结核病血清学诊断研究进展沈国妙高谦结核病是出结核分枝杆菌感染引起的传染性疾病，在历史上曾经夺去过数以万计的生命。伴随着减毒牛分枝杆菌疫苗的诞生，以及一系列抗生素和抗结核药物的发现与应用，科学家曾乐观地认为结核病会被人类消灭。然而，2008年全球仍有940万例新增结核患者，全世界每年有170万人死于结核病，具中90%以上的患者分布在发展中国家。同时，结核病也是引起HIV感染患者死亡的重耍原因之一，佔计2008年全世界200万HIV阳性死亡患者中，有50万患者同时患有结核病•弓I。现代科学技术的发展，为诊断结核病提供了多种方法。例如，利用快速培养设备和改造培养基可以进行结核分枝杆菌的直接检测，利用x线技术可以观察患者帅部阴影來判断是否有结核病的病灶，利用聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）及探针杂交技术可以检测结核分枝杆菌特定的DNA片段等。血清学诊断是一种通过对血清成分的分析达到对疾病诊断的方法，一般是指对其中的抗体成分进行分析。该方法已经成功应用于多种传染病（例如艾滋病、肝炎、炭疽病以及布鲁斯病等）的检测［3］。血清学诊断技术有着具固有的优势，该技术无需活细胞培养和特殊的仪器设备，操作简便，结果显示快速，是一种对疾病进行早期诊断的理想方法。对于结核病的血清学诊断技术的研发，到现在已经有100多年的历史，但至今述没有一种血清学诊断方法可以替代结核病痰涂片镜检mJo本文综述了结核病血清学诊断技术研究的进展和存在的问题。一、结核病血清学诊断中使用的抗原D0I：10.3760/cma・j・issn.1009—9158,2011.02.002作者单位：10016美国纽约大学医学院（沈国妙）；复旦大学上海医学院（高谦）通信作者：高谦，电了信箱：qga099@yahoo.tom本文直接使用的缩略语：HIV（humanimmunodeficiencyvin1s）,人类免疫缺陷病毒；WHOCworldHealthOrganization）,世界卫生组织；BCG(Baci1lusCalmette.Guerin),卡介苗・综述.在结核病血清学诊断中，最重要的是寻找和使用敏感度和特界度较高的抗原。早期结核病血清学研究常常根据结核分枝杆菌培养上清中抗原丰度来对抗原进行选择，如常用的相对分子质量30000和38000蛋白，以及A985复合物【M】。随着分子克隆以及蛋白体外表达技术的应用，体外重组表达蛋白如和对分子质量为19000、38000、65000和81000的蛋白等也经常被使用II'10o12jo其中相对分子质量3800暗牡鞍资茄芯拷隙嗟牡鞍字弧SJJW?白相比较，它显示了较好的特界度与皱感度，是多个商品化试剂盒的组成抗原。Abebe和Co1e等一，1列在〜项对我国活动性肺结核患者评估研究中，发现该蛋白在涂阳患者和涂阴患者中检测的敏感度在80%左右。多种分枝杆菌属细菌全基因测序的完成，为发现特定的具有血清学诊断潜力的抗原提供了科学依据。来口不同地区作为疫苗的牛分枝杆菌中，有毒力的菌株在传代过程中发生大片段的基因丢失-4O,这些缺失区域(RD)的蛋白理论上能够区分作为疫苗的牛分枝杆菌与结核分枝杆菌问的差异，具有很好的血清学诊断潜力。然而，Brusasca等…对位于RD1编码的6个蛋白检测后发现它们在应用中的敏感度较低(大约25%)。最近，研究人员对来自其他RD区的47个基因克隆表达后，评估每个蛋白的血清学诊断价值，其中发现一个位于RD4区编码的蛋白Rv0222具有较高的血清学诊断价值•弓|。结核分枝杆菌全基因测序的分析表明，10%的基因组编码PE和PPE家族蛋白，属于结核分枝杆菌特异性蛋白【16\根据比较基因组学信息，研究者选取了位于RD11区的PPE蛋白(Rv3245)进行血清学研究，发现该蛋门对涂阳结核病患者的检测皱感度可达到70%【17］。结果提示，比较基因组学尽管能够提供不同菌株基因水平上的差异，但差异基因所表达蛋门的免疫原性以及其在血清诊断学上的价值，还有待通过实验进一步验证。目前各种高通量筛选技术为选择合适的血清学诊断标记物提供了很好的工具。利用高通量蛋门组万方数据生堡捡验医堂盘盔2Q!!生！口筮！堡螯筮2垦！也』£生丛型：陛型！盟梨！！：！吐丝：盟！：2学技术，对北京基因型K菌株培养上清进行分析，通过与实验菌株II,,Rv和CDC1551比较后，发现了几个斧异表达并具有免疫原性的蛋白••引，其中一个蛋口(Rv3874)...