凝集素点印迹法分析胆汁糖蛋白糖链结构诊断胆管癌178实用痛症杂志2001年3月笫16鞋笫2期ThE101.V0I16No2凝集素点印迹法分析胆汁糖蛋白糖链结构诊断胆管癌金晓凌王炳生陈惠黎童赛雄【摘要】目的研究胆管癌胆汁中的肿瘤相关糖蛋口N连接型糖链结构及其诊断价值•方法将引例胆管癌胆汁和13例良性胆道疾病胆汁直接点在硝酸纤维膜(c)上,釆用辣根过氧化物酶(HRP)标记肿刀豆凝集素(ConA),欧曼陀罗凝集素(DSA),麦胚凝集素(WGA),小扁豆凝集素(LCA)进行点印迹分析•结果胆管癌组和良性组conA,DSA,LCA和WGA阳性率(阳性例数/总例数)分别为80.6%(25/31)和76.9%(10/13),74.2%(23/31)和0(0/13),70.0%(22/31)和154%(2/13),806%(25/31)和231%(3/13),胆管癌组DSA,LCA和WGA阳性率高于良性组(P<005).结论胆管癌胆汁糖蛋白复杂型糖链增多，其核心岩藻糖和唾液酸含量丰富，可能出现偏二天线以及天线数的增加.胆汁糖蛋白的凝集素印迹分析法为胆管癌的诊断提供了新的有效方法.【关键词】胆管肿瘤;凝集素;糖蛋白;诊断中图分类号:R7358文献标识码:A文章编号:1001—5930(2001)02—0178—03TheDiagnosisofBileDuctCarcinomabyAnalysisofSugarChainofGlycoproteininBilewithLectinDot.blottingHNXiao—ling.WANGBing—sheng,CHENHui-li.etalDepartmentofGeneralSurgery.ZhongshanHospitalA}tiatedt.MedicalCenterFudanUniwersity,Shanghai,200032【Abstract】ObjectiveTostudytheN一linkedoligosaccharidesoftumor一relatedglycoproteininbileanditsdiagnosticvalue[orbileductcarcinomaMethodsThebilesamplesfrom31Case8ofcholangioeardnomasand13casooofbenignb[1iarydiseasesweredroppedontonitrocellulosemembranerespectively.followedbylecfindot一blottingwithhorseradk〜hpcroxidase—labeled]eetin,s,includingConA(coneanavaliaenslfomisagglutinin),DSA(datumstramonlumagglutinin),WGA(ttiticumvalgarisagglutinin)andLCA(lenseuhnarisagglutinin)ResultsThepositiveratesofcOnA,DSA,LCAandWGAincholangiocarcinomagroupandbenigngmupwere80.6%(25/31)vs76.9%(l0/13),74・2%(23/3J)0(0/l3),700%(22/31)VS15・4%(2/13),806%(25/31)VS23.1%(3/l3),respectively.ThepositiveratesofDSA,LCAandWGAinmalignantgroupwerehigherthaninbemignoile(P<0.05)ConclusionComplex一typeasparagine(Asn)一linkedoligosaccha6desarefoundinbileglyeoproteinofbileductcarcinoma,withnotablyincreaseds[alylationandcore一fuCONe,maybeaberrantbi一ant〜naryN—g[ycanandincreasementoftheannoulltofanten一naryLectindot一blottingofbileglycoproteinmaybeaneffectivemethodforthediagnosisofcholangiceaycinoma【KeywOrds】Bilediictneop[asmlLectin;G[ycopmtein;Diagnosis(ThePracticalJournalofCanr,2001,16:178〜180)对胆管癌相对敏感及特异的标志物有CEA,cA19,CA242,CA50・这些肿瘤标志物均通过肿瘤或细胞系免疫得来的单克隆抗体而识别•它们所识别的特异位点位于糖蛋白的糖链,而非蛋白结构•…对蛋口质糖链结构的测定已经成为临床实验室诊断疾病，尤其是诊断肿瘤的1个新的方向，它克服了传统的以蛋白质的量变来判断疾病吋特异性不高的缺点，并可在蛋白质''量”无明显改变的情况下，根据其糖链部分变化产主的”质”变来提供诊断疾病的更灵敏，特异的指标•凝集M(lectin)是1类糖结合蛋白，能专〜地本课题获卫生部科学基金资ffJ(No:98」153)作者单位:200(132复旦大学医学院附属中山医院普外科(金晓凌王炳生，童赛雄)，复旦大学基础医学院生化教研室(陈惠黎)识别某一特定结构的单糖或寡糖中特定的糖基序列而与之结合［，它们是检测肿瘤相关糖蛋白或糖脂中改变了的糖结构的有力工具,利用这个工具，我们建立了1种用凝集素分析胆汁糖蛋白的糖链结构，从而诊断胆管癌的简单，灵敏的方法，现报告如下.1材料与方法11标本及处理①恶性组:31例，全部为胆管癌患者，其中男性20例，女性11例，年龄38-76岁，平均年龄56岁•其中肝门胆管癌21例，中段胆管癌6例，下段胆管癌4例.②良性组:13例，包括肝内胆管结石8例，肝外胆管狭窄3...