重庆武陵山区野生牛肝菌人工促繁研究工作探讨摘要：文章通过实施“彭水县野生牛肝菌人工驯化关键技术研究”和“武陵山区林下食用菌良种高效栽培试验示范”项目，开展野生牛肝菌菌种分离、人工促繁和菌根合成等系列研究工作及探讨。牛肝菌菌丝从组织块边缘长出，生长较慢，易老化，老化过程中菌丝减少，最后变为固体状物，并且分泌褐色水珠；液体培养菌丝需要的时间较长，一般需要1-2个月，菌丝球经过鉴定，确定为美味牛肝菌，放入-80℃超低温冰箱中进行保藏；人工促繁和菌根合成需要继续试验和长时间观测。/2/view-13087089.htm关键词：美味牛肝菌；菌种分离；人工促繁；菌根合成：S646文献标识码：A：1009-8631（2011）09-0010-02牛肝菌是担子菌亚门（Basidiomycotina）、层菌纲（Hymenomycete）、牛肝菌科（Boletaceae）的一类珍稀的大型食用真菌。重庆武陵山区的牛肝菌主要以美味牛肝菌（又称大脚菌）为主，其营养丰富，是一种世界范围内分布的食、药兼用经济价值较高的真菌。在重庆武陵山区彭水、黔江、石柱、武隆、酉阳等区域和江津等地均有分布，其中以“彭水大脚菌”最为有名。主产于彭水普子、善感、诸佛、双龙、鹿角、梅子、鞍子、岩东、黄家、龙塘、大垭、平安、龙射、鹿鸣、棣棠、太原、长滩等乡镇。1研究现状近年来，野生牛肝菌资源逐渐减少，市场需求量增加，牛肝菌成为市场的热点，牛肝菌仍是野生采集。国内外有不少关于牛肝菌的报道，主要是资源、生理生态、深层发酵等方面的研究，也有关于菌根合成的研究。但是，牛肝菌所依存的生态环境复杂，牛肝菌的菌根合成难度较高。李泰辉，宋斌[1]对国内可食用牛肝菌的种类及其分布情况作了专门的介绍，并排除了少数同物异名的种类。阚国仕，矫丽曼等[2]对美味牛肝菌胞外多糖体外抗氧化作用作了一定的研究，结果表明，胞外多糖具有一定的还原能力。邓百万、陈文强[3]发现了美味牛肝菌母种最适培养基。葡萄糖20g、酵母粉7.0g、黄豆粉3.0g、KH2PO41.0g、MgSO4?H2O0.5g、MgSO4?7H2O0.5g、琼脂20.0g、水1000ml。付绍春[4]等在改进菌根合成技术的基础上，成功获得了美味牛肝菌与马尾松幼苗的外生菌根。张小龙等[5]用7种不同的外生菌根菌剂对其幼苗进行土壤根际处理，并对白皮松幼苗菌根菌的感染能力以及促进效果进行了分析研究。云南楚雄州林业局[6]对楚雄州境内的大型真菌进行了较详细的归类，并在松茸、块菌、美味牛肝菌等野生菌的保育促繁方面进行了较多的研究。重庆市林业科学研究院在牛肝菌菌丝分离培养、人工促繁和菌根合成等方面作了一定的研究。技术流程如下：2.1子实体鉴定牛肝菌子实体用ITS[7]进行鉴定。黄牛肝，菌褶颜色为黄色；白牛肝，菌褶颜色为白色，两种牛肝菌均采摘于彭水县郎溪乡野生菌保护基地。图1、图2为子实体图片。两种牛肝菌鉴定结果为：黄牛肝，学名为皱盖疣柄牛肝菌（Leccinumrugosicepes（Peck）Sing.），又称虎皮牛肝。白牛肝，学名为美味牛肝菌（BoletusedulisBull.:Fr.），又称大脚菌。2.2组织分离、培养子实体经过鉴定后，分别选取两种新鲜、健壮的牛肝菌子实体，采用组织分离法，无菌操作，及时进行分离。子实体表面用75％酒精进行消毒，然后切取菌柄与菌盖交界处大小为0.2cm×0.2cm～0.4cm×0.4cm的组织块接入培养基中，分别做好标记，并注明日期，放入恒温恒湿培养箱中进行培养。尽可能将组织块接入较多的斜面培养基。培养条件为25℃，相对湿度70％，无光照。4～5天后检查培养基斜面是否有污染，有污染者及早剔除。菌丝生长旺盛时，挑取少许菌丝转接到新的培养基中，标记后，放入恒温恒湿培养箱中进行培养。整个转接过程在无菌的环境下进行，每隔2天检查，剔除污染严重的培养基。2.3---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---液体培养配制液体培养基，pH值为5.0左右，100ml三角瓶装液量50ml，灭菌，冷却。挑取少许菌丝接入液体培养基中，注明菌种名称、日期、编号，操作的整个过程在超净工作台内进行。放入恒温震荡箱中培养，培养条件为27℃，震荡速度150r/min。2.4菌种保藏挑取菌丝球进行鉴定，确定其为美味牛肝菌，将其进行保藏。具体方法：信封...