N-取代苯基-5-三氟甲基-4-吡唑酰胺类化合物的合成及抗植物真菌生物活性研究吴志兵牛雪杨晶欣谢德文张承志摘要：吡唑酰胺类化合物是一类具有独特作用机制的化合物，为了发现更高活性的吡唑酰胺类化合物，设计并合成了9个结构新颖的N-取代苯基-5-三氟甲基-4-吡唑酰胺类化合物。采用生长速率法，测试了化合物对5种植物病原真菌：小麦赤霉病菌（Fusariumgraminearum）、辣椒枯萎病菌（Fusariumoxysporum）、茄子黄萎病菌（Verticilliumdahliae）、水稻纹枯病菌（Thanatephoruscucumeris）和油菜菌核病菌（Sclerotiniasclerotiorum）的抑制活性。初步生物活性表明：在100μg/mL浓度下，部分目标化合物对测试真菌有一定的抑制作用，其中化合物5d对茄子黄萎病菌和水稻纹枯病菌的抑制率分别为51.5%和65.8%，为进一步结构优化提供参考。关键词：吡唑酰胺;合成;抗真菌活性：TQ450.21文献标志码：A自2009年国际真菌剂抗性行动委员会（fungicideresistanceactioncommittee，FRAC）首次将具有抑制琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase，SDH）的酰胺类化合物命名为琥珀酸脱氢酶抑制剂（succinatedehydrogenaseinhibitors，SDHIs）以来，已有23个商品化的杀菌剂面市[1-3]。随着越来越多的商品化的杀菌剂应用到实际生产中，该类化合物的抗性问题也日渐凸显出来[4-6]。而如何在原有的结构基础上，设计出结构新颖且无交互抗性的化合物也成为了当前科研人员所面临的挑战。通过对商品化的琥珀酸脱氢酶抑制剂的结构分析发现，有10个是吡唑酰胺类化合物。所有吡唑酰胺类化合物中，吡唑环的“1-位”的取代基均为“甲基”，而在吡唑环的“3-位”具有“CHF2”或“CF3”取代基的有6个;在“3-位”和“5-位”同时具有2个取代基的有4个;但是没有一个吡唑酰胺类化合物是仅有“5-位”取代的[7-8]。本课题组基于此分析，在前期的工作中设计合成了系列1-取代-5-三氟甲基-4-吡唑酰胺类化合物，生物活性测试结果表明该类化合物表现出良好的抗植物病原真菌活性[8-11]。为了寻找高效、低毒、广谱且作用机理独特新颖的吡唑酰胺类杀菌剂，在课题组前期工作基础上[8]，保留了吡唑环“1-位”和“5-位”的取代基，而将“酰胺”胺部分的“吡啶基”替换为“取代苯基”，设计并合成了9个N-取代苯基-5-三氟甲基-4-吡唑酰胺类化合物，对所有目标化合物进行了抗植物真菌的生物活性测定，期望发现更高活性的吡唑酰胺类化合物，为新农药的创制及衍生工作提供一定的基础依据。1实验部分1.1合成路线目标化合物的合成路线如图1所示。1.2仪器与试剂1HNMR、13CNMR和19FNMR数据由BrukerBiospinAG-400型核磁共振仪（瑞士Bruker公司，TMS为内标，DMSO-d6为溶剂）测定，熔点由X-4型显微熔点测定仪（郑州南北仪器设备有限公司，温度计未校正）测定。所用试剂和溶剂均为市售化学纯或分析纯，使用前经常规处理，其中四氢呋喃经金属钠除水处理。1.3供试真菌和对照药剂植物真菌：小麦赤霉病菌（Fusariumgraminearum）、辣椒枯萎病菌（Fusariumoxysporum）、茄子黄萎病菌（Verticilliumdahliae）、水稻纹枯病菌（Thanatephoruscucumeris）和油菜菌核病菌（Sclerotiniasclerotiorum）购于北京北纳创联生物技术研究院。对照药剂：萎锈灵（98%原药，阿拉丁试剂上海有限公司）。1.4中间体的制备[8，12]1.4.1中间体2的合成在带有冷凝管、温度计的250mL三口瓶中，依次缓慢加入三氟乙酰乙酸乙酯（9.2g，0.05mol），原甲酸三乙酯（23.2g，0.10mol）和醋酸酐（15.3g，0.15mol），加熱至100℃，反应12h，薄层色谱法（thinlayerchromatography，TLC）检测反应结束，降至常温，减压蒸馏出溶剂及过量的原甲酸三乙酯，剩余物未经纯化直接溶于100mL无水乙醇，苯肼（6.0g，0.55mol）缓慢加入反应液中，加热回流5h，TLC检测反应结束，旋转蒸发除去溶剂，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，除去有机溶剂，粗产品经柱层析（乙酸乙酯/石油醚=1/20）分离纯化得中间体2，黄色油状物，收率72%。1HNMR（DMSO-d6）δ：8.31（s，1H，pyrazoleH），7.63～7.54（m，5H，benzeneH），4.32（q，J=7.2Hz，2H，CH2），1.31（t，J=7.2Hz，3H...