染色体病快速产前诊断技术的研宄进/PC大庆医学高等专科学校163453【摘要】染色体病是由于染色体数目或结构畸变而引起的疾病，目前尚无有效的治疗方法。产前诊断是防止染色体病患儿出生的有效方法。为了快速、准确的诊断染色体病，一系列的分子细胞遗传学技术如荧光原位杂交（FISH）、定量荧光聚合酶链式反应（QF-PCR）,多重连接依赖探针扩增（MLPA）、微阵列比较基因组杂交（aCGH）等被广泛应用于产前诊断。木文主要对这些技术在染色体病快速产前诊断中的研究进展做一综述。【关键词】染色体病；快速产前诊断；研究进展【中图分类号】R714.5【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）12-189-02产前诊断乂称宫内诊断，是指在遗传咨询、诊断基础上，对高风险和严重危害性的胚胎或胎儿，在出牛.前对可识别的遗传性疾病进行检测，最大限度减少遗传病的出现，做出准确诊断［1］。产前诊断的范畴包括染色体病、单基因病、多基因病以及各种环境致畸因子所致的先天畸形。其中染色体病是由于染色体异常所引起的一类遗传性疾病，在新生儿中发病率约占0.5%。传统的产前诊断方法是对羊膜腔穿刺获得羊水细胞或是绒毛抽吸获得的绒毛细胞进行培养，对染色体有丝分裂期的核分裂相进行核型分析，从而准确地诊断各种染色体数目和结构异常。但是常规的染色体核型分析方法存在细胞培养时间长、易受培养条件限制、技术难度大等局限性。随着分子细胞遗传学技术的迅速发展，更快速、高效的分子产前诊断技术正在逐渐应用于临床。木文就目前临床应用最广泛的荧光原位杂交（FISH）、定量荧光PCR技术（QF-PCR）、多重连接依赖探针扩增技术（MLPA）、微阵列比较基因组杂交（aCGH）等技术的研究进展做一综述。1焚光原位杂交技术（fluorescenceinsituhybridization,FISH）FISH技术是细胞遗传学、分子生物学及免疫学相结合的基础上发展起来的一种新技术。1992年Klinger等［1］首次研宄报道使用FISH技术对未培养的羊水间期细胞进行了染色体非整倍性异常检测，将产前诊断吋间缩短到24〜28h。FISH技术的基本原理是采用特殊荧光标记的DNA序列探针与样本DNA杂交后，在荧光显微镜下观察荧光杂交信号来检测样本的数目和结构异常。FISH技术与传统的核型分析方法相比，被检测的样本并不局限于羊水细胞和绒毛细胞，还可以是胎儿奋核红细胞或单个卵裂球细胞等［2-5］。检测的样本无需进行细胞培养，间期细胞也可以用于杂交分析，并II具有特异性好，灵敏度高的特点，在获取样本1〜2d后即可出结果，比核型分析所需的10〜14d吋间明显缩短。大量的研究证明，FISH商品化试剂盒用于间期核检测，敏感性和特异性均较高［6】。但FISH技术也有一定的局限性，因受特异性探针的限制，只能检测已知的染色体异常，仅仅能提供奋限的染色体信息，0前该技术在临床主要用于检测13、18、21、X和Y等最常见的染色体数0异常；由于一种探针往往只能检测出一种异常，对同时存在多种异常染色体需采用多个探针进行检测，将增加检测成本；FISH对相互易位等染色体结构异常无法检出，这是由于断裂点的不可预见性很难制备适宜的探针；FISH还存在一定的假阴性率和假阳性率，嵌合体及母体细胞污染等问题也无有效的解决方法［7】。因此，FISH技术不可能完全代替常规染色体核型分析，当FISH结果不确定吋，还需要与经典的核型分析相结合对染色体病进行产前诊断。2.定量焚光聚合酶链式反应(quantitativefluorescentpolymerasechainresction,QF-PCR)QF-PCR是将荧光能量传递技术应用于PCR中，利用荧光引物对染色体上特异的短串联重复序列进行扩增，不同的染色体上STR位点的序列因碱基重复数不同导致扩增片段长短不同，经毛细管电泳即可进行判断。QF-PCR不需要细胞培养，操作相对简便，省吋省力，24h即可出结果，消除了95%夫妇等待核型分析结果所造成的焦虑［8】，并且在产前诊断中具有敏感性、准确性高的优点。通过扩增非多态的Amelogenin基因(AMXY),该位点可在X、丫染色体上扩增出长度不一的特异性片段，可检测胎儿性染色体数目异常(如47,XXY；47,XYY；48,XXXY)［9-10］。QF-PCR产前诊断的成本较低，可同吋检测人批标本，已在很多产前诊断中心常规应用，特别是在...