基因芯片技术分析骨髓间充质干细胞神经分化中Wnt信号通路的激活林治平，曾荣，林颍(广东医学院附属医院骨科，广东省湛江市524001)引用本文：林治平,曽荣,林飙基因芯片技术分析骨餉间充质干细胞神经分化中Wnt信号通路的激活1、几中国组织工程研究,2016,20(10):1389-1395.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2016.10.003ORCID:0000-0003-3235-050X(林治平)文章快速阅读：人骨髄间充质干细胞向神经元样细胞分化过程中Wnt信号通路的激活文题释义：Wnt信号通路：是细胞个体传递信息、细胞生长发育、凋亡的信号通路，对胚胎和体轴发育特别是神经系统的发育起到重要作用。该信号通路可分为4支，其中最经典的研究的比较清楚的WnVP-catenin信号通路，这是一条在生物进化中极为保守的通路。基因芯片技术：同时将大量的探针分子固定到固相支持物上，借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读利分析。该技术在疾病易感基因发现、疾病分子水平诊断、基因功能确认、多靶位同步超高通讯:药物筛选以及病原体检测等医学与生物学领域得到广泛应用。其原理是采用光导原位合成或显微印刷等方法将大暈特定序列的探针分子密集、冇序地固定于经过相应处理的硅片、玻片、硝酸纤维素膜等载体上，然后加入标记的待测样品，进行多元杂交，通过杂交信号的强弱及分布分析目的分子的冇无、数量及序列，从而获得受检样品的遗传信息。摘要背景：通过对骨髄间充质干细胞诱导向神经元样分化的Wnt信号调控机制进行研究，为骨髄间充质干细胞在脊懺损伤及纽织工程中的应用打下基础。目的：应用基因芯片技术测试人骨髄间充质干细胞向神经元样细胞分化过程中相关基因的表达变化。方法：分离和纯化人骨懺间充质干细胞，选取第5代细胞，基J-Gateway™载体构建技术构建慢病毒载体，将Wnt-1转导至人骨髄间充质干细胞。设置3个实验组，分别为对照组、未转导组以及转导组,诱导人骨髓间充质干细胞神经分化，扫描电镜下观察细胞形态，应用基因芯片检测Wnt信号通路基因的调控变化及差异表达。结果与结论：①扫描电镜下发现：转导Wnt-1并诱导分化的细胞具冇神经元样细胞的形态。②基因芯片杂交技术检测发现：3287个基因上调，4215个基因下调，与神经系统发冇和分化相关基因有上调和下调的变化。③从中挑选了相关基因验证，表明转导WnU后细胞内Wnt通路激活，下游基因转录,促进人骨髓间充质干细胞的神经分化。关键词：干细胞:骨髓干细胞:骨髓间充质干细胞;转导:神经分化;电镜;Wnt信号通路;基因芯片林治平，男，1981年生，广东省茂至市人，汉族，在读博士，主治医师，主要从爭干细胞、软骨细胞、生物转化及生物力学方向的研究.中图分类号:R394.2文献标识码:A文章编号：20954344(2016)10-01389-07稿件接受：2016-01-17http://WWW.crter.orgLinZhi-ping,Studyingfordoctorate,Attendingphysician,DepartmentofOrthopaedics,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProvinee,China主题词：肯髓;间质干细胞:细胞分化;神经元；芯片分析技术;组织工程基金资助：湛江市科技汁划项忖基金(2013B01095),课题名称:骨髓间充质T细胞转导Wnt・1基因向神经细胞分化前后基因表达的对比研究;广东医学院青年基金(XQ1334),课题名称:Wnt信号通路对骨髄间充质干细胞增殖调控的研究ActivationofWntsignalingpathwayintheneuronaldifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcells:amicroarrayanalysisLinZhi-ping,ZengRong,LinHao(DepartmentofOrthopaedics,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang524001,GuangdongProvince,China)AbstractBACKGROUND:ItwillprovideanewinsightintothefutureapplicationofbonemarrowmesenchymalstemcellsinthetreatmentofspinalcordinjuryandtissueengineeringbystudyingtheeffectofactivationofWntsignalingpathwayintheneuronaldifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcells.OBJECTIVE:Todetecttheexpressionofrelatedgenesbygenechiptechnologyduringtheneuronaldifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcells・METHODS:Humanbonemarrowmesenchymalst...