早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用权凯1,2,张改平2(1.郑州牧业工程高等专科学校,郑州450011;2.河南省免疫学重点实验室,郑州450004摘要:早孕因子(earlypregnancyfactor,EPF最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin10,Cpn10高度同源,是Cpn10在细胞外发挥的效应,对温度、酸碱度的耐受性较强,无动物及品种特异性。其生物学特性主要体现在抑制免疫和生长调节两方面:①EPF具有抑制母体的免疫反应而使精子、胚胎免受免疫排斥的作用,也是目前最早确认妊娠的生化标志之一;②EPF能促进肿瘤细胞的生长,也能促进烧伤、溃疡等伤口的愈合。由于EPF能增强抗淋巴细胞血清抑制T细胞花环的形成,因此,玫瑰花环抑制试验是检测EPF活性的经典方法。EPF在动物繁殖领域可用于动物的早期、超早期妊娠诊断,妊娠中断的检测,胚胎移植后的成活情况检测,在评价雄性繁殖力和繁殖免疫疾病的治疗等方面有着重要价值。关键词:早孕因子;伴侣蛋白10;玫瑰花环抑制试验中图分类号:S821.3文献标识码:A文章编号:167127236(20090420122203早孕因子(earlypregnancyfactor,EPF是哺乳动物受精后,所发现的能最早在血清中检测到的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。澳大利亚学者Morton等(1974进行玫瑰花环抑制试验(rosetteinhibitiontest,RIT时,,精后4~6h,子。,随后相继在孕妇和牛、羊、猪等妊娠哺乳动物血清中检测到了EPF活性。同时,随着对EPF生物学活性研究的深入,发现EPF不仅和哺乳动物的妊娠密切相关,还能抑制T淋巴细胞介导的细胞免疫,抑制玫瑰花环形成,防止母体对胚胎乃至胎儿发生免疫排斥反应(Athanasas等,1989,而且也是恶性肿瘤细胞分泌的一种免疫抑制剂,在烧伤、溃疡及类风湿等伤口愈合中,有着生长因子的作用特点(Athanasas等,1991。因此,EPF有了更为广阔的应用前景,在人和哺乳动物生殖领域,可用于早期和超早期的妊娠诊断,检测人工授精、胚胎移植、体外受精等胚胎生物技术的成功与否及胎儿发育状况等;同时,EPF作为一种温和的、天然的免疫抑制物,在治疗自身免疫疾病、预防器官移植后的排斥反应等方面收稿日期:2008209213作者简介:权凯(1977-,男,甘肃人,博士,讲师,研究方向:动物繁殖免疫。通信作者:张改平(1960-,男,河南人,研究员,博士生导师,主要从事细胞与分子免疫学研究。基金项目:河南省基础与前沿技术研究(082300433201。有重要价值;也可为细胞肿瘤临床鉴别诊断、疗效观察及愈后判断提供新的依据。1EPF活性后,世,(Clarke等,1978和羊(Morton等,1979、猪(Morton等,1979、牛(Tlemann等,1987等妊娠哺乳动物母体血清中检测到了EPF活性。Morton等(1977在孕妇子宫颈黏液中发现有EPF活性,且与血清中的EPF具有相同活性。Rolfe等(1983在男性睾丸恶性生殖细胞肿瘤患者血清中检出EPF样活性因子,称之为肿瘤源性EPF(t2EPF。Mehtta等(1987也报道在绒癌患者血清中检出EPF样活性。Ito等(1998在对牛胚胎进行培养时,用RIT检测到了EPF活性,随后在怀孕妇女的尿液、羊胎盘提取物及老鼠卵巢和输卵管培养基等中也相继检测到了EPF活性。Aranha等(1998研究结果发现,在妊娠期间淋巴细胞内蛋白合成增加,经检测发现其中有一种具有EPF活性的分子。Cavangh等(1997首先证实了卵巢分泌EPF;同时,在胚胎培养基等中检测到了EPF,说明除了妊娠母体本身某些器官组织分泌EPF外,胚胎也产生EPF。因此,Cavangh等(2003提出,早孕因子在附植前有2种形式(源于卵巢和胚胎,包括EPF2A和EPF2B,前者是由受精卵产生,后者则是妊娠依赖性的,由卵巢释放。说明EPF主要是在着床前期由卵巢和胚胎分泌产生,部分EPF来源于妊娠母体的外周血淋巴细胞。恶性肿瘤患者血清中的EPF・221・遗传繁育中国畜牧兽医2009年第36卷第4期样活性物质主要由肿瘤细胞分泌。直到近几年EPF才被证实是伴侣蛋白10(Cpn10的细胞外作用(Cavanagh等,1994;Fotini等,2003,由于Cpn10在各种细胞中均存在,与Cpn60特异性结合,起辅助蛋白质正确折叠的作用,这说明,EPF在动物体的各种器官和组织中均存在,只有在特定的条件下才被释放到细胞外,发挥EPF的作用。2EPF分子本质的...