BRMS1、整合素B1及p—AKT在卵巢癌组织中的表达及临床意义［摘要］目的研究乳腺癌转移抑制因子KRRMS1).整合素Bl、p-AKT在卵巢癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测卵巢癌、良性肿瘤及其卵巢组织中BRMS1、整合素Bl、p-AKT的表达。结果BRMS1在卵巢癌中阳性表达率降低(1X0.01),其表达与卵巢癌转移相关，与组织学分级无关。整合素B1及P-AKT在卵巢癌中的阳性表达率升高(1X0.01),其表达与卵巢癌病理分期、分化程度有关(1X0.05)。BRMS1与整合素B1及p-AKT在卵巢癌组织中表达呈负相关(r二-0・59,r=-0.50,P<0.05)o结论卵巢癌中BRMS1有可能通过抑制整合索31/AKT通路，抑制肿瘤转移。［关键词］乳腺癌转移抑制因子1;整合素Bl;P-AKT；卵巢癌［］R737.31［文献标识码］A［］1674-4721(2013)08(b)-0009-03卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤，70%的患者就诊时已经出现转移［1-2］。乳腺癌转移抑制基因1(breastcancermetastasissuppressor1,BRMS1)是最近发现的一种新的转移抑制基因。其在卵巢癌组织中低表达。笔者前期体外试验证明，其具有抑制卵巢癌细胞侵袭、转移及黏附的功能，但缺乏体内及临床标本验证［3］。整合索不仅是黏附分子，也是一种信号转导分子，英能介导细胞内外双向信息传递，从而发挥其调节细胞生物学行为的功能，这种作用主要通过0亚皋完成。整合索01在卵巢癌组织及细胞株中高表达［4］,与患者的预后、组织分化呈负相关［5］。整合素B1/AKT信号通路在卵巢癌侵袭转移过程中起到重要作用，而BRMS1与整合素B1/AKT信号通路在卵巢癌中相关性的研究日前极少见到报道。研究BRMS1、整合素B1及p-AKT在卵巢癌组织中的表达，可以为了解卵巢癌的发生发展及BRMS1抑制肿瘤侵袭转移的机制提供一个新的切入点。1材料与方法1.1实验材料收集郑州大学第一附属医院医院妇科2008年1月〜2012年12月，资料完整的46例卵巢癌石蜡标本，患者年龄24〜76岁,中位年龄48岁，绝经前18例，绝经后28例。切片经常规IIE染色，至少2位病理学专家独立诊断。按照FIG0分期标准分类：IV期4例，III期25例，II期9例，I期8例；组织学类型：浆液性囊腺癌28例，低分化腺癌2例，子宫内膜样癌6例，黏液性囊腺癌7例，透明细胞癌3例；病理分级：G1级9例,G2级19例，G3级18例；腹水：有腹水35例，无腹水11例。收集同期因其他病因而切除的卵巢组织，其中，止常卵巢组织16例，患者年龄45〜60岁，中位年龄50岁；卵巢良性肿瘤11例，其中，浆液性囊腺瘤8例，黏液性囊腺瘤3例；患者年龄28〜75岁，中位年龄49岁。所有患者术前均未接受放疗、化疗、激素及生物治疗。1.2试剂兔抗人整合索01多克隆抗体购自上海亿欣生物科技有限公司；兔抗人BRMS1多克隆抗体购自北京博奥森生物有限公司；兔抗人p-AKT(Ser473)抗体购自美国SantaCruz公司。SP（链霉素抗生物索蛋白-过氧化物酶）免疫组化试剂盒、DAB（3,3-二氨基联苯胺）显色试剂购自北京中山生物技术有限公司。1.3方法1.3.1免疫组化染色石蜡标本连续切成4unr切片，以SP法进行免疫组织化学染色。BRMS1及整合索B1—抗工作浓度为1：300,p-AKT工作浓度为1：500o以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照。二抗工作浓度按照SP试剂盒说明进行。1.3.2结果判定镜下观察，日的蛋白在细胞核和（或）细胞浆着色,呈浅黄、棕黄、黄褐色等不同程度。每张切片镜下（X400）分析阳性细胞所占比例和染色强度，随机观察5个视野。500个细胞中计数阳性细胞比例。细胞计数评分标准：阳性细胞70%为3分；染色强度评分标准：不着色者为0分，浅黄色者为1分，棕黄色者为2分，黄褐色者为3分。将两项评分相加，0〜1分者阴性（-）,2分者弱阳性（+）,3〜4分者中度阳性（++）,5〜6分者强阳性（+++）。综合评分结果，（-）为阴性，（+〜+++）为阳性。1.3.3统计学方法釆用x2检验和Spearman相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1BRMSK整合素Bl、p-AKT蛋白免疫组织化学显色的结果BRMS1在止常卵巢及良性肿瘤组织中表达于细胞核，而在卵巢癌组织中主耍表现为表达缺失，极少数表达于细胞核和（或）细胞质中。整合素Bl在正常及良性肿瘤中阳性率极低，而在卵巢癌中主要表达于细胞质及细胞膜中。P-AKT的阳...