姜黄素及其衍生物抑制肿瘤作用的实验研究【摘要】目的：研究姜黄素及其衍生物的体外抗肿瘤活性。方法：应用四甲基偶氮卩坐蓝(MTT)法检测姜黄素及其衍生物对多种肿瘤细胞生长的抑制作用。结果：体外抗肿瘤活性研究表明，姜黄素及其衍生物对Sw480、HL260、HepG2、MGC-803等多种人肿瘤细胞均有生长抑制作用，IC50范围为10.52〜19.51Ug/mLo结论：姜黄素及其衍生物体外具有较强的抗肿瘤作用。【关键词】姜黄素及其衍生物；抗肿瘤活性；细胞实验【中图分类号】R-0【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)04-0367-02姜黄素，又名姜黄色素(Curcumin,Cur)是从姜科植物姜黄(CurcumaLongaL.)提出出来的酚性有效单体化合物，具有抗肿瘤[1-3]＞抗炎和抗氧化⑷、抗抑郁⑸等药理作用。其中抗癌作用是姜黄素的主要药理活性之一，Cur在肿瘤治疗方面的作用越来越引起重视。姜黄素抗瘤谱广、价格低廉、使用安全，有重要的经济价值和广泛的药理作用，正被逐步运用于口腔、乳房、皮肤、结直肠和膀胱等器官癌症的临床试点研究。本实验主要以人结肠癌细胞株SW480、人白血病细胞系HL260、肝癌细胞系HepG2和人胃癌细胞系MGC-司）,803为靶细胞，对姜黄素及其衍生物进行体外抗肿瘤作用进行研究，报道如下。1材料与方法1.1材料1.1.1药品与试剂姜黄素、二氢姜黄素、双去氧基姜黄素和去甲氧基姜黄素（成都曼思特生物科技有限公司），纯度99%；二甲基亚砚（国药集团化学试剂有限公司，T20081103）；RPMI1640培养基、DMEM培养基及新生牛血清（美国Gibco公司）o1.1.2主要仪器体积分数为0.05的C02饱和湿度孵育箱（美国ThermoForma公司）;倒置显微镜（日本0lympus公Bio-Rad680型酶标仪（美国Bio-Rad公司）。1.1.3细胞株人结肠癌细胞株SW480、人白血病细胞系HL260、肝癌细胞系HepG2和人胃癌细胞系MGC-803均来源于中科院上海细胞库。1.2方法血清、青霉素100IU/mL和链霉素100Ug/mL的RPMI1.2.1细胞培养HL60、HepG2、MGC-803细胞培养于含10%小牛1640培养液中，SW480细胞培养于含10%小牛血清、青霉素100IU/mL和链霉素100Ug/mL的DMEM培养液中。置37°C、体积分数为0.05的CO2饱和湿度孵育箱中培养，取对数生长期细胞用于增殖相关实验。1.2.2MTT法检测细胞增殖准确称取0.5gMTT溶于100mLPBS液(0.02mol/LpH7.4),避光电磁搅拌30min使MTT充分溶解，用已灭菌的0.22m的微孔过滤器除菌，过滤后分装成每管1.5mL?4°C避光保存，于1周内用完。将长成对数生长期的细胞，按照105个/mL密度，接种于96孔细胞培养板，每孔接种200UL,培养24h后，加入不同终浓度的姜黄素及其衍生物(0.1-50Ug/mL),每个浓度设三孔重复，继续培养20h,然后再加入10uL浓度为5mg/mLMTT,于细胞培养箱中继续培养4h后，吸弃培养液，加入150UL的二甲基亚砚，在振荡器上振荡lOmin,待甲？N充分溶解后，于Bio-Rad680型酶标仪490nm处检测OD值。以空白对照组存活率为100%计,细胞抑制率二实验组OD值/空白对照组OD值)X100%[7]o以同一药物的不同浓度对肿瘤细胞生长抑制率作图，得到剂量反应曲线。从曲线的线性部分，根据线性回归方程求出该药物的半数抑制浓度IC50,即细胞存活率减少50%时的药物浓度。试验重复3次。1.3统计学处理实验结果用SPSS16.0统计软件处理，同时计算各药物的IC50o2结果2.1对肿瘤细胞的生长抑制作用通过姜黄素及其衍生物不同浓度对不同肿瘤细胞的抑制率比较，可知姜黄素、二氢姜黄素、双去氧基姜黄素和去甲氧基姜黄素对HL60、HepG2、MGC-803、SW480等人肿瘤细胞有一定的生长抑制作用，不同浓度的姜黄素、二氢姜黄素、双去氧基姜黄素和去甲氧基姜黄素作用于各肿瘤细胞48h以后，随着剂量的增加，细胞存活率显著下降，对各肿瘤细胞生长抑制率也显著上升，呈剂量依赖关系。对各种肿瘤细胞的半数细胞抑制浓度IC50范围为为10.52〜19.51ug/mL,平均IC50值均小于20ug/mL,0其中，去甲氧基姜黄素对上述四种瘤株的IC50分别为13.87、12.78、12.30、12.48Hg/mL,可见去甲氧基姜黄素的体外抗肿瘤作用比较明显。3讨论姜黄素具有多种药理活性，但由于存在水溶性差、易水解、不稳定，口服吸收后迅速被肝脏代谢，首过消除现象明显诸多不足，限制了其进一步临床开发应用。为促进姜...