OK—432肿瘤疫苗对小鼠肝癌细胞Hca-F抑制作用的研究［摘要］目的研究探讨0K-432肿瘤疫苗对小鼠淋巴高转移肝癌细胞Hca-F的抑制作用。方法对DBA/2小鼠背部接种高转移肝癌细胞Hca-F,建立肿瘤转移模型，设对照组和0K-432肿瘤疫苗组，3周后测量肿瘤大小，并绘制肿瘤生长曲线，检测各组抑瘤率、淋巴结转移抑制率，淋巴结石蜡切片HE染色观察两组淋巴细胞数。结果0K-432肿瘤疫苗具有明显的抑瘤作用，抑瘤率达68.4%；淋巴结转移抑制率为31.6%;通过比较对照组和给药组淋巴结的HE染色，发现给药组淋巴结内淋巴细胞明显多于对照组。结论0K-432肿瘤疫苗能够有效抑制肿瘤生长，促进机体免疫应答，抑制肿瘤的淋巴结转移。［关键词］0K-432肿瘤疫苗；淋巴结转移；抑瘤率分类号］R739.86［文献标识码］A［文章编号］1673-9701(2015)01-0001-03Researchoninhibitoryeffectof0K-432tumorvaccineonmice'livercancercellsHca-FQIAOShaZHAOBinDepartmentofStomatology，ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectofOK-432tumorvaccineonmice’highlylymph-metastaticlivercancercellsHca~F.MethodsHighlymetastaticlivercancercellsHca_FwereplantedinthebackofDBA/2miceandthetumormetastasismodelwasbuilt.ThecontrolgroupandtheOK-432tumorvaccinegroupweresetup,with20miceineachgroup.Threeweekslater，thetumorsizewasmeasured,thetumorgrowthcurvewasdrawn,thetumorinhibitionratesandlymphnodemetastasisinhibitionratesweredetected,andthenumbersoflymphocyteofthetwogroupswereobservedbasedonlymphglandparaffinsectionHEstaining.ResultsOK-432tumorvaccinehadobvioustumorinhibitioneffects，withthetumorinhibitionrateof68.4%；Thelymphnodemetastasisinhibitionratewas31.6%;ComparisonofHEstainingofthecontrolgroupandthemedicationlymphnodegroupshowedthatthenumberoflymphocyteinlymphnodeofthemedicationgroupwassignificantlylargerthanthatofthecontrolgroup.ConclusionOK-432tumorvaccinecaneffectivelyinhibittumorgrowth,promotebodyimmuneresponseandinhibitlymphnodemetastasisoftumor.［Keywords］OK-432tumorvaccine；Lymphnodemetastasis；Tumorinhibitionrate近年来，肿瘤的发病率逐年增高且越来越年轻化，对患者的生命和健康造成严重的影响。目前全世界都在对肿瘤的预防和治疗进行研究。随着肿瘤药理学、分子生物学及免疫学等相关学科的快速发展和交叉渗透，肿瘤疫苗作为肿瘤治疗、放疗、化疗后的一种辅助治疗手段越来越受到人们的关注，本研究所用肿瘤疫苗为0K-432肿瘤疫苗［1］。0K-432肿瘤疫苗是通过菌体与癌细胞的直接接触，使肿瘤细胞变性并暴露瘤细胞“隐藏”着的某些抗原决定簇，从而迗到增强肿瘤抗原性的目的。研究表明，0K-432肿瘤疫苗可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长及转移［2］，并延长其生存期。本研究将背部接种了高转移肝癌细胞Hca-F的DBA/2小鼠随机分为两组，分别给予腹腔注射0K-432肿瘤疫苗和生理盐水，观察0K-432肿瘤疫苗对肿瘤的抑制作用。1材料与方法1.1实验动物雌性DBA/2小鼠40只，5〜6周，体重16〜20g，购自北京维通利华实验技术有限公司。在SPF条件下喂养，实验前至少适应1周。1.2肿瘤细胞及培养方法高转移肝癌细胞Hca-F购自于上海爱丁堡生物科技有限公司。KLN-205肿瘤细胞在37°C，5%C02恒温箱传代培养，每次使用的培养液按照45mL的RPMI-1640培养液加入5mL胎牛血清，0.5mL的双抗的比例配制。选取培养4代以上活力旺盛的肿瘤细胞作为靶细胞。1.3药物与试剂0K-432为溶血链球菌减毒株冻干制剂，由中外制药株式会社（日本）提供。青链霉素购自Solarbio公司；胰蛋白酶（含EDTA），无菌PBS,D-Hanks缓冲液；无支原体胎牛血清为浙江天杭生物科技有限公司出品。1.4荷瘤小鼠的制备、分组及给药方法疫苗的制备按LiX等［1］的方法制备而成。将Hca-F肿瘤细胞在37°C，5%C02恒温箱传代培养，每次使用的培养液按照45mL的RPMI-1640培养液加入5mL胎牛血清，0.5mL的双抗的比例配制。选取培养4代以上活力旺...