1,Miox基因在爪蟾胚胎发育中的时间和空间表达谱分析傅小娟陈雪梅'周铁3,杜晓刚“重庆医科大学第一附属医院肾脏内科，重庆400016更庆医科大学第一附属医院急诊科，更庆400016四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室遗传工程与小鼠中心.成都610000［摘要］目的研究Miox基因在物种退化及爪蟾胚胎发育迫程中的肘间和空间表达的分布特点。方法利用半定星RT-PCR观察Miox在爪蟾胚胎发育过程中的时间表达模式，利用整体原位杂交的方法(WISH)观察Miox基因在爪蟾胚胎发育过程中的空间表达模式。结果RT-PCR结果显示Miox基因在胚胎发育第26朋以前都没有表达，到胚胎发育第28期开始有微堡表达,殖着胚胎的发育表达屋逐渐增高,到胚胎发育第40朋Miox表达明显升高.在第41明表达最高，到胚胎第45朋表达有所下调。与胚胎第28、34朋相比，第40、41、.45朋表达明显上调(Pv0.05);与胚胎第40朋相比，第41期表达明显上调(P<0.05);然而，向胚胎第41期相比，第45期表达又明显下调(Pv0.05)。WISH发现在30朋以前都没能检测到Miox在爪蟾的任何器官有表达，但从33期开始.Miox在爪蟾前肾有很微弱的表达，Miox的表达殖着发育的诳展逐渐增高。WISH结果向RT-PCR结果相类似，直到第39一40期，Miox的表达望才明显升高，并且在随后的时期都以向样高的水平表达。另外我们还发现，Miox基因在爪蟾胚胎发育过程中均仪仅在原肾小管表达。结论Miox是一个肾脏特异性基因，利于研究肾脏发育可能提供一个特异性标记。［关键词］Miox；爪蟾：肾更发育；表达模式1.［］R394.1［文献标识码］AIdentificationtheTemporalandSpatialExpressionPatternsofMioxintheEvolutionofXenopuslaevisEmbnosFUXiao-juan1,CHENXue-mei2,ZHOUQin\DUXiao-gangpDepartmentofNephrology,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity.Chongqing400016.ChinaDepartmentofEmergency,theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016.ChinaCoreFacilityofGeneEngineeredMice.StaleKeyLaboratoryofBiotherapyandCancerCenter,WestChinaHospilaLSichuanUniversity.Chengdu610000.Sichuan,China［Abstract］ObjectiveToidentifylhemolecularevolutionofMioxanditstemporalandspatialexpressionpatternsintheevolutionofXenopuslaevisembryos.MethodsThetemporalandspatialexpressionpatternswereanalyzedbysemi-quantitativereverse-transcriptionalPCR(RT-PCR)andwhole-mountinsituhybridization,respectively.ResultsWeinvestigatedthetemporalexpressionpatternofMioxduringembryogenesisofXenopuslaevisbyRT-PCRandfoundthathardlyanyexpressionwasdetectedbeforestage26.Mioxfirstlyexpressedatstage28withaverysmallamount.Ilsexpressionlevelgraduallyincreasedalongwiththedevelopmentoftheprocessandreaceditspeakatstage40and［基金项目］国家自然科学基金(81202318,81370816),国家重点基础研究发展计划(“973”计划,2011CB944002),重庆自然科学基金(cstc2012jjA10136).SupportedbyNationalNaturalScienceFoundationofChina(81202318.81370816).NationalKeyBasicResearchProgramofChina(“973”Project,201lCB944002),NaturalScienceFoundationofCQCSTC(No.cstc2012jjA10136).［作者简介］傅小娟，硕士生.E-mail:fxjsen20100216@sina*通信作者(Correspondingauthor).Tel:023-8901231Q,E・mail:dxgcxm@163keptahighstablelevelinlaterperiodparedwithstage28,34.theexpressionofstage40.41.45wereupregulatedsignificantly(P<0.05)paredwithstage4O.theexpressionofstage41wasupregulatedmarkedly(P<0.05).Butcomparedwithstage4Llheexpresssionofstage45wasdo\vnregulated(P<0.05).Theresultsofwhole-mountinsituhybridizationshowedthatMioxstartedexpressatstage33andtheexpressiontrendwasconsistentwithRT-PCR.WealsotbundthatMioxonlyexpressedinthepronephrostubulesinthewholeprocssofembryodevelopment.ConclusionMioxwastissue-specificinXenopuslaevispronephrosdevelopment,whichmaypro...