第1页共8页反相高效液相蒸发光散射检测法测定三金软胶囊中羟基积雪草苷含量[摘要]目的：建立测定三金软胶囊中羟基积雪草苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法测定羟基积雪草苷含量。色谱条件为DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-水(50∶50)，检测器为蒸发光散射检测器。结果：羟基积雪草苷在1.006~10.064μg的范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9992），精密度、8h内稳定性、重复性均符合要求，平均回收率为100.16%（RSD=2.28%）。结论：该含量测定方法灵敏、准确，重复性好，专属性强，适合羟基积雪草苷的含量测定。[关键词]三金软胶囊；高效液相色谱法；蒸发光散射检测器；羟基积雪草苷[]R927.2[文献标识码]A[]1673-7210（2008）10（b）-026－第2页共8页０２DeterminationofmadecassosideinSan激nSoftCapsulaebyRP-HPLC-ELSDGAOYong-yan，LIYong-激e(GuangdongProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510120,China)[Abstract]Objective：TodeterminethecontentofmadecassosideinSan激nSoftCapsulae.Methods：HPLCmethodwasusedtodeterminethecontentofmadecassoside.ThecolumnwasDiamonsilC18(150mm×4.6mm,5μm),themobilephasewasmethanol-water(50∶50),andtheevaporativelight-scatteringdetector(ESLD)wasusedasdetector.Results：Thelinearrangewas1.006-10.064μg(r=0.9992),precision,stabilityandreproducibilityweregood,theaveragerecoverywas100.16%(RSD=2.28%).Conclusion：The第3页共8页methodissensitive,accuratewithgoodreproducibilityandstrongspecificity,anditcanbeusedforthedeterminationofmadecassoside.[Keywords]San激nSoftCapsulae;HPLC;ELSD;Madecassoside三金软胶囊是由金樱根、积雪草等中药组成的复方制剂，具有清热解毒、利湿通淋、益肾的功效。可治疗下焦湿热，小便短赤，淋沥涩痛，热淋，肾盂肾炎，膀胱炎，肾虚湿热下诸证者[1，2]。临床应用广泛，具有较好的疗效。本研究参考文献[3]使用反相高效液相色谱法，测定积雪草中羟基积雪草苷的含量。1仪器与试药Agilent1100series高效液相色谱仪，SEDEX75蒸发光散射检测器，AgilentHPLC色谱工作站；羟积雪草苷对照品（中国药品生物制品检定所）；三金软胶囊(自制)；甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。第4页共8页2方法与结果2.1色谱条件DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-水(50∶50)；检测器为蒸发光散射检测器；漂移管温度：35℃；载气（空气）压力：3.6bar；柱温30℃；流速1.0ml/min[2，3]。色谱图如图1所示。2.2溶液配制2.2.1对照品溶液的制备取羟基积雪草苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含0.2mg、0.6mg的溶液，即得。2.2.2供试品溶液的制备取本品12粒，精密称定内容物1.0g，精密加入甲醇40ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次15ml，合并提取液，用氨试液洗涤2次，每次15ml，取正丁醇液，减压回收溶剂至干，第5页共8页残渣用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。另按处方制备缺积雪草的三金软胶囊，同法制得阴性样品溶液，备用。2.3标准曲线精密吸取羟基积雪草苷（0.503mg/ml）对照品溶液2、4、8、12、16、20μl进样，测定峰面积，以峰面积对进样量分别取对数后，进行线性回归，回归方程为：A＝1.352M+15.698（r=0.9992），表明羟基积雪草苷在1.006～10.064μg的范围内，进样量与峰面积的线性关系良好。2.4精密度试验精密吸取羟基积雪草苷对照品溶液10μl，连续进样6次，记录峰面积，RSD=1.56％，表明仪器精密度良好。2.5稳定性试验取供试品溶液，在8h内每隔2h精密吸取10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，其RSD=1.80%，表明供试品溶液在8h内稳定第6页共8页性良好。2.6重复性试验取样品5份，每份1.5g，精密称定，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，测定并计算其含量，RSD=1.90%，表明分析方法的重复性良...