健脾化瘀清热药对大鼠胃溃疡愈合质量及其表皮生长因子受体mRNA表达的影响

健脾化瘀清热药对大鼠胃溃疡愈合质量及其表皮生长因子受体mRNA表达的影响作者:张永锋,吴正治,贾秀琴,谭永港,赵燕萍【摘要】目的探讨健脾化瘀清热代表药(黄芪、丹参、黄连)对胃溃疡愈合质量(QOUH)的影响及作用机制。方法采用大鼠乙酸胃溃疡模型,观察黄芪、丹参、黄连对该模型QOUH的影响;原位分子杂交法检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA的表达。结果黄芪、丹参、黄连均能改善胃黏膜组织的损伤,黄芪、丹参能增强溃疡周围组织EGFRmRNA的表达。结论健脾化瘀清热药提高QOUH、增强溃疡瘢痕处EGFRmRNA的表达可能是健脾化瘀药的作用机制之一。【关键词】胃溃疡;健脾化瘀清热药;表皮生长因子;溃疡愈合质量;大鼠Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectandmechanismofinvigoratingspleen,eliminatingstasis,heat-clearingdrugs(milkveteh,rootofredrootedsalvia,Chinesegoldthread)onqualityofulcerhealing(QOUH).MethodsTheratmodelsofchronicgastriculcerwasinducedbyaceticacid,theeffectsofQOUHofmilkveteh,rootofredrootedsalviaandChinesegoldthreadonthemodelofgastricUlcerwereobserved,theexpressionofEGFRmRNAofmucosaweremeasuredbyinsituhybridization.ResultsMilkveteh,rootofredrootedsalviaandChinesegoldthreadcouldimprovetheinjuryofgastricmucosa.Milkveteh,rootofredrootedsalviaincreasedtheexpressionofEGFRmRNAinthetissuearoundpepticulcer(PU).ConclusionInvigoratingspleen,eliminatingstasis,heat-clearingdrugscanimproveQOUH,itisoneofpossiblemechanismsthatthedrugsincreasedtheexpressionofEGFRmRNAinthetissuearoundPU.Keywords:gastriculcer;invigoratingspleen,eliminatingstasis,heat-clearingdrugs;epidermalgrowthfactor;qualityofulcerhealing;rat根据中医理论,综观消化性溃疡(pepticulcer,PU)缓解期临床治疗的有关方药,基本属于健脾、化瘀、清热范畴。本实验通过观察健脾化瘀清热代表药(黄芪、丹参、黄连)对大鼠胃溃疡愈合质量(qualityofulcerhealing,QOUH)及其表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达的影响,为中医药提高PU远期疗效提供思路与方法。1实验材料---本文于网络,仅供参考,勿照抄,如有侵权请联系删除---1.1实验动物SD大鼠90只,雌性,体重180~220g,广州中医药大学实验动物中心提供,合格证号:0028062。1.2药物与试剂黄芪、丹参、黄连由深圳市第二人民医院第一门诊部中药房提供,各单味药物置于搪瓷药罐中,以1∶10比例加入蒸馏水浸泡2h,加热煮沸30min,滤出头煎,药渣加蒸馏水适量,再煮沸30min,滤出二煎,合并2次滤液,浓缩成200%,置冰箱中保存。西咪替丁片,江西制药有限责任公司生产,批号990808-1。EGFRmRNA试剂盒,购自武汉博士德生物工程有限公司。1.3仪器显微镜测微尺(武汉光学仪器厂生产),原位杂交专用盖玻片(博士德公司产品),杂交盒,S-HH-W型恒温水浴箱(上海浦东跃欣科学仪器厂),SYQ-政法X-35BⅠ型自动座式压力蒸气灭菌器(上海申安医疗器械厂),CMIAS真彩色病理图像分析系统(北京航空航天大学),NikonP-Ⅲ显微摄影系统(日本)。2实验方法2.1造模参考文献[1]方法。大鼠造模前24h禁食不禁水。用20%乌拉坦4mL/kg体重腹腔注射麻醉。腹部备皮、消毒,于剑突下腹中线打开腹腔,手术切口长约2cm,暴露出胃,在胃前壁浆膜面窦体交界处同一部位(避开血管)用浸有冰醋酸、直径为5mm的圆形滤纸接触2次,每次30s,然后还纳胃体,逐层缝合切口,涂上一层稀释的火棉胶,保护切口。2.2分组与给药造模大鼠清醒后,完全随机分为6组:正常对照组、模型对照组、西咪替丁组、黄芪组(健脾药)、丹参组(化瘀药)及黄连组(清热药),每组15只。于造模第6天开始灌胃,黄芪、丹参及黄连给药剂量均为20g/(kg?d),西咪替丁给药剂量为67mg/(kg?d),对照组予0.9%NaCl溶液14.6mL/(kg?d)。每天1次,共16d。所有药物溶液及0.9%NaCl溶液pH值均为7.0。于造模第22天断头处死大鼠,检测指标及取材。2.3标本的采集和处理大鼠禁食不禁水24h后断头处死,剖腹取胃,以溃疡瘢痕平行于胃长轴方向的最长径为中心取材,8%甲醛固定,石蜡包埋,以瘢痕的最长径为中心连续切片,间---本文...

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