早期酒精性股骨头缺血坏死MR灌注成像及与VEGF表达的实验研究黄耀华i李锋2黄丽琴1李健萍1冷晓明1匡忠生1(1广州中医药大学第一附属医院广东广州510405；2酒泉市屮医院甘肃酒泉735000)【摘要】R的探讨早期酒精性股骨尖缺血坏死(ANFH)的MR灌注成像和VEGF表达特征。方法32只新西兰家兔，其屮实验组共16只兔,采用灌H法，给予烈性酒(含乙醇45%)lOml(kg.d),对照组给予给予等体积的10%的葡萄糖溶液，在给药后第1、2、3、6月末各处死4只；对照组共16只兔，在1、2、3、6月月末各处死4只，所有动物于处死前行双侧股骨头MR灌注检查，计算血流量(Perfusion),峰值增强值(PEI),峰值增强时间(PTT),平均通过时间(MTT)等指标。动物处死后取双侧股骨尖制作病理切片，行HE染色和VEGF免疫组化染色。结果在给予酒精后早期股骨头内血流量开始下降，随着时间的延长下降更明显；仅在给酒精后3月，股骨头内PEI下降,MTT增加。给予酒精后2月,VEGF在软骨细胞内表达最强，其后表达略有下降，但仍明显高于对照组；给后3月VEGF在成骨细胞内的表达明显增加。MR灌注参数与VEGF在成骨细胞、软骨细胞屮的阳性表达率无显著相关性(P>0.05)。结论MR灌注成像能够反映股骨头微循环变化,酒精性ANFH时不同类型的细胞VEGF表达情况不同，且与MR灌注成像参数之间无明显相关性。【中图分类号】R445【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)02-0112-03股骨尖缺血性坏死是一种严重危害劳动能力及影响生活质量的髋关节疾病，长期人量饮酒导致股骨头缺血性坏已为动物实验所证实[1],其发病机理尚未完全明丫。近年來研究发现血管内皮细胞生:长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在ANFH的发生、发展和修复过程屮起着重要作用。MR灌注成像是一种评价组织微循环状态的新技术，将其应用于ANFH血供变化的研宂是一项新兴的课题。本研究通过在给予酒精引起ANFH的过程屮，动态观察股骨头---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---MR灌注成像特点和VEGF在不同细胞中的表达情况，探讨MR灌注成像反映的血供变化与VEGF在细胞内表达的相互关系。一、材料与方法：1.动物模型制做选取新西兰家兔32只，体重(2.7±0.5)kg/只，雌雄不限，由广州中医药大学动物中心提供；随机分为两组，实验组：16只，对照组：16只；实验组动物采用灌胃法，给予烈性酒(含乙醇45%)10ml(kg•d),对照组给予10%的葡萄糖溶液10ml(kg•d)。实验组与对照组饲养方式相同，实验组分别在给药1、2、3、6月后各处死4只，对照组分别在1、2、3、6月后处死4只。2.影像检查实验组和对照组动物在处死前行MR常规及灌注扫描。采用Philips1.5T超导型磁共振机，麻醉后成功将兔仰卧位置于膝关节线圈内(使用膝关节线圈较体线圈图像质量好)，髋关节及膝关节弯曲成适当角度后固定于线圈上，采用SE序列T1WI(TR/TE=500/12ms),T2WI(TR/TE=1500/60ms),月旨肪抑制T1WI(SPIRT1WI)对股骨头行冠状位扫描，层厚3mm,间隔3mm,采集矩阵256×150,扫描范围130mm。而后用压力注射器经耳缘静脉团注Gd-DTPA0.4mmol/kg,注射速度5ml/s,注射前17s开始在冠状面中部层面行动态FFE-EPI序列T2WI(TR/TE=30/20ms,翻转角15°)扫描，层厚4mm，间隔4mm,矩阵128×128,1.9s扫描一次，连续扫描30次。应用FunctionMR功能软件，对灌注图像进行后处理。在股骨头位置上选择其中信号强度变化最明显的部位为感兴趣区(regionofinterestm，ROL)，由计算机自动生成感兴趣区的吋间-信号强度曲线，计算血流量(Perfusion)强化峰值(peakenhancementindex,PEI),峰值增强吋间(timetopeak.TTP)和平均通过时间(meantansmittime,MTT)，取3次平均值。4.组织病理分析检査方法动物处死后取双侧股骨头，10%甲醛固定5%稀硝酸脱钙5〜7天，---本文来源于网络，仅供参考，勿照抄，如有侵权请联系删除---于股骨头正中冠状面取5mm厚组织，石蜡包埋，切厚5μm的石蜡切片，HE染色，光镜观察。观察指标选取5个高倍视野，每个视野汁数股骨头軟骨下区空骨陷窝率(空骨陷窝数/骨陷窝总数×100%)，取平均值，最后计算每个实验组和对照组的平均空骨陷窝率。5.免疫组化分...