一株锦鲤腐皮病致病菌的分离与鉴定及3种消毒剂对其的作用效果摘要：为研究锦鲤腐皮病的防治方法，试验分离了锦鲤腐皮病治病菌一株，经VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析仪鉴定该菌为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonaspaucimobilis)；采用改良二倍稀释法,研究了甲醛、高猛酸钾和三氯异氧尿酸3种消毒剂对其的作用效果。结果表明：甲醛、高镭酸钾和三氯异氤尿酸对该致病菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为14Ul?L-l>3mg?L-l>12mg?L-l,最小杀菌浓度(MBC)分别为28UL?L-1>15mg?L-l>36mg?L-lo关键词：消毒剂；锦鲤；腐皮病；最小抑菌浓度(MIC)；最小杀菌浓度(MBC)中图分类号：R187+.1文献标识码：ADOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2011.06.010IsolationandIdentificationonOnePathogenicBacteriaStrainof“Skinfester”DiseaseinKoi(Cyprinuscarpio)andGermicidalEfficacyofThreeKindsofDisinfectantAgainstIsolatedPathogenicBacteriaXINWei-tao,DONGShao-jie,YANGGuang(DepartmentofFisheryScience,TianjinAgriculturalUniversity,KeyLaboratoryofAquaticEcologyandAquacultureofTianjin,Tianjin300384,China)Abstract:Tostudycontrolmethodsof“Skinfester"diseaseinKio,onepathogenicbacteriastrainwasisolatedfromKoithatsufferedfrom"skinfester”diseaseandidentifiedasSphingomonaspaucimobilisbyusingVITEK-2automatedmicrobiologysystem・Byimproveddoubledilutionmethod,germicidalefficacyofmethanal,potassiumhypermanganateandtrichloroiminocyanuricacidagainstS・paucimobiliswasstudied.Theresultsshowedminimalinhibitoryconcentration(MIC)ofthreekindsofdisinfeetantwas14|1L?L-1,3mg?L-land12mg?L-landminimalbactericidalconcentration(MBC)was28|1L?L-1,15mg?L-land36mg?L-l.Keywords:disinfectant;Cyprinuscarpio;"Skinfester"disease;minimalinhibitoryconcentration(MIC);minimalbactericidalconcentration(MBC)锦鲤(Cyprinuscarpio)在分类学上隶属鲤形目、鲤科、鲤属，因其多变的体色和美妙的泳姿，被人们用作观赏动物进行养殖。为维系锦鲤性状稳定而采取的近亲交配方式，降低了其对病原的抵抗力，导致在锦鲤养殖过程中常会因病原生物感染而出现各种疾病。腐皮病又称打印病、溃烂病，是锦鲤常见的细菌性疾病之一，主要危害一龄以上大鱼，夏、秋季节是该病的高发期。鱼种患该病的部位主要在肛门附近的两侧，或尾鳍基部，亲鱼则全身各处均可出现病灶。症状初期病灶部位出现红斑，严重时鳞片脱落，肌肉腐烂，鱼体消瘦，严重破坏了锦鲤的观赏性。目前对该病的防治多使用抗生素类药物，长期使用和不科学的使用方法使该病致病菌对抗生素类药物产生了耐药性。王旭等⑴的研究表明该病病原菌对万古霉素等19种抗生素存在耐药性问题。本试验分离锦鲤腐皮病致病菌1株，使用VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分离仪对其生理生化特性进行了鉴定，并研究了甲醛、高猛酸钾和三氯异氤尿酸3种常见消毒剂对其的作用效果，以期为该病的防治提供参考。1材料和方法1.1病原细菌的分离和鉴定采用常规方法从病鱼内脏器官中分离、纯化细菌；使用VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析仪对细菌进行鉴定；通过注射感染的方法进行攻毒试验以确定致病菌。1.2致病菌菌悬液的制备将致病菌接种于液体培养基（牛肉膏3g、蛋白腺10g＞氯化钠5g、蒸馆水lOOOmL.pH值7.2）中，28°C、180r?min-l振荡培养24h后，3000r?min-l离心30mine去上清液后用无菌生理盐水洗脱细菌，制备成5X106cfu?mL-l的细菌悬液备用。1.3试验用消毒剂的制备用无菌水将分析纯高猛酸钾和三氯异氤尿酸分别配制成浓度为2048mg?L-l的母液，将甲醛溶液（浓度35%~38%）配制成浓度为2048UL?L-1的母液。用无菌水按二倍稀释法将母液依次稀释10个梯度，配制成浓度分别为1024、512、256、128、64、32、16、8、4、2mg?L-l（UL7L-1）的消毒剂。1.4最小抑菌浓度与最小杀菌浓度测定最小抑菌浓度与最小杀菌浓度的测定参照王印庚等［2］的方法略作改动。在3mL含有消毒剂的培养液中加入0.1nnL细菌悬液，充分混匀，28£恒温培养24ho取上述混合液0.5mL,加入含有2.5m...