高乌头不同溶剂萃取部分对小鼠的急性毒性研究张立军李芸张艳霞杨志军马骏戴海蓉摘要：目的比较高乌头不同溶剂萃取部分的急性毒性大小，筛选高乌头的毒性部位，为阐明高乌头的毒性成分提供依据。方法采用系统溶剂法对高乌头95%乙醇提取物进行萃取，依次得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水提6个不同的溶剂萃取部分，通过半数致死量（LD50）和最大给药量法对高乌头不同溶劑萃取部分的急性毒性进行比较研究。结果高乌头三氯甲烷、水提及正丁醇部分LD50分别为89.65、1805.40、24409.41mg/kg，95%可信区间分别为76.39～108.41、1521.60～2240.00、20422.54～24246.95；高乌头石油醚、乙酸乙酯及乙醇部分最大给药量分别为2686.01、3108.13、28376.21mg/kg。结论高乌头三氯甲烷部分毒性最大，乙醇部分毒性最小。关键词：高乌头；不同溶剂萃取部分；急性毒性；半数致死量；最大给药量；小鼠DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.03.012：R285.5：A：1005-5304（2018）03-0053-05Abstract：ObjectiveTocomparethetoxicityofdifferentextractionpartsofAconitumsinomontanumNakai；Toscreenout“toxicsections”ofAconitumsinomontanumNakai；ToprovidereferencesforfurtherstudyontoxicitycomponentsofAconitumsinomontanumNakai.MethodsSystematicsolventmethodwasusedtoextractthe95%ethanolextractsofAconitumsinomontanumNakai，andsixdifferentextractionfractions（petroleumether，chloroform，ethylacetate，butanol，alcoholandwater）wereobtained.Medianlethaldose（LD50）andmaximumdosemethodwereusedtoconductcomparativestudyonacutetoxicityofdifferentextractionpartsofAconitumsinomontanumNakai.ResultsChloroform，waterandbutanolextractionsinLD50ofAconitumsinomontanumNakaiwere89.65，1805.40and24409.41mg/kg，and95%confidencelimitswere76.39～108.41，1521.60～2240.00and20422.54～24246.95，respectively.Themaximumdoseofpetroleumether，ethylacetateandalcoholextractionswere2686.01，3108.13and28376.21mg/kg，respectively.ConclusionThemaximumtoxicityistheextractedsectionofchloroform，andtheminimaltoxicityistheextractedsectionofethanol.Keywords：AconitumsinomontanumNakai；differentextractionparts；acutetoxicity；LD50；maximumdose；mice高乌头为毛茛科乌头属植物高乌头AconitumsinomontanumNakai的根，又名麻布七、辫子七、破骨七等，是我国中西部地区民间习用中药，也是著名“七药”之一，具有祛风除湿、理气止痛、活血散瘀的功效，用于治疗风湿痹痛、关节肿痛、跌打劳伤等，现收载于2009年版《甘肃省中药材标准》[1]。现代药理研究表明，高乌头具有镇痛、抗炎、解热、局麻等广泛的药理作用[2-3]，临床上常用于治疗风湿性关节炎及局部镇痛[4-5]，高乌头中主要活性成分为二萜生物碱，其中以高乌甲素和冉乌头碱含量最高[6-7]，而活性成分之一高乌甲素已开发出不同剂型应用于临床[8]，也有不良反应案例报道[9]，其原因是高乌头毒性较强[10]，而其毒性机制尚不清楚，使其临床应用受限。本实验先用系统溶剂法得到高乌头不同溶剂萃取部分，为进一步明确高乌头的毒性部位，再用急性毒性试验方法对高乌头不同溶剂萃取部分进行比较，筛选出毒性部位，为阐明高乌头的毒性成分提供依据。1材料与方法1.1动物SPF级昆明种小鼠240只，雌雄各半，鼠龄6～8周，体质量18～22g，甘肃中医药大学实验动物中心，动物许可证号SCXK（甘）2011-0001。饲养于甘肃中医药大学SPF级动物实验室，温度23～26℃，相对湿度50%～60%，自由摄食饮水。1.2药物及制备高乌头药材，购自甘肃省天祝藏族自治县农贸市场，经甘肃中医药大学药学院杨扶德教授鉴定为高乌头的干燥根。取高乌头药材，净制，润软，切片（厚约5mm），自然干燥，筛去碎屑，用10倍量95%乙醇冷浸超声2次，每次冷浸24h，超声45min，过滤，合并2次滤液，回收乙醇，所得稠膏加水制成混悬液，依次用石油醚、三氯甲烷、水饱和乙酸乙酯、水饱和正丁醇分别萃取（每种溶剂均200mL×4），得到石油醚...