同型半胱氨酸对乳腺癌患者外周血单核细胞组织因子表达的影响作者：王宁菊，陈耀平，杨宝珍【摘要】目的探讨Hcy是否诱导乳腺癌患者外周血单核细胞(Monocyte，Mn)表达组织因子(TF)。方法用不同浓度Hcy［12.5μmol/L(Ⅱ组)、25μmol/L(III组)、100μmol/L(Ⅳ组)、50μmol/L(V组)］对乳腺癌患者外周血Mn进行短期培养后，粉碎细胞，ELISA方法检测其TF表达。结果随着Hcy浓度的增加，TF在乳腺癌患者外周血单核细胞的表达水平逐步增高，并呈剂量依赖性。其中Ⅰ组与III、Ⅳ、V组比较差异有统计学意义(P均＜0.01)；Ⅱ组与Ⅳ、V组间比较，III组与Ⅳ组、III组与V组间比较差异均有统计学意义；Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅱ组与III组、Ⅳ组与V组间比较差异无统计学意义。结论Hcy通过诱导乳腺癌患者外周血Mn表达TF，从而在乳腺癌的侵袭和转移中发挥一定的作用。【关键词】同型半胱氨酸；单核细胞；组织因子；乳腺癌Abstract：ObjectiveToexploretheeffectsofhomocysteineonexpressionoftissuefactor(TF)inperipheralmonocyteincaseswithbreastcarcinoma.MethodsTTheperipheralmonocytewereincubatedwiththeculturingliquidofdifferentHcyconcentrationsforshorttime，andthensmashed.ThelevelsofTFwasdetectedusingELISAmethod.ResultsAsincubatedwithHcy，monocyticcellscanbeinducedtoexpressTF，whichisupregulatedindose-dependentpattern.Amongthegroups，thereisstatisticaldifferencebetweengroupⅠandgroupIII,groupⅠandgroupⅣ,groupⅠandgroupV,groupⅡandgroupⅣ,groupⅡandgroupV,groupIIIandgroupV.ConclusionHcyinduceMonocyticcellstoexpressTFandplayaroreintheinvasionandmetastasisofthebreastcarcinoma.Keywords：homocysteine；monocytecell；tissuefactor；breastcarcinoma乳腺癌的侵袭和转移是一个多步骤、多因素参与的、非常复杂的过程。既往多认为，巨噬细胞是抗肿瘤免疫调节过程中的一种重要细胞群，可以直接杀伤肿瘤细胞，或者通过呈递肿瘤相关抗原诱导机体免疫应答从而清除肿瘤。但是近年来逐渐认识到，肿瘤间质中的巨噬细胞并非发挥抗肿瘤作用，而是参与了肿瘤发生、生长、侵袭和转移的过程［1-2］。近年研究显示［3-5］，组织因子(tissuefactor，TF)的高表达参与肿瘤新生血管的形成，促进恶性肿瘤的侵袭和转移。相关资料也显示，同型半胱氨酸(homocysten，Hcy)在乳腺癌等多种恶---本文于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---性肿瘤患者血浆中的水平显著升高［6-7］，但是，关于Hcy与乳腺癌侵袭和转移直接关系的研究，以及Hcy、单核细胞(Monocyte，Mn)、TF之间关系的研究方面的资料很少。所以，本研究通过对不同浓度的Hcy培养下，人乳腺癌患者外周血Mn、TF表达情况的研究，确定Hcy是否通过刺激Mn表达TF，初步探讨Hcy、Mn、TF之间的关系。从而进一步了解乳腺癌侵袭和转移的病理机制，探寻乳腺癌预防、治疗的新途径。1对象与方法1.1研究对象选取2006年5月—2006年11月收住我院、经组织病理学确诊的女性乳腺癌初治患者20例，年龄30～73岁，平均46.7岁，排除高血压、肾病、糖尿病及心、脑血管等疾病。1.2主要试剂Hcy纯品(瑞士Fluka公司生产，由迪马公司提供)，脂多糖(由宁夏医学院药理学教研室提供)，淋巴细胞分离液(上海第二试剂厂生产)，细胞上清TF、ELISA试剂盒(美国BPB公司生产，由泛邦公司提供)，RPMI(GIBCOBRL公司生产)，胎牛血清(中国医学科学院血液研究所生产)。1.3方法1.3.1标本采集和单个核细胞分离及培养单个核细胞(MNC)包括淋巴细胞和Mn，但淋巴细胞并不表达TF，因此本研究主要采用MNC来研究Mn的TF表达。晨间采空腹静脉血5mL，放入含0.109mol/L枸橼酸钠抗凝管中，混匀。MNC的分离采用密度梯度法：枸橼酸钠抗凝血经Hank's液稀释加入装有淋巴细胞分离液的试管中，离心、洗涤后，调整MNC浓度为(1～10)×106个/mL，用RPMI1640培养液培养4h，培养后-70℃保存。瑞氏染色法确定MNC中Mn含量为33.7%，台盼蓝染液染色测细胞存活率＞95%。采用不同浓度［12.5μmol/L(Ⅱ组)、25μmol/L(III组)、100μmol/L(Ⅳ组)、50μmol/L(V组)］Hcy的RPMI1640完...