氟伐他汀对同型半胱氨酸诱导的凝集素样氧化低密度脂蛋白受体―1[摘要]目的探讨氟伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。方法分离培养HUVECs，分为正常对照组、Hcy刺激组：100μmol/LHcy与细胞孵育24h，3种不同浓度的氟伐他汀干预组：分别以不同浓度的氟伐他汀（0.1、1、10μmol/L）预孵育细胞24h，再与100μmol/LHcy共同培养24h，应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测LOX-1mRNA的表达。结果Hcy显著诱导HUVECsLOX-1mRNA的表达，氟伐他汀抑制Hcy诱导的LOX-1mRNA的表达，并呈现一定剂量依赖性。结论Hcy可能通过LOX-1介导其内皮损伤作用，氟伐他汀可能通过减少LOX-1过度表达发挥其抗动脉粥样硬化作用。[关键词]氟伐他汀；凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1；同型半胱氨酸；内皮细胞；动脉粥样硬化[]R972[文献标识码]A[]1673-7210（2016）06（c）-0169-04[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectoffluvastatinontheexpressionofLOX-1inducedbyhomocysteine（Hcy）inculturedhumanumbilicalveinendothelialcells（HUVECs）.MethodsHumanumbilicalveinendothelialcellswereculturedandtreatedwithHcy（100μmol/Lfor24hours）alone，orpre-treatedwithfluvastatin（0.1，1or10μmol/Lfor24h），followedbyHcytreatment.Afterrespectivetreatment，theexpressionoflectin-likeox-LDLreceptor-1（LOX-1）wasmeasuredbyreversetranscription-polymerasechainreaction（RT-PCR）.ResultsHcy（100umol/L）treatmentupregulatedtheexpressionofLOX-1inHUVECs.PretreatmentofHUVECswithfluvastatin（0.1，1or10μmol/L）decreaseHcy-inducedexpressionofLOX-1.Ahighconcentrationoffluvastatin（10umol/L）wasmorepotentthanthelowerconcentration（1μmol/L）.ConclusionTheseobservationsindicatethatendothelialdysfunctionelicitedbyHcymaybeassociatedwithanincreaseofLOX-1expression.InhibitionofexpressionofLOX-1maybeanothermechanismofbeneficialeffectsofstatinsinvasculardiseases.[Keywords]Fluvastatin；Lectin-likeoxidizedlow-densitylipoproteinreceptor-1；Homocysteine；Endothelialcells；Atherosclerosis动脉粥样硬化是心脑血管疾病的病理基础，内皮功能障碍则是动脉粥样硬化的始动环节。研究证实同型半胱氨酸（Hcy）能够导致内皮损伤，促进动脉粥样硬化形成[1]。已知他汀类药物具有抗动脉粥样硬化作用，其中独立于降脂作用以外的内皮保护功能尤为重要。LOX-1作为氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）的内皮细胞受体，通过介导oxLDL在内皮细胞的多种生物学效应，参与动脉粥样硬化的形成[2]。多种炎症因子、氧化应激因素都可诱导LOX-1的表达。但目前鲜有关于Hcy对内皮细胞LOX-1表达诱导以及氟伐他汀对内皮细胞LOX-1表达影响的研究。故本研究拟探讨氟伐他汀在体外对Hcy诱导的LOX-1表达所具有的影响。1材料与方法1.1一般材料DL-同型半胱氨酸（Sigma公司），氟伐他汀原药粉（Novartis公司，批号：X0362），RPMI1640培养基、胎牛血清、人AB血清（GibcoBrl公司），青霉素、链霉素、胶原酶Ⅰ型（Sigma公司），0.25%胰蛋白酶及0.02%EDTA（HyClone公司），HEPES、PBS缓冲液、内皮生长因子（Sigma公司），肝素钠（Solarbio公司），内皮细胞鉴定试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司），逆转录试剂盒（Promega公司），通用PCR优化试剂盒Ⅰ（博大泰克公司）。1.2人脐静脉内皮细胞分离培养与鉴定无菌条件下取健康产妇脐带，PBS缓冲液反复冲洗后，加0.1%胶原酶，37℃消化15min，离心后加完全培养基RPMI1640（10%胎牛血清，10%人AB血清，100U/mL青霉素，100μg/mL链霉素，50ng/mL内皮生长因子，50μg/mL肝素钠储存液），置37℃、5%CO2孵箱中培养，24h后换液，待人脐静脉内皮细胞80%融合，用胰蛋白酶-EDTA消化传代，经Ⅷ因子鉴定后，第2～3代用于实验。目前对于他汀类药物下调LOX-1表达的作用机制还未明确。有研究发现他汀类药物可增加内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的稳定性、增加内皮细胞NO的产...