・论著・文章编号:1007-8738(200406-0734-03多天线癌胚抗原检测方法的建立及其在恶性肿瘤患者血清中的水平张利军,刘树林,徐顺军(第四军医大学唐都医院检验科,陕西西安710038收稿日期:2003-11-28;修回日期:2003-12-28作者简介:张利军(1973-,女,山东曹县人,技师.Tel:(02983577701;Email:pathol@fmmu.edu.cnEstablishmentofamethodtodetectmulti2pleantennaecarcinoembryonicantigen(MA2CEAandMA2CEAlevelintheseraofpatientswithmalignanttumorsZHANGLi2jun,LIUShu2lin,XUShun2junDepartmentofClinicalLaboratoryDiagnosis,TangduHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710038,ChinaAbstractAIM:Toestablisharapidquantitativemethodtodetecttheserummultipleantennaecarcinomabrinicantigen(MA2CEA,andtomeasuretheMA2CEAlevelsintheseraofpatientswithmalignanttumors.METHODS:Neuraminidase(NMDwasusedtodigestthesialicacidatterminalsofsugarchainsofMA2CEA,andthenthedaturastramoniumagglutinin(DSAandan2ti2CEAantibodywereusedtosetupstreptavidin2biotincomplex(ABCsystemEIA(ABC2EIAfordetectingserumMA2CEAlevelsof239patientswithcarcinomasoflung,stomach,liver,colonandovary.TheserumCEAlevelwasdeterminedbyELISA.RESULTS:ThelevelofserumMA2CEAwasremarkablyelevatedintheCEA2positivepatientswithlungcancer.Thepos2itiverateofMA2CEAwas14.6%in75patientswithlungcan2cers,and47.3%in19CEA2positivepatientswithlungcancers.TheMA2CEAwasnotdetectedintheseraofothertumorpa2tients.CONCLUSION:Wehavedevelopedamethodfordetec2tionofMA2CEAlevels,whichlaysthefoundationforthediffer2entialdiagnosisoflungcancerandforresearchontheothermultipleantennaetumormarkers.Keywords:multipleantennaesugarchainstructure;carcinoem2bryonicantigen;tumormarker摘要目的:建立多天线癌胚抗原(multipleantennaecarcinoembryonicantigen,MA2CEA的快速定量检测法,并研究肿瘤患者血清中多天线癌胚抗原的水平。方法:采用神经氨酸酶(neuramin-idase,NMD降解MA2CEA糖链外侧的唾液酸。采用蔓陀萝凝集素(daturastramoniumagglutinin,DSA和CEA抗体,建立检测MA2CEA的链霉亲和素2生物素系统酶免疫分析法(ABC2EIA,分别检测239例肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和卵巢癌患者血清中MA2CEA的水平,同时采用ELISA检测血清CEA的水平。结果:血清MA2CEA的水平在CEA阳性的肺癌患者中明显升高,75例肺癌患者血清MA2CEA的阳性率为14.7%,而CEA水平升高的肺癌阳性率为47.3%;但胃癌、肝癌、结肠癌和卵巢癌患者,无论CEA水平是否升高,均未检测到MA2CEA水平的升高。结论:建立了一种可定量检测肿瘤患者血清MA2CEA的方法,为肺癌的鉴别诊断及其他多天线糖链肿瘤标志物的研究奠定了基础。关键词:多天线糖链结构;癌胚抗原;肿瘤标志物中图分类号:R544.12文献标识码A30多年的临床应用表明,癌胚抗原(carcinoem2bryonicantigen,CEA对恶性肿瘤的特异性很差。近年CEA主要作为恶性肿瘤复发转移的指标及对其生物半衰期的意义进行了研究1,2。1990年,Kabata等发现,尿中人绒毛膜促性腺激素(HCG的氨基酸序列及抗原性,在正常孕妇与绒癌患者之间完全相同,但具有3,42天线结构的HCG在蔓陀萝凝集素(daturastramoniumagglutinin,DSA层析柱上表现为强结合,而非癌性患者尿中的HCG则不结合或弱结合。因此,在检测尿中HCG时,由于蛋白部分相同而糖链结构不同,在DSA“”柱上可表现出质的差异,而成为鉴别诊断绒癌与良性妇科病的特异方法。此后,国内学者用DSA亲和柱层析法,对多天线碱性磷酸酶进行了较为深入地研究。结果表明,只有肝癌血清在DSA柱上表现为强结合325。我们认为,各种恶性肿瘤患者CEA特异性较差的原因,可能是由于CEA的糖链结构有别,从而对多天线癌胚抗原(multi2pleantennaecarcinoembryonicantigen,MA2CEA的检测方法及其意义进行了研究。1材料和方法1.1材料链霉亲和素与生物素化蔓陀萝凝集素(DSA购自美国Vector公司。CEA检测试剂盒为美国Bio2seed公司产品。神经氨酸酶(neuraminidase,NMD,购自上海生物化学研究所。美...