简介：文娟，（1990-），女，硕士研究生，主要研究方向：微生物学。通信联系人：张春江，（1972-），女，副教授，硕士生导师，主要研究方向：抗病毒药理学。E-mail:chjzh@lzu.edu.cn-1-流感病毒造成的感染在全世界范围内爆发流行，给人类的生命和健康全造成了严重危害，使得预防和治疗流感成为当前抗病毒研究的重要任务[3]。腺病毒(adenovirus)是呼吸道的常见病原体,在自然界中分布较广。同时，腺病毒也是引起呼吸道和眼部疾患的主要因素,同时可引起人体扁桃体、腺样体和其它淋巴组织的隐性持续性感染[4]。因此，本研究中选择流感病毒和腺病毒呼吸道病毒作为研究对象，对异叶青兰挥发油、异叶青兰水提物、异叶青兰正丁醇提取物、异叶青兰石油醚提取物及异叶青兰乙酸乙酯等分级提取物，体外抗呼吸道病毒药效学作用进行评价，筛选出抗呼吸道病毒活性强的提取物。1材料1.1病毒与细胞腺病毒(adenovirus,ADV3)，流感甲型病毒A/汉防/359/95(H3N2)，MDCK（狗肾细胞），Hep-2（人喉癌）细胞均由甘肃省疾病控制中心提供。Dulbecco’sModifiedEagleMedium(DMEM)1L，GIBCO试剂公司；10×PBS缓冲液（PH7.2-7.4），SOLARBIO公司；胎牛血清，HyClone公司；HEPES，Amresco公司...