免疫组织化学在兽医临床诊断的应用摘要：免疫组织化学乂称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定最测定的一项新技术。随着免疫组织化学技术的不断发展和成熟，该技术已经被广泛的应用在兽医临床疾病的病原休诊断上。免疫组织化学技术不仅能够准确地检测病原体，I仏几也广泛应用于病原在机体组织中的定位和动态分布特点研究、新病原的发现、活体动物中病原的检测、以及对同定纟fl织进行回顾性研究等，也早己成为现代病理学研究手段之一。关键词：免疫组织化学技术；兽医临床诊断；组织分布；定位正文：免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用免疫学的核心抗原与抗体特界性结合的原理，用标记抗体追踪抗原，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离了、同位素等显示一定的颜色，并借助显微镜、荧光显微镜、电镜对其颜色进行观察，以达到检测抗原物的目的一门细胞化学技术。免疫化学技术具有特异性强、敏感性性高，定位准确的优点，因此，该技术可以应用于提高临床病理诊断的准确度。免疫组织化学技术可以在石蜡切片、冰冻切片以及细胞制品上检测组织中广泛的病原体，从而可以分析出动物体内病原在组织中的动态分布情况，这些都使得IHC在兽医临床诊断中成为了一个重要的便捷、高效精确地检测病原体的检测及辅助诊断工具。1对特殊病原的检测张静⑴以SPF雏鸡为研究对象，新城疫中等毒力活疫苗，人工发病，利用免疫组织化学方法中的ABC(抗生物素一生物素一过氧化物酶复合物)法来检测。结果在实验鸡组织切片中可见到阳性染色，背景较淸晰，说明实验鸡组织中含有鸡新城疫病毒。利用免疫组织免疫法中的ABC法成功建立了人工病例，NDV抗原分布于实验鸡组织中。王泽、夏志平等人121应用抗狂犬病病毒的特异性抗体及免疫纽织化学方法检测接种了狂犬病病毒SRV—9毒株感染的小鼠脑组织，并对■狂犬病病毒抗原进行了组织定位分析。结果表明：在小鼠的小脑分子层蒲肯野氏细胞胞浆出现明显的局灶型阳性颗粒。说明免疫组织化学方法检测狂犬病病毒敏感度高、肓观，可作为诊断狂犬病病毒的辅助性方法，对研究狂犬病病毒在脑组织神经细胞及其他组织器官内的分布貝有一定的意义。陆海军等人131以蔗糖密度梯度离心提纯的工型鸭肝炎病毒(DHV—I)免疫兔制备兔抗DHV—I抗体，建立了检测石蜡组织切片中DHV—I抗原的间接免疫酶染色(indirectimmunoperoxidasestaining,IIS)方法，并对DHV一I强毒人丄感染死亡或濒死雏鸭的各个组织器官进行了检测。结果表明，IIS与DHV—I工感染死亡或濒死雏鸭的肝等呈现阳性反应,与鸭瘟病壽、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死广雏鸭的肝以及健康雏鸭的肝呈现阴性反应。感染DHV-I工死亡或濒死雏鸭的肝、脾、肾、心、胸腺、腔上囊、胰腺、十二指肠、盲肠、空肠、I叫肠、肓肠的免疫纽•织化学检测呈阳性或强阳性，DHV-1抗原主要分布于感染细胞的细胞质。该IIS法具有良好的特异性，可用于DHV—I在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV-I感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。遇秀玲、胡冬梅等人⑷采用免疫酶染色法在细胞片上鉴定PCV—2单抗的特界性，最佳工作浓度，确立免疫组化染色的最佳程序，并蹿PCR检测肺脏为PCV—2阳性的临床猪痛料纟R织进行检测。结果表明PCV一2单抗能与PCV一2特异反应，与PCV—1等病毒无交叉反应；猪感染时采样的最住部位是肺、扁桃体和咽喉部淋巴结。成功建立了PVC—2临床感染猪的免疫诊断方法。除此Z外，随着IHC在兽医临床上的LI益成熟，IHC发展成也能够在同一实验样品上进行多种病原体的检测，对一•些特殊的不能够体外分离培养的病毒、病菌也同样能够便捷快速地建立临床诊断方法。2对病原菌的检测诸婷婷、柳建新等人⑸采収免疫组织化学法対自然感染布鲁菌绵羊体内抗原进行检测,结果发现布鲁菌抗原主耍分布在肝脏、肾脏、子宫中，心脏未见阳性信号。并找到了实验免疫纟R化最佳的抗体浓度：二抗最佳浓度为1:200,一抗最佳浓度为1：l()()o利用该法可以清晰地观察，同时可以精确对布鲁菌抗原进行...