酚红煌绿琼脂沙门氏菌分离操作指导

培养基名称:023110酚红煌绿琼脂英文名:BrilliantGreen/PhenolRedAgar培养基用途:用于分离培养沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外)(GB13091-91,ISO标准)。培养基使用原理:蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;酚红指示剂在pH6.8时呈黄色,pH8.1呈粉红色,发酵糖产酸的菌落呈黄色,不发酵糖的菌落为红色;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。培养基配方(每升):牛肉膏粉5g蛋白胨10g酵母膏粉3g磷酸氢二钠1g磷酸二氢钠0.6g琼脂15g乳糖10g蔗糖10g酚红0.09g煌绿0.005g最终pH7.0±0.2培养基使用方法:1、称取酚红煌绿琼脂54.7g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌20min,待冷至50℃左右,倾注灭菌平皿,待凝固后备用。2、用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。3、将平板翻转放入培养箱中,36±1℃培养20—40h。如有需要培养至48h。4、观察结果。生长在本培养基上的沙门氏菌典型菌落,使培养基颜色由粉红变红,菌落为红色透明。培养基质量控制:下列菌株接种在本培养基上,经36±1℃培养20—40h,结果如下:菌名菌号生长状况菌落特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115良好红色奇异变形杆菌CMCC(B)49005部分或完全抑制红色大肠埃希氏菌ATCC25922部分或完全抑制绿色贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

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