五龙颗粒对变态反应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素mRNA表达的影响【摘要】目的通过五龙颗粒对脾虚型变态反应性鼻炎(AR)大鼠白细胞介素-2、4、6mRNA表达影响的研究,为健脾益气固表的五龙颗粒治疗AR提供理论依据。方法采用病证结合的方法造模,用RT-PCR法检测鼻黏膜白细胞介素mRNA的表达。结果五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜处白细胞介素-2、4、6mRNA的表达具有调节作用,升高的白细胞介素-4、6下降,降低的白细胞介素-2恢复。结论五龙颗粒可能通过调节细胞因子白细胞介素-2、4、6mRNA的表达,对实验性AR大鼠发挥治疗作用。【关键词】五龙颗粒；变应性鼻炎；白细胞介素-2mRNA；白细胞介素-4mRNA；白细胞介素-6mRNAAbstract：ObjectiveTostudytheeffectofWulonggranulesontheexpressionofIL-2mRNA,IL-4mRNAandIL-6mRNAinallergicrhinitis(AR)ratsinSpleenQideficiencytype.Toestablishtheclinictreatmentprinciple-tonifySpleenandreinforceQiofARthroughthelabstudy.MethodsEstablishedARmodelwithcombinationofdiseaseandZheng,checkedtheexpressionofIL-2mRNA,IL-4mRNAandIL-6mRNAofnasalmucosaweredetectedwithRT-PCR.ResultsWulonggranulescanadjusttheexpressionofmRNAofARrats'nasalmucosa.ItcandescendtheascensusofIL-4mRNA,IL-6mRNAandthedropofIL-2mRNA.ConclusionWulonggranulescanshowtreatmenteffecttoARratsthroughadjustingtheexpressionofcellfactorssuchasIL-2mRNA,IL-4mRNAandIL-6mRNA.Keywords：Wulong-granules；allergicrhinitis；IL-2mRNA；IL-4mRNA；IL-6mRNA变态反应性鼻炎(AR)常与哮喘、荨麻疹等变态反应性疾病并存,其属于Ⅰ型变态反应。中医多认为内因为脏腑功能失调,脏腑虚损,正气不足,腠理疏松,卫表不固；外因多为风寒、异气之邪侵袭鼻窍而致,寒邪束于皮毛,阳气无从泄越,故喷而上出为嚏。本实验从脾虚型AR入手,采用RT-PCR方法,从基因水平上研究五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜白细胞介素-2、4、6(IL-2、IL-4、IL-6)mRNA表达的影响,探讨五龙颗粒对脾虚型AR的影响及对该型AR的治疗机制。1实验材料1.1动物---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---SD大鼠42只,3月龄,体重180～220g,雌雄各半,四川省医学科学院实验动物研究所提供,合格证号0012110。饲养于成都中医药大学微生物与免疫实验中心,室内温度控制在20～25℃。1.2药物及试剂五龙颗粒,华神集团提供,药液原药材含量2.5g/mL。息斯敏,西安杨森生产,用药前研磨成粉,用生理盐水配成0.03%的混悬液。卵白蛋白：美国Sigma公司生产,洛阳华美生物工程公司分装。TaKaRaRNAPCRKit(AMV)Ver.3.0试剂,宝生物工程(大连)有限公司生产。PCR引物,宝生物工程(大连)有限公司合成。2实验方法2.1分组及造模SD大鼠自由喂养1周后,将大鼠按体重、性别随机分为7组,每组6只。即空白组、脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组、AR模型组、AR中药组、AR西药组。脾气虚模型：用饮食不节加游泳疲劳过度综合因素伤脾方法[1]。饮食不节：病证结合的脾虚AR模型组、脾虚AR中药组、脾虚AR西药组动物喂饲甘兰每只10～15g/d,自由饮水；双日猪脂2mL/只灌胃,自由进食、饮水,共8d。过劳伤气：以上各组动物在上述处理的当日放入20℃水池中游泳至疲劳过度(以经驱赶无力游泳或欲溺水为指征),1次/d,共8d。AR模型：按照安氏[2]报道的方法造模,实验组动物以卵白蛋白0.30mg作抗原,氢氧化铝粉末30mg作佐剂,加生理盐水1mL形成混悬液,腹腔内注射,隔日1次,共7次。腹腔注射免疫完成后,在治疗的同时,每日给药1h后再予以5%卵白蛋白溶液半量激发,即5%卵白蛋白溶液10μL,每侧5μL滴入大鼠双侧前鼻孔；模型组只激发不给药。空白组以生理盐水代替卵白蛋白,其余方法和步骤不变。2.2给药造模结束后,即22d后开始给药,给药时间为7d。每日以成人临床剂量8倍的五龙颗粒(中药组)及息斯敏混悬液(西药组)灌胃,1次/d。空白组、AR模型组、脾虚模型AR组：正常喂养,不给药物。2.3观察指标及检测方法2.3.1鼻黏膜IL-2mRNA表达的RT-PCR检测实验结束后,在超净工作台上取鼻黏膜用逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreactio...