RECK>MMP—14及VEGF在喉癌中的表达及临床意义［摘要］目的探讨RECK、MMP-14及VEGF在喉癌中的表达情况及临床意义。方法选择2013年8月〜2015年1月辽宁省肿瘤医院选手术治疗的喉癌患者41例，分别取其喉癌组织和癌旁组织，另取喉息肉行手术切除患者的息肉组织作为对照。分别采用Realtime-PCR和Westernblot检测各组织中RECK、MMP・14及VEGFmRNA和蛋白的表达情况,分析其与喉癌临床病理特征的相关性。结果MMP-14和VEGF在喉癌组织的表达明显高于癌旁组织及息肉组织(P［关键词］喉癌；基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶-14；转移［］［文献标识码］A［］1673-7210(2016)01(b)-0085-04［Abstract］ObjectiveToinvestigateexpressionand-clinicalsignificanceofRECK,MMP-14andVEGFinlaryngealcar-cinoma.MethodsFromAugust2013toJanuary2015,inTumorHos-pitalofLiaoningProvince,41patientswithlaryngealcancerandunderwentsurgicaltreatmentwerese-lected?thethroatcancertissueandpara-carcinomatissuewerecollect-edrespectively,atthesametime,polypustissue---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---from15patientswithlaryngealpolypuswerecollectedascontrol.Re-altime-PCRandWesternblotwereusedtodetecttheorganisation-sofRECK，MMP-14andVEGFmRNAandproteinexpressionre-spectively,thecorrelationoftheyandclinicalpathologicalfeature-soflaryngealcancerwasanalyzed.ResultsTheexpressionofMMP-14andVEGFinlaryngealcarcinomawassignificantlyhigherthantho-seinpara-carcinomatissueandpolypustissue(P[Keywords]Laryn-geal；Vascularendothelialgrowthfactor；Matrixmetalloproteinase14；Metastasis喉癌源于喉上皮，是头颈部发病率第二高的恶性肿瘤，具有高度的侵入性和转移性，其发生发展涉及多种因素和多个步骤[1-2]o基质金属蛋白酶14(matrixmetalloproteinase14,MMP-14)是基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)家族的重要成员之一[3],参与家族中其他MMPs的激活，起到降解和重塑细胞外基质的作用，同时在胃癌、乳腺癌和食管癌等众多癌症的侵袭转移中发挥重要作用[4-5]0血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子，可在体内诱导血管新生，在肿瘤转移及肿瘤再生中发挥重要作用⑹。RECK(re-version-inducing-cysteine-richproteinwithKazalmotifs,RECK)基因是一种新型肿瘤转移抑制基因和MMPs抑制剂，己报道---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---RECK对MMP-14和MMP-2等多种MMPs家族成员有抑制作用，该作用可以抑制肿瘤细胞的生长、发展及侵袭[7-8]o本研究通过采用Realtime-PCR和Westernblot检测喉癌患者组织中RECK,MMP-14和VEGFmRNA和蛋白的表达情况，进一步分析其与喉癌临床病理特征的相关性，为喉癌的转移和预后的判断提供一定的实验依据，为其机制研究奠定基础。1资料与方法一般资料选择2013年8月〜2015年1月于辽宁省肿瘤医院手术治疗的喉癌患者41例，其中男29例，女12例，年龄45〜81岁，患者术前均无放疗、化疗及其他免疫治疗经历，签署知情同意书，在术中分别取喉癌组织和癌旁组织；此外,在此期间选取15例喉息肉行手术切除患者的息肉组织作为对照，分别将上述组织置液氮中保存。主要试剂与仪器RECK、MMP-14、VEGF引物由北京华大基因公司合成；荧光定量PCR试剂盒为TAKARA公司产品；RECK、MMP-14、VEGF抗体为北京博奥森生物技术有限公司产品;ABI7500Real-TimePCR仪为美国ABI公司产品；垂直板电泳、转膜仪、凝胶成像系统为美国BIO-RID公司产品。方法RECK,MMP-14andVEGFmRNA检测根据Gen----本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---Bank中报道的RECK、MMP-14、VEGF基因序列，应用DNASTAR软件设计引物（表1）；液氮罐中取出保存的组织样本，约100mg加入1mLTrizol,迅速研磨成匀浆液，采用Trizol法提取RNA,反转录至cDNA,用SyberGreen荧光定量PCR检测试剂盒配伍反应体系（1pL、SYBRPremixExTaqI-I10piL...