淘宝版QQ指导--薄层等点聚焦实验

标签带是啥?哦,就是这玩意。淘宝上有卖哦,亲~~~~~。这玩意就当时spacer了,很薄均匀,结实耐用,反正外国的玩意还就是好用。亲,别着急,国产的是不是也行?亲啊,国内不生产这玩意。这块玻璃要先粘上标签带,然后在疏水硅烷处理,使玻璃板与聚丙烯酰胺不亲和亲,告你疏水硅烷处理要用2%RepelSilane,很多公司有卖的,不贵也不便宜,反正得用,而且花老板的钱,最好买配好的。要没配好,那就得490ml氯仿(分析纯),加入10ml的RepelSilane,混合后,室温保存。擦玻璃板,横一遍,竖一遍,再横一遍。横竖擦的是不是很烦啊,亲.千万不能掉以轻心啊,亲,只有这样才能保证玻璃上没有没擦到的地方。记得回家给老妈擦窗户玻璃时,用上老羊的绝招啊,亲,看好你~~~~这块玻璃就是用来承载凝胶跑电泳的了,它要用亲水硅烷处理,处理后就让凝胶沾了,要想下了,不容易。得用0.5%BindingSilane处理这块玻璃板,药品要现配现用,2ml95%乙醇,0.5%冰醋酸中加入3ul的BindingSilane(涂一块玻璃板用量)。现在有公司卖配好的,也行吧,反正不如新鲜的好。亲,下一步很重要,咱们开始配胶,配方有没有?没有?那做啥实验啊,回去查资料去。配好凝胶溶液,按照下一示意图制胶。亲,记住哦,处理过的玻璃面相对。制胶时要加一个质量轻点的重物,哈哈够绕口的吧。咋办?亲,那就用一个50ml的小烧杯加点自来水。然后,等啊等,等胶聚合吧。亲啊,千万不能着急啊。时间很重要、温度也很重要、TEMED和APS的量还是很重要的。可适当调整。啥?亲不会。没事,亲,加老羊QQ:641256778,咱俩私聊。等的姐姐花都谢了。这时候胶聚合了。用个小刀,轻轻一翘,2块玻璃板就分开了,胶在上层那块玻璃板上粘着呢。咋没粘着上层玻璃板呢?亲,没办法,实验失败,退回第一步重新开始。亲,算你倒霉。要是这步很成功,那么按下一步操作。亲,看示意图。下一步一定要放君意的等电聚焦电泳槽里干啊。放好浸润电极缓冲液的滤纸条,要3-4或者5层滤纸哦。少了不行,效果不好啊,亲。那边是+极?那边是-极?红的是+极,黑的是-极。哎,这就是废话啊,亲。是问你H3PO4和NaOH那边接正极?你真坏,亲,呵呵,我当然知道了。竟然知道,还说对了,汗。那就把电极放在滤纸条照样吧。Hi,亲,不是长边的中央,是这么放。绿色的是电极丝,土黄色的是浸润电极缓冲液的滤纸。亲,通电吧,先预电泳。慢点,300到800V就行,最好开始时电压低点。亲,我先喝点茶,渴了。教亲实验有点累,说话多了点。别别,我自己拿杯子喝,不劳大妞喂了。预电泳半小时了,差不多了,点样吧。亲,咋没点样孔。呵呵,咱们薄层等点聚焦没点样孔。用个小滤纸条,叠成L型,放胶上,在上边点样就行。亲,L滤纸条放哪?亲,想放那放那,只要不是放要分析蛋白的等电点就行。加好样品了,电泳通电吧。多大电压。亲,这要看你分析啥玩意了,按你查的资料上的数据来吧。亲,电泳还得几个小时,老羊先吃点,饿了。等我回来再教你染色和其他的吧。

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