深圳湾红树林根际富油酵母的筛选与鉴定摘要：从深圳湾红树林根际土壤和海水样品中筛选到一株富油酵母，对其基本形态、油脂积累情况和生物学地位进行研究，旨在为开发其应用潜力提供理论指导。利用松花粉垂钓法筛选得到富油酵母，用显微镜观察其基本形态，采用尼罗红染色法观察油脂积累情况，扩增18SrRNA序列对该富油酵母进行分子鉴定，并用GC-MS分析菌株的油脂含量和组成情况。结果显示，筛选得到一株富油酵母菌，在低氮培养基中72h油脂积累即达到平台期。18SrRNA序列鉴定其属于Cyberlindnerasaturnussp.o脂肪酸含量？到细胞干质量的55%,主要成分为C15:0、C16:0和C17:0的饱和脂肪酸，含量达到总脂肪酸的90%以上。该酵母菌适合用于生物柴油的生产。本文采集自网络，本站发布的论文均是优质论文，供学习和研究使用，文中立场与本网站无关，版权和著作权归原作者所右，如存不愿意被转载的情况，请通知我们删除己转载的信息，如果需要分享，请保留本段说明。关键词：红树林；富油酵母；筛选；18SrRNA；GC-MS中图分类号：TE667文献标识码：AD0I编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2017.07.002ScreeningandIdentificationofOil-richYeastfromMangroveRhizosphereofShenzhenBayANNa,YANGYuan,SHENLanlin,ZHUZhuo,GUOXinjie,XUEZhiquan(CollegeofLifeScience,ShanxiAgriculturalUniversity,Jinzhong,Shanxi080301,China)Abstract：Anoil-richyeaststrainwasscreenedfrommangroverhizospheresoilandseawatersamplesofShenzhenbay,anditsmorphology,oilaccumulationandtaxonomywerestudied.Thepinepollenfishingmethodwasusedforscreeninganditsmorphologywasobservedbymicroscope,Nileredstainingwasusedtoobservetheoilcontent,themolecularidentificationoftheoilrichyeastwasconductedbyenhancing18SrRNAgenesequence,andGC-MSwasusedtoanalyzetheoilcontentandcomposition.Theresultshowedthatthestrainsoftheyeastidentifiedby18SrRNAgenebelongedtoCyber1indnerasaturnussp.，andthestrainshadthegenusofrichoil.Itisconcludedthattheyeastissuitabletoproducingbiologicaldieseloil.Keywords：mangrove；oil-richyeast；screening；18SrRNA；GC-MS近年来，随着石油能源枯竭、全球资源短缺及环境污染等问题的日益严秉，生物柴油因其原料的可再生性、易生物降解、清洁无污染等特性，被认为是传统石油的最佳代替品之一，己成为国际研宄热点[1-3]。深圳红树林位于陆地和海洋环境的动态交界面，为热带亚热带海洋潮间带独特的生态系统。因周期性的海水侵袭、河口有机质的沉积和落叶的腐败作用使其中富含有机质和腐殖质，并形成了特殊的生态环境，其中生活着众多生物，也蕴含了极其丰富的微生物资源［4］。对盐胁迫和富营养化环境的长期适应，使得红树林微生物在形成特殊群落的同时，也可产生大量活性代谢产物。红树林土壤中的微生物不但在环境修复和城市污水处理中扮演着重要的角色［5-6］，同时也是多种重要工业和医药产业中间产物的生产者［7］。其中的多种微生物能够合成和积累大量的多不饱和脂肪酸和中长链饱和脂肪酸，在食品、保健品和生物新能源等行业中具有巨大的潜在应用价值［8-10］。本研宄从深圳红树林根际土壤和海水样品中筛选到一株富油酵母株，研宄了其基本形态、油脂积累情况，并用ISSrRNA基因序列对其进行鉴定，可为菌种工业化高产脂肪酸提供理论指导。1材料和方法1.1培养基筛选培养基：葡萄糖30g?L-l，胰蛋白胨10g?L-l，酵母提取物5g?L-1,海水晶15g?L-l，蒸馏水配制。固体培养基加20g?L-l的琼脂。低氮培养基：葡萄糖30g?L-l，胰蛋白胨1.5g?L-l，酵母提取物1g?L-l,海水晶1.5g?L-l,KH2P040.25g?L-1,蒸馏水配制。1.2方法1.2.1样品采集与分离从深圳湾红树林保护区采集红树林根际土壤和海水样品，放入灭菌的密封离心管中带回实验室，立即进行菌株分离。分离采用松花粉垂钓法：在无菌平板中加入2mL海水样品和10mL海水培养基，并加入少量松花粉（95°C烘箱处理1h）作为诱饵，在室温条件下培养1周。分别在接种土壤和海水的培养基中挑选菌种转接到新鲜的海水（含存松花粉、0.075%链霉...