盐酸罗沙替丁醋酸酯缓释片的药动学研究吴功强摘要：盐酸罗沙替丁醋酸酯是临床上广泛应用于胃及十二指肠溃疡的H2受体拮抗剂。盐酸罗沙替丁醋酸酯为前体药物，在体内它通过小肠、血浆和肝脏的脂化作用，迅速转化成其活性代谢物罗沙替丁，在口服给药后的血浆样品不能检出，因此，所有的药动学研究均是检测生物样品中罗沙替丁的含量来实现。罗沙替丁是盐酸罗沙替丁醋酸酯的初级代谢产物。笔者在此研究服用盐酸羅沙替丁醋酸酯缓释片及缓释胶囊后的药物动力学特征，进行生物等效性评价。关键词：盐酸罗沙替丁醋酸酯；缓释片；药动学研究前言：早期的出版物中描述了多种盐酸罗沙替丁醋酸酯生物样品分析的方法，包括气质联用、高效液相色谱、液质联用。因为高效液相色谱法操作简便，其灵敏度及适用性可以满足生物样本分析的要求，所以笔者采用高效液相色谱法进行血浆中罗沙替丁浓度的测定。笔者在此描述了一种简便的高效液相色谱法，将其用于检测血浆中罗沙替丁的浓度。1.盐酸罗沙替丁醋酸酯缓释片的药动学研究发展情况盐酸罗沙替丁醋酸酯，是日本脏器制药株式会社研制开发，1986年在日本上市的中长效抑酸药物。体内通过水解作用脱乙酰基迅速转化为其活性代谢产物罗沙替丁，选择性阻断组胺H2受体，临床主要用于预防和治疗由于胃酸高分泌状态引起的消化系统疾病，如胃溃疡、十二指肠溃疡、吻合部溃疡、反流性食管炎、急性胃炎、慢性胃炎急性发作。该药尚未在国内上市，只能通过研究来检测体内活性代谢产物罗沙替丁的浓度，计算药动学参数，揭示该药在中国人体内的药动学特征，为临床合理用药提供依据。本研究采用高效液相色谱法进行血浆中罗沙替丁浓度的测定。同时选择了一种简便的高效液相色谱法，将其用于检测血浆中罗沙替丁的浓度，其具有较宽泛的线性范围（100～6000μg·L-1），以及良好的精密度和准确度。2.盐酸罗沙替丁醋酸酯缓释片的药动学研究的具体方法2.1受试者的选择条件和标准试验方案需经正规医院的医学伦理委员会讨论通过，本次研究选取32名参与者，其中男女各16名，身高（165.3±7.9）cm，体质量（56.3±6.5）kg，年龄（20.6±1.3）岁。均无药物过敏史，无肝、肾疾病史，精神状态良好，全面体格检查均正常（包括肺部听诊、肝脾触诊、心电图、心率、血压、肝肾功能、血尿常规等），排除了一切可能影响本次研究的所有因素，旨在获得最准确的研究结果，为临床合理用药提供依据。在被告知所有与药物有关可能的不良反应后，自愿签署知情同意书。受试者在受试前2周内未服过任何药物，从开始进入试验后直至试验结束，禁烟酒及任何饮料。2.2储备液及标准液的配制研究需要使用的罗沙替丁及咖啡因储备液用纯化水配制成符合0.1g·L-1的溶液。罗沙替丁储备液连续稀释制得质量浓度分别为1、2、4、8、15、30和60mg·L-1的工作标准液。向空白血浆中分别加入不同质量浓度的罗沙替丁工作标准液，得到血浆中药物质量浓度分别为100、200、400、800、1500、3000和6000μg·L-1的样品，制得标准曲线。用同样的方法制得质量浓度分别为200、800及6000μg·L-1的质控样品。咖啡因（内标物）用纯化水稀释至最终质量浓度为3000μg·L-1的内标溶液。所有的溶液在4℃冰箱中冷藏保存。接着取出经冷冻保存的血浆，室温下溶化，精密吸取100μL置于4mL试管中，分别加入内标溶液10μL、甲醇水溶液50μL（甲醇-水体积比1∶1）和pH值11的磷酸盐缓冲液100μL，再加入正己烷-二氯甲烷-异丙醇（体积比30∶1∶1.5）萃取溶剂3mL，涡旋混合10min，3000r·min-1离心10min，吸取上层有机相置于干净试管中，50℃氮气流下吹干。残渣加入流动相100μL，涡旋5min复溶[2，6-7]，得供试液。色谱条件为色谱柱，流动相：甲醇-水（含0.1%甲酸）（37∶63）；流速：0.2mL·min-1；柱温：30℃；进样量：10μL。质谱条件为离子化方式：ESI；扫描方式：选择反应监测（SRM）；离子极性：正离子；检测离子：罗沙替丁[M+H]+，m/z307.0→107.碰撞能34eV；内标（石杉碱甲）[M+H]+，m/z243.2→210.9，碰撞能30eV；扫描时间：0.5s；电喷雾电压：4.8kV；毛细管温度：320℃；源内碰撞CID：9V；鞘气流速：38arb；辅助气流速：3arb。2.3方法学验证...