醇析水提法提取菊花中菊花多糖医药导报2007年5月第26卷第5期?467?醇析水提法提取菊花中菊花多糖马力,陈文,张嵩安,郑妮,张玉,陈东生,陈华庭(华中科技大学同济医学院1.附属协和医院药剂科,武汉430022;2.药学院2002级,武汉430030)[摘要]目的探讨水提醇沉法从菊花中提取菊花多糖的最佳工艺.方法用正交设计法研究影响菊花多糖提取的因素,用硫酸.苯酚法测定菊花多糖的相对百分含量.结果菊花多糖的最佳提取工艺为水浸提2h,浸提温度100.C,氯仿萃取1次,沉析用乙醇浓度为80%.结论该工艺适合菊花多糖的提取,为深入研究菊花多糖提供了基础.[关键宇]菊花多糖;正交实验法;提取[]R286[文献标识码]A[]1004-0781(2007.)05-0467-02OrthogonalTestOptimizingtheMethodofExtractingPolysaccharidefromDendranthemaMrifoliumTzve1.withWaterandEthanolMALi..CHENWen..ZHANGSong—an,ZHENGNi,ZHANGYu,CHENDong—sheng,CHENHua—ting(1,DepartmentofPharmacy,UnionHospitalAfficiatedwiththeTongfiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430022,China;2.Grade2002,SchoolofPharmacy,rongiiMedicalCollege.HuazhongUnivers如’,ofScienceandTechnology,Wuhan430030,China)ABSTRACTObjectiveToinvestigatetheoptimalmethodofextractingpolysaccharidefromDendranthemamri[oliumTzve1.EtZhaowithWaterandEthano1.MethodsThefacto~affectingpolysaccharideextrationwerestudiedbyOrthogonaltest,andtherelativepercentagecontentofpolysaccharidewasdeterminedwithsulfuricacid-phenolmethod.ResultsTheoptimalmethodofextractingthepolysaccharidewasasfollow:waterdunkingtime2h,temperatureofwater100℃.extractingwithchloroformonce,concentrationofalcohol80%.ConclusionThismethodistheoptimalrouteforextractingthepolysaccharide.Thisworkprovidedabasisforitsfurtherstudy.KEYWORDSDendranthemamrifoliumTzve1.polysaeeharide:Orthogonaltest:Extraction菊花(DendranthemamrifoliumTzve1)为菊科菊属植物的干燥头状花序,具有疏风清热,平肝明目,散风降压的功效….多糖在抗肿瘤,抗炎,抗病毒,降血糖,抗衰老,抗凝血,促进免疫等方面都发挥着重要生物活性J.笔者在本实验中以菊花多糖提取产率和含量为指标,对提取过程中影响提取效果的水浸提时间,浸提温度,50mL氯仿萃取次数和乙醇浓度等4个因素3个水平进行深人研究,以确定提取菊花多糖的最佳条件,为菊花多糖的开发利用提供实验依据.1实验材料菊花样品采自湖北荆州菊花种植园,由华中科技大学同济医学院药学院生药教研室张长弓教授鉴定.乙醇(上海振兴化工一厂生产,纯度:95%,分析纯),石油醚(天津市东天正精细化学试剂厂提供,分析纯),氯仿(上海试剂一厂提供,分析纯),乙醚(天津市化学试剂三厂提供),岛津UV2450型分光光度计.2实验方法2.1菊花多糖的提取与含量测定菊花多糖的提取[收稿日期]2007-01-20[修回日期]2007-02-11[作者简介]马力(1967一),男,湖北钟祥人,主管药师,硕士,主要从事医院药学工作.电话:027—85726073,E—mail:mgm12345@yahoo.eom.an.采用水提乙醇析出沉淀法J,其原理是根据多糖易溶于水,难溶于乙醇,石油醚,氯仿等溶剂的性质,用水先将粗多糖从菊花中提取出来,用氯仿,石油醚等除去脂溶性杂质,再用Sevag试剂法除去蛋白,最后用乙醇将其从水提物中沉淀析出,从而分离出菊花多糖,经干燥即得到固体多糖.计算其产率和含量.具体的提取方法和步骤见图1.用Sevas~剂法除去蛋白二二===I二==二上清液加50吐氯仿萃取乙圆图1溶剂萃取法提取菊花多糖流程图2.2菊花多糖的含量测定2.2.1标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品10mg,置于100mL容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得葡萄糖对照品贮备液.准确量取上述对照品贮备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL,分别置于10mL容量瓶中,再分别各取0.5mL加浓硫酸?468?HeraldofMedicineVo1.26No.5May20077.5mL和5%苯酚1.5mL,于40℃保温30min,在490nm波长处测定吸光度(A),得回归方程C=119.37A一18.56(r=0.9992).结果表明,在10～50?mL.的浓度范围内具有良好的线性关系.2.2.2测定方法精密称取所提取的...