生姜茎基腐病病原拮抗细菌的筛选与鉴定摘要：从生姜根际土壤分离得到62个细菌分离物。以姜茎基腐病病原菌(Pythiummyriotylum)为指示菌，共选出7株对姜茎基腐病菌有良好拮抗效果的细菌菌株。经过形态学观察、生理生化测定，16SrD7A序列及系统发育分析，结合《常见细菌系统鉴定手册》等，X-ll、JK-14、SF-19、SF-23等4株初步鉴定为芽抱杆菌属(Bac订lusspp),JK-19、JK-28、JK-253株鉴定为类芽抱杆菌属(Pearhbac订lusspp)0SF-19、SF-23、JK-25、JK-19、JK-28、X-ll和JK-14的16SrDNA序列的GenBank登录号分别为JQ283970、JQ28397KJQ283972、JQ283973、JQ283974、JQ283975、JQ283976和JQ283977。进一步分析表明，7株拮抗菌对Rhizoctoniasolani>Fusariumgraminearum>Verticilliumdahliae等多乖巾类型的病原真菌有较好的抑制作用；显微观察结果表明，拮抗菌可导致病菌菌丝细胞顶端膨大、菌丝体畸形、分隔增多等变化。关键词：生姜茎基腐病;Pythiummyriotylum；根际;拮抗细菌;鉴定中图分类号：S476+.1文献标识号:A文章编号:1001-4942(2012)11-0084-06ScreeningandIdentificationofAntagonisticBacteriaagainstGingerRhizomeRotPathogenPythiummyriotylumHanChaol,WuGuiYuanl,LiuAiXinl*,XuKun2*(1.CollegeofPlantProtection,ShandongAgriculturalUniversity,Taian271018,China；2.CollegeofHorticultureScienceandEngineering,ShandongAgricuIturalUniversity,Taian271018,China)AbstractSixty-twobacteriawereisolatedfromthegingerrhizospheresoilandsevenshowedbetterantagonisticeffectstoPythiummyriotylum.Accordingtotheresultsofmorphologiccharacteristics,physiologicalandbiochemicalpropertiesandphylogeneticanalysisofbacteria16SrDNA,thestrainsofX~11,JK-14,SF-19andSF-23werepreliminaryidentifiedasBacillusspp.,andthestrainsofJKT9,JK-28andJK-25belongedtoPeanibacillusspp・・Thesequencesof16SrDNAofthe7strainshadbeensubmittedtoGenBank,andtheiraccessionnumberswereasfollows：SF-19asJQ283971,SF-23asJQ283972,JK-25asJQ283973,JK-19asJQ283974,JK-28asJQ283975,X-llasJQ283976,JK-14asJQ283977,respectively.Allthe7strainsalsoshowedinhibitiontoRhizoctoniasolani,Fusariumgraminearum,Verticilliumdahliaeandsoon.Themicroscopicexaminationshowedthattheantagonisticbacteriacouldmakethehypaecelltipswol1en,themyceliadeformedandthecompartmentincreased・KeywordsGingerrhizomerot；Pythiummyriotylinn；Rhizosphere；Antagonisticbacteria；Tdentification生姜茎基腐病又称生姜软腐病、生姜茎腐病等，是目前生姜生产中危害最严重的病害。该病最早报道于印度，现L1遍布日本、韩国、斐济、澳大利亚、中国及台湾等多个国家和地区［1,2］。姜茎基腐病主要危害植株茎基部及姜块，表现为地上部植株枯黄，地下茎及姜块腐烂，一般地块可损失8%〜30%,重病地块可减产50%〜90%,甚至绝产［2］。有研究表明，引起生姜茎基腐病的病原为群结腐霉(Pythiummyriotylum)。该病菌主要通过病田土壤传播，同时带菌姜块在储存及移栽时也可进一步加重该病的发生和危害。目前国内外对该病害多采用化学农药进行防治［3,4］,由丁该病原菌主耍存在于土壤，因此药剂防治不但会出现因用药量人而带来的环境污染问题，而且很难从根本上治理该病害。利用根际有益微生物防治该类病害具有独特的优势，并在土传病害防治研究中开展了很多有益尝试［5,6］o本研究从发生姜茎基腐病的土壤中分离、鉴定到7株对茎基腐病菌有良好拮抗效果的细菌，并对其抑菌效果和抑菌机理进行了初步分析，为进一步开展生姜茎基腐病的生物防治提供了依据。1材料与方法11试验材料于2011年8~9月份生姜茎基腐病发病盛期，从山东泰安、莱芜等生姜种植区的发病地块采集土壤样詁，用于拮抗细菌的分离。以生姜茎基腐病菌(Pythiummyriotylum)为指示菌筛选拮抗菌，立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)>甜瓜黑斑病菌(Alternariaalternata)>棉花黄萎病菌(Vertic订liumdahliae)、烟草黑胫病菌(Ph...