野黄刺玫果粗总黄酮的提取工艺研究史萌史志辉(陕西辉胜新兴农业科技发展有限公司712000)【摘要】目的：探讨野黄刺玫果粗总黄酮最佳提取工艺。方法：以野黄刺玫果为原料，以总黄酮含量和提取率为评价指标，乙醇浓度，料液比，提取时间为考察因素，进行三因素三水平L9(34)正交试验、方差分析和验证实验。在上述优选出最佳提取条件不变的情况下，乂对提取次数进行了优选。结果：野黄刺玫果粗总黄酮的最佳提取工艺条件为：用12倍量75%乙醇，加热回流提取三次，每次2ho【关键词】野黄刺玫果总黄酮正交试验方差分析【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2014)15-0031-02野黄刺玫果为蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)植物野黄刺玫(RosaxanthinaLindl)的干燥成熟果实。9月份果实成熟时采收，除去杂质，干燥。木品为野生落叶灌木，广泛分布于我国北方的山区和丘陵地带⑴［2］。野黄刺玫的花、果、叶和根皮均可入药，味酸甘性平，具有健脾养血，理气活血之功效，用于消化不良，腹痛胀气、胃痛、气滞血瘀的胸痹，对冠心病心绞痛及高脂血症有奇效，并能治疗妇女月经不调［3］。民间广泛有食用野黄刺玫果和用其酿酒的习惯。现代研究表明，野黄刺玫果中含有丰富的黄酮。皂昔、植物SOD,多种维生素及大量有益的微量元素。野黄刺玫果具有抗氧化作用［4］,抗衰老和预防心血管病的作用及降压降脂作用⑸［6］。毒理学实验研究表明，野黄刺玫果属于无毒级，可安全使用的药食两用资源［7］。由于总黄酮为野刺玫果的降压，降脂及治疗冠心病心绞痛的有效成份，木实验研究黄刺玫果粗总黄酮提取的最佳工艺条件，用紫外一可见分光光度法测定野黄刺玫果总黄酮的含量，为野黄玫果最佳粗总黄酮提取工艺的筛选提供了理论根据。1、材料与检测方法1.1材料与试剂野黄刺玫果采自陕西旬邑县石门山区，9月份果实成熟时采摘，除去杂质,干燥。芦丁对照品由中国食品药品检定研究院提供，供含量测定用，试剂皆为分析纯。1.2仪器与设备UV?765型紫外一可见分光光度计上海精密科学仪器有限公司；BS210S型电子天平，北京赛多利斯天平有限公司；RE-52A型旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；III型高速中药粉碎机，浙江省瑞安永西制药机械有限公司。1.3野黄刺玫果总黄酮的测定1.3.1对照品溶液的制备取芦丁对照品50吨,精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml,置：LOOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，既得(每:Lml中含芦丁0.2陀)。1.3.2标准曲线的制备精密量取对照品溶液lmK2mk3ml>4ml、5ml与6mk分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml,加5%亚硝酸钠溶液lml,混匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液lml,摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液:LOml,再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，照紫外一可见分光度法(中国药典2010年版一部附录VA),在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵座标，浓度为横座标，绘制标准曲线。1.3.3测定法取野黃刺玫果提取物干燥细粉约辽，精密称定，置索氏提取器中，加乙脳适量，加热冋流至提取液无色，放冷，弃去乙醸液。再加甲醇90ml,加热冋流至提取液无色，转移至100ml量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取50ml,置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取5ml,置25ml量瓶中。照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读岀供试品溶液中含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计的重量(?g),计算,即得。2、野黄刺玫果加热冋流提取工艺的考察2.1加热冋流提取正交试验固定加热冋流提取三次的条件下，以乙醇浓度，每次加乙醇量为所提野黄刺玫果粗粉的倍数及提取吋间为考察因素，进行三因素三水平L9(34)正交试验，以总黄酮百分含量和提取率(％)为评价指标(以下皆同)，筛选最佳冋流提取条件。总黄酮百分含量和提取率的权重系数分别为0.5、0.5,并以综合评分作为提取效果的衡量指标。试验结果见表1、表2。表1因素水平表注：加热冋流提取两个评价指标，采用综合评分法进行数据分析，总黄酮含量和提取率的权重系数分别为0.5、0.5。总黄酮含量评分二总黄酮含量/最大总黄酮含量&times...