盐酸氯丙嗪在中毒大鼠体内的死后分布研究摘要：目的建立氯丙嗪灌胃染毒大鼠致死模型研究染毒致死大鼠体内各脏器氯丙嗪的死后分布规律。方法雄性SD大鼠6只，体重200g±10g经灌胃匀速注入6LD50（1350mg/kg）氯丙嗪。观察给药到死亡时的生命体征的变化以及中毒症状，待呼吸和心跳全部消失时，迅速解剖动物，取大脑、心、肝、脾、肺、肾、心血等冷冻保存，碱性乙醚提取，气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测其中氯丙嗪含量。结果大鼠在氯丙嗪灌胃后均出现体温降低，呼吸减慢，血压下降等症状，于染毒后10h～11h死亡。各脏器组织氯丙嗪含量由高到低分别为：胃>肝>肺>脑、脾、肾、心>心血。结论本研究建立的模型可应用于氯丙嗪法医毒物动力学及中毒案件的法医学研究。氯丙嗪中毒（死）的法医学鉴定中，除了心血、胃外，应采肺、肝、脑、脾、肾、心等检材，进行全面毒物分析，并结合症状及体征发现进行综合判定。关键词:氯丙嗪；法医毒物动力学；死后分布；气相色谱：R969.1文献标识码：A：1672-1349（2011）08-0982-02氯丙嗪是二甲胺类抗精神病药。口服易吸收，主要自肾随尿排出［1］。近年来出现的氯丙嗪中毒的案件［2，3］引起了人们的广泛关注，因此氯丙嗪中毒的判定已成为法医学研究的一个热点课题。目前国内外关于氯丙嗪中毒的研究，多见于一些案例分析报道［4，5］和检材中氯丙嗪的定性和定量分析方法研究［6，7］，而关于氯丙嗪中毒法医学鉴定有关的法医毒物动力学［8］，如死后分布尚未见系统的研究报道。本实验建立氯丙嗪灌胃染毒大鼠致死模型，研究氯丙嗪在染毒大鼠体内的死后分布规律，为氯丙嗪中毒（死）案件的法医学鉴定提供实验依据。1材料与方法1.1仪器与试剂TRACE共产党SQ气相色谱/质谱联用仪，美国ThermoFinnigan公司；TRACE2000GC气相色谱仪，美国ThermoFinnigan公司。氯丙嗪标准品（10342-0001）购于中国药品生物制品检定所；盐酸氯丙嗪糖衣片每片25mg，上海信宜九福药业有限公司；10%氢氧化钠溶液；SKF525A（内标液）配制成1.0mg/mL的乙醇储备液，置冰箱保存。其他试剂均为分析纯。1.2动物模型雄性SD大鼠6只，体重200g±10g，实验前隔夜禁食。经灌胃匀速注入6LD50（1350mg/kg）氯丙嗪。待呼吸和心跳全部消失时，迅速解剖动物，取大脑、心、肝、脾、肺、肾、心血等冷冻保存，碱性乙醚提取，气相色谱质谱法定性、气相色谱定量检测其中氯丙嗪含量。1.3样品提取和检测取固体检材1g或血1mL，加蒸馏水2mL，加入内标液10μL，振荡，固性检材超声细胞粉碎匀浆3min，10%NaOH调pH至12，振荡摇匀，加入5mL乙醚，振荡15min,1800r/min离心10min，将上清液移入另一干净且干燥试管中，重复萃取一次。40℃恒温水浴中挥干，20μL无水乙醇定容，取1μL进样检测，保留时间定性，内标法和工作曲线法定量［9,10］。气相色谱-质谱联机分析，选择离子模式检测（SIM），质谱图、质量色谱图定性，气相色谱检测，内标法定量。1.4工作曲线和回收率1.4.1工作曲线分别在空白家兔血液、肝脏中添加氯丙嗪标准溶液及SKF525A溶液，配制成分别含有氯丙嗪0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、8.0μg/mL、10μg/mL，SKF525A10.0μg的系列样品，按2.2项下方法提取并检测。以氯丙嗪浓度（μg/mL或μg/g）为横坐标（X），氯丙嗪与内标的峰面积之比为纵坐标（Y）进行线性回归，所得线性回归方程Y5.1243X－0.8511，r20.9901结果表明,肝中氯丙嗪在0.1μg/g～10μg/g范围内线性关系良好。1.4.2回收率空白肝加入氯丙嗪标准溶液0.2μg、2μg、10μg，按1.3项下方法提取并检测，工作曲线法计算检材中氯丙嗪含量，肝中氯丙嗪的提取回收率为（95.8±2.4）%～（118.3±6.2）%。1.5统计学处理各组数据用SPSS11.5软件对组织中氯丙嗪的含量进行方差分析及t检验，数据以均数±标准差（x±s）表示。2结果2.1中毒症状大鼠在氯丙嗪灌胃后活动明显减少，出现嗜睡症状，6LD50灌胃后10h～11h后出现四肢抽搐,全身痉挛现象,抽搐10min左右窒息死亡。2.2GC和GC/MS检测氯丙嗪和SKF525A保留时间分别为6.66min和10.45min，峰形对称，可完全分离，溶剂和空白脏器提取内源性杂质对氯丙嗪和SKF...