低次烟叶蛋白质一多酚复合物成分及抗氧化性探析摘要：采用碱溶酸沉法从烤烟低次烟叶中提取蛋白质-多酚复合物，检测其中蛋白质含量为350mg/g,多酚成分包括绿原酸、萸君夢、芸香昔，其含量分别为2.1、0.5、2.9mg/go对蛋白质-多酚复合物进行抗氧化性检测。结果表明，在一定范围内，DPPH•自由基与0H•自由基的清除率随复合物浓度的增加而升髙；对蛋白质-多酚复合物中蛋白质进行酶解，酶解产物的抗氧化性测试结果表明，随着酶解时间的延长，复合物对DPPH-自由基与0H-自由基的清除活性均呈下降趋势，说明蛋白质与多酚结合状态下才能保持蛋白质-多酚复合物的抗氧化性，而且其抗氧化性可能主要来源于复合物中的多酚关键词：低次烟叶；蛋白质-多酚复合物；酶解；抗氧化性中图分类号:S572文献标识码：A文章编号:0439-8114(2017)03-0531-04D0I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.03.035AnalysisofCompositionandAntioxidantActivityofProtein-polyphenolComplexfromDiscardedTobaccoLeavesXUChun-pingl，RANPan-pan1，ZENGYingl,TANLan~lan2,SHENTUHong-qian2,MAKuo~yan3,DAIYa3(1.CollegeofFoodandBiologicalEngineering,ZhengzhouUniversityofLightIndustry，Zhengzhou450002,China；2.TechnicalCenterofChinaTobaccoChuanyuIndustrialCo.Ltd.，Chengdu610066,China；3.TechnicalCenterofChinaTobaccoChongqingIndustrialCo.Ltd・,Chongqing400060，China)Abstract:Theprotein-polyphenolcomplexwasextractedfromdiscardedtobaccoleavesbyalkali-solutionandacid~isolationmethod・Theproteincontentwasdetectedas350mg/gandpolyphenolcomponentsineludingchlorogenicacid,scopoletinandrutin，andtheircontentswere2.1mg/g,0.5mg/g,and2.9mg/g,respectively.Theantioxidanttestsofprotein-polyphenolcomplexshowedthatinacertainrange,thescavengingrateofDPPH•radicalandOH•radicalincreasedwiththeincreaseoftheconcentTstion.ThescavengingactivityofDPPH•radicalandOH•radicalwasdecreasedwiththetimeofenzymatichydrolysis.Theresultsindicatedthattheantioxidantactivityofprotein-polyphenolcanmaintainwiththebindingstageofproteinandpolyphenol,andthemainsourceofantioxidantactivitycouldbefrompolyphenols・Keywords：discardedtobacco；proteinpolyphenolcomplex；enzymatichydrolysis；amtioxidantactivity中g是烟草种植大国，也是卷烟生产大国，同时每年产生的低次烟叶也数量庞大，有效利用这些废料既可以保护环境，减轻环境负担，也能创造更高的经济价值。烟叶蛋白质是一种优质的蛋白质资源，作为食用蛋白质来说它比鸡蛋、乳酪和牛奶更适合人体吸收利用，具有较高的营养价值和药用价值［1］。Kung等［2］、Lowe［3］对烟叶FI蛋白质进行了提纯。赵谋明等［4］使用碱溶酸沉法工艺对烟叶蛋白质进行提取。研究表明，提取出的蛋白质是一种蛋白质多酚复合物［5］,其中多酚成分对其生物活性有较大影响。林晓婕等［5］从烟叶中提取出色素蛋白质复合物，表明其中多酚物质对其抗紫外活性起主要作用。王洁［6］研究表明，蛋白质与多酚以非共价形式结合。本试验对提取的蛋白质-多酚复合物的组成进行分析，检测其抗氧化活性，并分析其组成对抗氧化活性的影响，以期为烟叶蛋白质的应用提供参考1材料与方法1.1材料、试剂与仪器低次烤烟叶粉末（2013年河南襄县产豫烟10号X3L等级烟叶）。浓盐酸、Tris.无水乙醇、磷酸、DPPH、邻二氮菲、PBS磷酸盐、硫酸亚铁、H202（30%）以上试剂均为分析纯；甲醇、乙酸为色谱级；绿原酸、芸香昔、为标准品（Sigma公司）；中性蛋白酶（200000U/g）.碱性蛋白酶（200000U/g）（江苏锐阳生物科技有限公司）；考马斯亮蓝G-250、牛血清白蛋白（西安国安生物科技有限公司）；回流装置、水浴锅、低速离心机（湘仪TDZ5-WS型）、紫外分光光度计（UV1700PC型）、Agilent1100高效液相色谱仪（美国Agilent公司）、色谱柱为WatersSymme-tryC18柱（250mmX4.6mm,5Um）。1.2方法1.2.1蛋白质-多酚复合物的提取按照碱溶酸沉法提取低次烟叶蛋白质-多酚复合物［4,7］,低...