¹本文为国家自然科学基金项目(30560147和30760236º南昌大学医学院微生物学教研室,南昌330006作者简介:李祥(1986年-,女,在读硕士,E-mail:polly.55@163.com,同时工作于江西省景德镇妇幼保健院药剂科,景德镇333000;通讯作者及指导教师:谢小梅(1964年-,女,博士,教授,主要从事微生物与免疫学研究;刘金辉(1965年-,男,硕士,副教授,主要从事微生物与免疫学研究。doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2010.10.004小鼠侵袭性肺曲霉病发病过程中TLRs/NF-JB¹信号通路的激活李祥罗闳丹石青º谢小梅刘金辉º(江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,南昌330004中国图书分类号R341文献标识码A1000-484X(201010-0881-04[摘要]目的:研究小鼠侵袭性肺曲霉病(IPA发生过程中TLRs/NF-JB信号通路的激活,探讨IPA的发病机理。方法:小鼠随机分为正常组(N、正常接菌组(N+Af和IPA模型组(IPA,经鼻吸入烟曲霉(Af孢子后在不同时相点处死小鼠,无菌取肺组织行病理切片、Af菌落计数,RT-PCR法检测TLR2和TLR4mRNA、蛋白印迹法检测NF-JBp65、IL-1B的表达。结果:(1鼻吸入Af后72小时时,IPA组肺组织出现严重炎症反应,并有大量的菌丝生成,同时各时相点的菌负荷均高于N+Af组;(2与N+Af组比较,IPA组TLR2mRNA后期异常高表达,TLR4mRNA持续低表达,NF-JBp65早期骤然升高后又持续下降,IL-1B一直呈低表达状态。结论:TLRs的异常激活导致宿主下游信号的低反应性,宿主不能清除Af促使了IPA的发生发展。[关键词]TLR/NF-JB;侵袭性肺曲霉病;Af;天然免疫;模式识别受体TheactivationofTLRs/NF-JBsignalpathwaysintheinvasivepulmonaryas-pergillosisofmiceLIXiang,LUOHong-Dan,SHIQing,XIEXiao-Mei,LIU激n-Hui.KeyLaboratoryofModernPreparationsofTraditionalChineseMedicine,MinistryofEducation,激angxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004,China[Abstract]Objective:TostudytheactivationofTLRs/NF-JBsignalpathwayinInvasivePulmonaryAspergillosis.Methods:Themicewererandomlyselectedintothreegroups:thenormalmice(N,thenormalmicewithinfection(N+AfandIPAmice(IPA.Themiceweread-ministratedwithAspergillusfumigatus(Afviaintranasalandsacrificedatdifferenttime.Thelungtissueofmicewereextractedundersterilecondition,andthenstudiedbypathologicalsection,countingthelungburdenanddetectingtheexpressionoftheTLR2、TLR4mRNAbyRT-PCR,NF-JBandIL-1BwiththeWesternblot.Results:72hslaterafterinfection,IPAmicewereseriousinflammatoryreactionandhyphaap-peared,alsolungburdernwashigherthaninNmice.ComparedtotheN+Afmice,TLR2mRNAofIPAmicewerehighexpressionabnormallyatlatetimewith,persistentlowexpressionTLR4mRNA,andNF-JBp65increasedsharplyearlyandthendecreasedpersistently,IL-1Bwasinlowexpression.Conclusion:TheabnormallyactivationofTLRs/NF-JBinduceslowactionofthedownstream,sohostscan.tcleartheAs-pergillusfumigatuswhichresultsinthedevelopmentofIPA.[Keywords]TLR/NF-JB;Invasivepulmonaryaspergillosis;Aspergillusfumigatus;Innateimmune;Patternrecognitionreceptors侵袭性肺曲霉病(Invasivepulmonaryaspergillosis,IPA是临床常见的真菌感染性疾病,为烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus,Af侵入免疫受损宿主所导致的感染。近年来,随着恶性肿瘤、器官移植、HIV等免疫受损患者的增多,IPA发病率逐年上升,致死率高达60%~95%,迄今发病机理仍不清楚[1]。综合现有研究发现:IPA的发生发展是宿主的免疫机制与Af毒力因素相互作用的结果。宿主抵抗Af感染的防御能力包括天然免疫应答和适应性免疫应答,其中天然免疫系统中的模式识别受体(Patternrecog-nitionreceptors,PRRsTLRs已成为研究热点。大量研究证实了TLRs在细菌、真菌等感染中发挥重要作用,它们与病原体的相应配体结合后激活效应分子,通过活化的效应分子激活转录因子NF-JB,从而产生一系列的免疫应答。国外多采用基因敲除的方法研究TLRs信号通路在IPA中的作用,但是结果并不完全一致。为了整体、系统的模拟人类IPA的发生,本研究针对...