一株高效解磷菌的筛选、鉴定及解磷特性研究摘要：从黄岛区盐碱地采集土壤样品，分离和筛选高效解磷菌，并进行鉴定，在此基础上，研究了其对盐碱地的改良作用。结果表明，从盐碱地中分离到6株解磷菌，其中PC02解磷能力最高，有效磷含量为80.3mg/L；结合其形态特征、生理生化特性和16SrDNA基因序列及系统发育树分析，将其鉴定为巨大芽抱杆菌(Bacillusmegaterium)；解磷菌PC02具冇降低盐碱地pH值和提高土壤冇效磷含量的作用。关键词：盐碱地；解磷菌；巨大芽苞杆菌中图分类号：S154.3文献标识号：A文章编号：1001-4942(2016)11-0069-04AbstractThesoilsampleofsaline-alkalilandinHuangdaowascol1ectedtoisolateandscreenhighphosphate-solubi1izingbacteria,thenthescreenedstrainwasidentifiedanditsimprovingeffectsonsaline-alkalilandweredetermined.Theresultsshowedthatsixphosphate-solubilizingbacterialstrainswereisolated,amongwhich,PC02hadthehighestphosphate-solubilizingcapacitywiththeavaiTablephosphoruscontentof80.3mg/L.Combinedwiththeanalysesofmorphological,physiologicalandbiochemicalcharacteristics,16SrDNAsequeneeandphylogenetictree,PC02wasidentifiedasBacillusmegaterium・IthadthefunctionsofreducingpHvalueandimprovingavailablephosphoruscontentofsaline-alkaliland.KeywordsSaline-alkaliland；Phosphate-solubilizingbacterium；Bacillusmegaterium土壤盐碱化是一个世界性问题。据估计，全球盐碱地每年以100万〜150万hm2的速度增长［1］。盐碱地占全球总陆地面积的10%［2］,我国是土壤盐碱化最为严重的国家之一。盐碱地治理是一项长期持久的工作，最本质的是从根本上改良盐碱地。磷是植物生长发育必需的营养元素，在农业生产中可直接影响作物产量。植物吸收的磷主耍来自土壤，而盐碱地中pH较高，95%以上的磷很难被植物直接吸收利用，为无效态磷［3］。另外，作物对施入的磷肥当季利用率只有5%〜10%［4］,大部分磷积累在土壤中,因此提高盐碱地中磷的利用率具有非常重要的意义。解磷菌是一种可将土壤屮难溶性磷转化为植物可以吸收利用的可溶性磷的特殊微生物功能类群［5］,在转化土壤难溶性磷和提高磷肥利用率方面具有非常重要的作用［6］。解磷菌成为研究热点。然而对解磷菌的研究多在对一些作物生长的影响上，未见对盐碱地改良效果的相关研究。本文针对盐碱地问题筛选并鉴定了一株高效解磷菌，并初步试验了其对盐碱地的改良效果，以期为盐碱地改良提供技术支持。1材料与方法1.1试验材料1.1.1样品來源土样：采自青岛黄岛区盐碱地。1.1.2培养基富集培养基：葡萄糖10g,磷酸三钙5g,(NH4)2S040.5g,NaCl0.2g,MgS()40.1g,酵母粉0.5g,水1L,pH7.0o初筛培养基：富集培养基中加入琼脂粉20goPVK培养基：初筛培养基加入0.4%滉酚蓝(pH6.7)6mLo复筛培养基：葡萄糖10g,酵母粉10g,磷酸三钙5g,(NH4)2S040.5g,NaCl0.2g,MgS040.1g,水1L,pH7.0。发酵培养基：葡萄糖10g,酵母粉10g,(NH4)2S040.5g,NaCl0.2g,MgS040.1g,MnS040.02g,水1L,pH7.0。牛理牛化鉴定培养基：依据《常见细菌系统鉴定手册》［7］配制。1.2试验方法1.2.1解磷菌的分离和筛选取10g采集土样置于100mL无菌水摇瓶中，32°C振荡30min；取5mL原液加到以磷酸三钙为唯一磷源的50mL富集培养基中，32°C培养72h；取5mL富集液转移到另一新鲜的富集培养基屮，连续转接3次。将最后的富集液稀释105倍，取稀释的悬液0.1也涂布初筛培养基,32°C培养。待平板长出菌落，挑取单菌落，在另一个平板上划线纯化，多次划线后用显微镜检查菌落是否单一，直至获得纯培养物后斜面保存备用。1.2.2高效解磷优良菌株的筛选将筛选到的菌株接种到PVK培养基上，32°C培养48h,观察透明圈人小。选择透明圈较大的菌株进行下一步试验。按照文献［8］检测有效磷含量。将筛选到的菌株接种到复筛培养基上,32°C培养4d,12000r/min离心10min,取上清液按照文献方法检测有效磷含量。1.2.3高效解磷优良菌株的鉴定①形态学特征与生理生化特征鉴定。将筛选到的高效解磷优良菌株涂布于初筛培养基平板上，32°C培养48h,观察细胞形态和菌落特征，...